Usar o objeto

BisfenóisA coluna de afinidade é capaz de especificidade de purificação de amostras de bisfenol A e bisfenol S, que usa gel de aglutinosa em forma de coluna como veículo de fase sólida, o gel de aglutinosa é acoplado com anticorpos de bisfenol A para formar um imunosorbente, a coluna é feita de coluna de imunoafilidade. É capaz de purificar específicamente a coluna de afinidade de bisfenol A em amostras. A coluna de afinidade de bisfenol A é amplamente utilizada na extração de amostras, como alimentos e bebidas, o método é rápido, fácil de operar e de alta precisão, desempenhando um papel muito importante na melhoria da qualidade e segurança dos alimentos.

O método de instruções aplica o método de coluna de afinidade para detectar bisfenóis em alimentosMétodo de teste A.

GB 5009.305-2025 Norma Nacional de Segurança Alimentar Determinação de Bisfenol A, Bisfenol F e Bisfenol S em alimentos

Condições de armazenamento

A coluna de afinidade é mantidaEm condições de 2-8 ° C, absolutamente não pode congelar, com uma vida útil de 18 meses. Recomenda-se o uso a temperatura ambiente (18-30 ° C).

Preparação de soluções experimentais

lMetanolSolução em água (80+20):Determinação de metanol80mL, Adicione 20 ml de água e misture.

lMetanolSolução em água (40+60):Determinação de metanol40mL, Adicione 60 ml de água e misture.

l盐酸溶液(10+90):Medição10 ml de ácido clorhídrico concentrado, adicionar 90 ml de água e misturar.

lSolução PBS:SeráO pacote de reagente tampão PBS (G3001) é dissolvido em 1000 ml de água pura e misturado.

Passos de análise

Método GB 5009.305-2025

1.0 extração de amostras

1.1 Carne e produtos de carne, produtos aquáticos, produtos lácteos sólidos e semisólidos (leite em pó, leite fermentado, etc.), receitas para bebês e crianças

Denominação1 g de amostra (com precisão até 0,01 g), colocado em um tubo de centrifugação de polipropileno de 50 ml, adicionar 50 μL de líquido de mistura interna de isótopos e colocar em reposo por 30 minutos após a mistura oscilante. Adicionar 2mL de água, oscilar o vortex 30s e adicionar 5mL de acetonitril mistura vortex. Extração por ultra-som de líquido misturado 15min, 10 min por centrifugação de 10000r / min a 4 ℃. Remova o líquido líquido e coloque-o em um tubo de sopro de nitrogênio de vidro, sopre lentamente o nitrogênio a cerca de 2 mL a 40 ℃, adicione 8mLPBS e misture para ser purificado.

1.2 Ovos, leite e produtos lácteos líquidos

Denominação1 g de amostra (com precisão até 0,01 g), colocado em um tubo de centrifugação de polipropileno de 50 ml, adicionar 50 μL de líquido para a mistura interna de isótopos e colocar em reposo por 30 min após a mistura oscilante. Adicionar 5mL de acetonitril, extração por ultra-som após mistura em vortex 15 min, 10 min por centrifugação a 10.000 r/min a 4 ℃. Remova o líquido líquido e coloque-o em um tubo de sopro de nitrogênio de vidro, sopre lentamente o nitrogênio a cerca de 2 mL a 40 ℃, adicione 8mLPBS e misture para ser purificado.

1.3 Grãos e alimentos complementares para bebês

Denominação1 g de amostra (com precisão até 0,01 g), colocado em um tubo de centrifugação de polipropileno de 50 ml, adicionar 50 μL de líquido de mistura interna de isótopos e colocar em reposo por 30 minutos após a mistura oscilante. Adicionar 10 mL de solução de metanol-água (80 + 20), oscilar por 30 s, extração por ultra-som por 15 min, centrifugação por 10 min a 10 000 r / min a 4 ℃. Remova o líquido líquido e coloque-o em um tubo de sopro de nitrogênio de vidro, sopre lentamente o nitrogênio a cerca de 2 mL a 40 ℃, adicione 8mLPBS e misture para ser purificado.

1.4 Vegetais e frutas

Denominação1 g de amostra (com precisão até 0,01 g), colocado em um tubo centrífugo de polipropileno de 50 ml, adicionado 100 μL de solução de ácido clorhídrico (10 + 90), misturado e adicionado 50 μL de isótopoLiquido misturadoDeixe em reposo 30 min após a mistura oscilante. Adicionar 5mL de acetonitril, oscilação de vortex 30s, extração por ultra-som 15min, centrifugação de 4 ℃ 10000r / min 10min. Remova o líquido líquido e coloque-o em um tubo de sopro de nitrogênio de vidro, sopre lentamente o nitrogênio a cerca de 2 mL a 40 ℃, adicione 8mLPBS e misture para ser purificado.

1.5 Bebidas

Denominação1 g de amostra (com precisão até 0,01 g), colocado em um tubo de centrifugação de polipropileno de 2 ml, adicionar 50 μL de líquido de mistura interna de isótopos e colocar em reposo por 30 minutos após a mistura oscilante. 10min de centrifugação de 10000r/min. Remova o líquido para um tubo de centrifugação de polipropileno de 50 mL e adicione a solução de LPBS de 10 mL para ser misturada e purificada.

NotaA amostra de esclarecimento (como água pura, água mineral, etc.) pode ser adicionada diretamente à mistura de PBS sem centrifugação.

2.0 Limpeza da amostra

2.1 Ativação da coluna de afinidade

Conecte a coluna de imunoafilidade10,0 ml sob a seringa. A pressão regulada permite que a solução de proteção da coluna passe lentamente pela coluna de imunoafilidade a uma velocidade de fluxo de aproximadamente 2 mL / min (1 gota / s), até que uma pequena quantidade de ar passe pela coluna. Medir com precisão 5mL de ativo de coluna de afinidade (padrão de produtos de coluna de afinidade) e lavar a coluna de afinidade a uma velocidade de fluxo de 1 gota / s até que uma pequena quantidade de ar atravesse a coluna. Lave a coluna uma vez com 5,0 ml de água pura, descarte todo o fluxo de saída, e depois lave a coluna com uma solução de PBS de 10,0 ml de pH7,4, a velocidade de fluxo é de 1 gota / segundo, até que a última solução de 2-3 ml encha a coluna, pare de pressionar e bloqueie a saída inferior com um tampão, para uso.

NOTA: Para melhorar ainda mais o bisfenolEfeitos de limpeza e adsorção da coluna de afinidade imunológica A, que precisa ser ativada antes de ser usada. A coluna de afinidade após a ativação deve ser usada dentro de 1 hora.

2.2 Limpeza da coluna de afinidade

取A etapa 1.0 do líquido para purificação passa por toda a coluna, a velocidade de fluxo é de 1 gota / segundo, descarte todo o líquido de saída, em seguida, lavar a coluna de imunoafilidade com 10 ml de água, a velocidade de fluxo é de 1-2 gotas / segundo, após a gota de água terminar, a coluna de imunoafilidade é secada com a bomba de vácuo. Adicionar 1 mL de metanol para a lavagem, a velocidade de fluxo é de 1-2 gotas / s, recolher o líquido de lavagem em um tubo de sopro de nitrogênio de vidro e secar lentamente com nitrogênio a 40 ° C. Adicionar com precisão 0,40 mL de metanol, misturar em vortex 10s, depois adicionar com precisão 0,60 mL de água, misturar em vortex e transferir para um tubo de centrifugação de polipropileno de 2 mL, centrifugar a 10.000 r / min por 5 min, levantar o líquido para a determinação por cromatografia líquida-espectrômetro de massa em série.

Precauções

1)Não altere arbitrariamente as etapas no manual de operação. Para alterações, entre em contato com o departamento técnico da empresa para confirmar se as alterações são razoáveis.

2)Durante as etapas de operação, quando a amostra passa pela coluna, lava e lava, certifique-se de controlar a velocidade de fluxo, não muito rápido, caso contrário, o resultado do teste será baixo.

3） Este experimento minimiza o uso de recipientes de plástico, especialmenteProdutos de plástico de material PC, uso experimental de água para tentar colocar em vasos de vidro para destilação.

Lista de configurações de colunas de afinidade

Equipamento e reagentes necessários