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Telefone
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Endereço
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Mesa Labs
Determinação precisa de antígenos livres em soro 100% com Gyrolab
Datas:2025-11-05Leia:1
Gregor Jordan e outros da Roche desenvolveram um método de análise imunológica para detectar antígenos livres em soro inteiro com base na plataforma Gyrolab, projetado para resolver os desafios na análise de plasma:
A diluição da amostra leva à dissociação do complexo antígeno-anticorpo,Superestimação da concentração de antígeno livre
A meia-vida do complexo anticorpo-antígeno é curta (<100 segundos) e os métodos LBA tradicionais não podem capturar com precisão
Em presença de anticorpos terapêuticos, é difícil distinguir os antígenos em estado livre e ligado
Este método utiliza o princípio da análise imunológica ponte, com as seguintes etapas específicas:
1
Os pacotes de anticorpos de captura marcados são colocados em uma coluna de afinidade de afinidade de molho em cadeia
2
InscreverAmostras de soro não diluídasque liga o antígeno livre ao anticorpo de captura
3
InscreverDetecção de anticorpos marcadosLigação a outro epitopo do antígeno
4
Detecção de sinais, quantificação de antígenos livres
Requisitos-chave do método
Captura de anticorpos e detecção de epitopos de antígeno para reconhecimento de anticorposNão sobreposição
Captura de anticorpos e anticorpos terapêuticosO mesmo epitopo de competição ligado antígeno
Tempo de incubação muito curto (preferivelmente < 2 segundos)
Sem diluição da amostra para evitar a dissociação do complexo
Objetivos da pesquisa
Avaliar a "eficiência de limpeza" de anticorpos para CCL2, ou seja, se os anticorpos se ligam eficazmente e eliminam CCL2 livre.
研究Método
Plataforma e Métodos
Projeto Experimental
Curvas de calibração e controle de qualidade
Faixa de calibração: 2430 pg/mL → 10 pg/mL
Amostra do QC:
Alta qualidade: 1820 pg/mL
QC médio: 230 pg/mL
Baixo QC: 30 pg/mL
Critérios de aceitação:
desvio de ± 20%, CV < 15%
Grupo de intervenção de drogas
CNTO0888: anticorpo único específico contra CCL2 (controle)
CKLO2-SG1095: anticorpos anti-CCL2 duplamente específicos (grupo experimental)
Configuração da concentração：
Dose baixa: 7,5 ng/mL ou 15 ng/mL
Dose elevada: 10 μg/mL
Resultados e discussões
CNTO0888 elimina quase totalmente CCL2 livre em altas concentrações
A eficiência de limpeza do CKLO2-SG1095 é ligeiramente menor, mas ainda é significativamente melhor do queGrupo em branco
Duamab ainda tem uma capacidade de limpeza moderada em baixas doses, sugerindo sua dependência da dose
Objetivos da pesquisa
Em amostras de soro não diluídas, as concentrações de suplemento livre C5 são medidas de forma rápida e precisa para avaliar a eficácia in vivo de anticorpos anti-C5, como eculizumab e crovalimab.
研究Método
Plataforma e Métodos
Experiênciaresultado
Gama linear da curva padrão: 0,55 – 3000ng / ml
LOQ：0.5 ng/mL， Suficiente para detectar < 0,1% de C5 livre(C5 humano total ≈ 400 nM)
Resumo
Vantagens técnicas do método
A plataforma Gyrolab tem um modo de fluxo sem incubação,Reduz significativamente as ligações não específicas na matriz, reduzindo eficazmente a interferência da matrizPode ser suportado na análise de objetos livresTeste de soro completoeReduzir a dissociação do complexo anticorpo-antígeno causada pela incubaçãoTorna a análise dos objetos livres mais precisa e eficiente.
Referências:
[1] Método para determinar o antígeno livre de um anticorpo em uma amostra, Gregor Jordan, Martin Schaefer, Maria Viert; Pub No. US2023/0393125 A1.