A tecnologia de indução de pulso de resistência (RPS) é uma tecnologia emergente de caracterização de nanopartículas individuais e atualmente baseada em eletricidade.Caracterização das partículasMétodos. Avaliar o tamanho e a concentração de vesículas extracelulares e o potencial zeta medindo as mudanças de corrente através de nanoporos minúsculos. Esta abordagem tem as vantagens de precisão, rapidez, facilidade e alta sensibilidade, tornando-a uma ferramenta ideal para avaliar a qualidade do método de separação de vesículas.

Comparação de dados de tamanho de partículas de cinco métodos de separação

Comparação de dados de concentração de cinco métodos de separação

Comparação de dados de potencial zeta de cinco métodos de separação

Através da tecnologia RPS, os pesquisadores analisaram detalhadamente a distribuição de tamanho de partículas, a concentração de partículas e a pureza dos métodos de separação. Os resultados mostraram que, embora altas concentrações de partículas fossem obtidas usando o método de ultrafiltragem, a estratificação de coluna qEV e o método ExoQuick, a centrifugação diferencial tradicional teve o melhor desempenho em pureza.

Distribuição do tamanho das partículasUC, UF, exoEasy e qEV separam partículas EV de tamanho consistente, em torno de 71 nm, enquanto que a ExoQuick separa partículas EV de tamanho ligeiramente maior, em média de 77 nm.

Concentração de partículasUltrafiltração (UC) mostra a maior concentração de partículas, atingindo 2,10 x 10¹²/mL， A concentração de partículas do método UC é relativamente baixa, 7,33 x 10.¹⁰em / ml.

PurezaO método UC possui a pureza EV mais elevada, com o número de partículas contidas por miligrama de proteína atingindo 7,88 x 10¹¹- É.

Comparação de dados de pureza EV de cinco métodos de separação

Cada método de separação tem suaVantagens. De acordo com os resultados do estudo, a centrifugação de supervelocidade, embora operacional complexa e longa, continua a ser a primeira escolha quando os experimentos exigem EVs de maior pureza; No entanto, para cenários de aplicação que buscam alta eficiência e produção em massa, o método de ultrafiltragem e a qEV column stratification fornecem velocidades de separação mais rápidas e concentrações de partículas mais elevadas.

Esquema do funcionamento da plataforma de análise de partículas NanoCoulter

Compreender as vantagens e desvantagens dos diferentes métodos de separação ajudará os pesquisadores a conduzir melhor pesquisas experimentais e desenvolvimento de aplicações relacionadas com vesículas extracelulares. Este artigo fornece uma avaliação abrangente de cinco métodos de separação de vesículas extracelulares usando a tecnologia RPS, com o desempenho preciso do NanoCoulter, fornecendo uma base científica para os pesquisadores escolherem a técnica de separação adequada.

A escolha do método de separação adequado deve considerar os requisitos específicos das necessidades experimentais, incluindo eficiência, pureza e facilidade de operação da separação. Selecionando o método adequado de caracterização de partículas,No estudo acima, o NanoCoulter para a caracterização de EV demonstra as seguintes vantagens:

Vantagem 1: Detecção de partículas individuais, precisão sem interferência

A NanoCoulter, com sua tecnologia avançada de RPS em nanoescala, permite a captura e análise precisas de cada nanopartícula.Imagine que, em um biofluido complexo, cada pequeno EV que passa por um nanoporo não escape ao seu “exame médico completo”.Quebra o fenômeno de distorção do sinal de partículas grandes em métodos ópticos tradicionais para bloquear partículas pequenas.Especialmente para os EVs.Cada um dos dados das amostras de biofluidos, seja em tamanho, concentração ou potencial zeta, vem de medições diretas de partículas individuais para garantir que os resultados sejam verdadeiros e confiáveis.Essa precisão pode levar o estudo das vesículas celulares a um novo nível!

Vantagem 2: Análise multiparâmetro de alta precisão

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O NanoCoulter é capaz de realizar uma análise abrangente do tamanho de partículas, distribuição de tamanho de partículas, concentração de partículas e potencial zeta de EVs.A análise precisa da distribuição do tamanho das partículas nos ajuda a entender a distribuição do tamanho real das amostras de EVs, onde as concentrações de partículas refletem a abundância e a massa de separação dos EVs, e o potencial zeta está intimamente relacionado com a estabilidade dos EVs e a direcionamento de transmissão de EVs engenhados.Esses dados nos fornecem informações abrangentes sobre EVs, fornecendo um apoio sólido de dados para pesquisas científicas e aplicações clínicas de nanofarmacêuticos.

Vantagem 3: Adaptação a amostras complexas

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Ao contrário dos métodos ópticos tradicionais, que fazem uma análise holística das partículas em amostras, o NanoCoulter é excelente em amostras complexas e multidispersas.Capaz de caracterizar com precisão nanopartículas em baixos índices de refração, altas concentrações de íons ou líquidos de baixa fluidez, garantindo resultados confiáveis mesmo em líquidos biológicos complexos, é especialmente adequado para pesquisas no campo da biomedicina.

Vantagem 4: Processo operacional rápido e fácil

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Os processos operacionais do NanoCoulter são simples e rápidos, sem a necessidade de pré-tratamento complicado de amostras, bem como de motores de aquecimento e etapas de calibração do equipamento.Cada chip nanoporoso é rigorosamente calibrado e verificado durante a produção, sem a necessidade de consumir produtos padrão no cliente.Isso permite que os pesquisadores obtenham resultados mais rapidamente e acelerem o ritmo das descobertas científicas.

Vantagem 5: Aplicação ampla

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A área de aplicação do NanoCoulter vai muito além da pesquisa de EVs.Em várias áreas, como a biomedicina, a ciência dos materiais e o monitoramento ambiental, demonstra um enorme potencial e valor.Com sua alta precisão, alta estabilidade e ampla aplicação, o NanoCoulter está gradualmente se tornando o auxiliar competente que os pesquisadores precisam.