Microscópio confocal a laserÉ um dispositivo de microimagem óptica de alto desempenho que combina a fonte de luz laser com a tecnologia de confocação, eliminando a interferência de dispersão de luz no plano não focal para alcançar a imagem tridimensional de resolução subcelular, amplamente utilizado nas ciências da vida, ciências dos materiais e medicina.

　　Microscópio confocal a laserO núcleo do processo é a “via confocal” e a “imagem de varredura de ponto”, em quatro etapas:

Foco a laser: a fonte de luz a laser é filtrada pelo filtro de excitação e focada em um único ponto minúsculo da amostra através da lente, estimulando a amostra para produzir fluorescência.

Coleta de sinal: a luz emitida pela amostra retorna ao longo do caminho de luz original e, após reflexão espectroscópica, entra no apendice de luz do orificio da agulha (orificio confocal). Somente a luz do ponto de foco é capaz de atravessar com precisão o orificio da agulha, e a luz dispersa de níveis não focais, como a camada superior e inferior da amostra, é bloqueada pelo orificio da agulha.

Scan de ponto e imagem: O sistema de varredura controla o feixe de laser na superfície da amostra ponto a ponto e linha a linha, e o sinal óptico de cada ponto é recebido pelo detector fotoelétrico e convertido em sinal elétrico.

Reconstrução tridimensional: o computador converte o sinal de cada ponto de digitalização em pixels para formar uma imagem bidimensional; Ao ajustar a distância entre o objeto e a amostra, obtém uma tomografia bidimensional de diferentes profundidades e reconstrui uma imagem tridimensional da amostra por sobreposição de software.

Manutenção diária: limpar regularmente os objetos (limpar suavemente com o líquido de limpeza de lente mergulhado em papel de lente), evitar o laser direto aos olhos (usar óculos protetores a laser especiais durante a operação), manter a mesa de amostras limpa (evitar a contaminação da amostra).