Alguns conceitos na cromatografia de gás:

Cromatografia de gás:

Usando gás como fase de fluxo, uma técnica de separação para alcançar a separação de amostras complexas com base na diferença de força de ação entre os componentes e a fase fixa. O objeto de separação é volátil e térmicamente estável, com um ponto de ebulição geralmente não superior a 500 graus.

Gás:

Gas transportador – gás usado para transportar amostras através de todo o sistema.

Detector de gases – gases de suporte necessários para certos detectores, como: FID。

Introdução da amostra:

O processo de introdução do vapor da amostra no transportador de gás. O processo deve ter menos impacto no vapor da amostra.

Colunas cromatográficas:

separação dos componentes da amostra.

Detector:

Identificação e resposta aos componentes da amostra da coluna de saída.

Coleta de dados:

Converta o sinal do detector em cromatografia para análise qualitativa e quantitativa manual ou automática.

Por que usar armadilhas para capturar gás na via do ar; Quais são os tipos de armadilhas de captura no GC?

Os poluentes comuns nos veículos GC são a umidade, o oxigênio, os compostos de hidrocarbonetos e os hidrocarbonetos halogenados, que têm um grande impacto na vida útil da coluna cromatográfica e na detecção do analítico, e os efeitos adversos incluem:

水分：

é a causa comum da degradação de fase fixa da coluna cromatográfica; pode danificar o instrumento;

Oxigênio:

poluentes comuns; É a causa comum da degradação de fase fixa da coluna cromatográfica e da diminuição do desempenho do revestimento da entrada da amostra; pode causar a decomposição instável do analítico;

Compostos de hidrocarbonetos e hidrocarbonetos halogenados:

Reduzir a sensibilidade do detector aumentando o ruído de fundo do detector; Também podem causar desvios ou flutuações da linha de base, picos cromatográficos de poluentes, ruído ou compensação elevada da linha de base.

A armadilha de captura de água, oxigênio e hidrocarbonatos é a armadilha usada no GC.

Que tipo de armadilha de captura devem ser equipados com os diferentes detectores?

FID, NPD, FPD - ar, sopro de cauda, hidrogênio → armadilha de captura de hidrocarbonetos (por exemplo, 5060-9096)

FID, NPD, FPD, TCD - armadilha de captura de gás → umidade e oxigênio (por exemplo, OT3-2)

ECD - sopro de cauda → armadilha de captura de água e oxigênio (por exemplo, OT3-2)

TCD - gás de referência → armadilha de captura de hidrocarbonetos (por exemplo, 5060-9096)

MSD - armadilha combinada de captura de hélio, metano → remoção de água, oxigênio e hidrocarbonetos (por exemplo, RMSH-2) e armadilha de captura de indicação de oxigênio (por exemplo, IOT-2-HP)

A armadilha de captura acima é recomendada de 6 a 12 meses, dependendo da frequência de uso do cliente.

Quais são os produtos de consumo envolvidos no porto de importação da amostra do GC?

Seringa, almofada de amostragem, anel O 5188-5365, revestimento, placa plana de fluxo plano (almofada de vedação dourada), almofada metálica 5061 - 5869, almofada de vedação de grafite, porca de coluna.

5. Por que substituir a tampa? Quais são os tipos? Como escolher a separação de amostra de acordo com as necessidades do cliente?

As barreiras devem ser substituídas regularmente para evitar: vazamento de gás, descomposição, perda de amostras, diminuição do fluxo de coluna ou desvio de fluxo, pico de saída fantasma, diminuição do efeito da coluna. Diferentes barreiras têm diferentes propriedades:

Barreiras otimizadas para perda e temperatura (BOT): 5183-4757

Ampla gama de temperatura, baixa perda → adequado para espectro de massa, entrada de amostra de alta temperatura de 400 graus, reduzir a adesão na entrada de amostra.

Isolamento de longa vida 5183-4761

pré-perfuração, prolongar a vida útil, reduzir o núcleo; A amostragem automática é preferida para a separação, adequada para operação durante toda a noite; 400 e 350 graus de alta temperatura.

Separação verde 5183-4759

Os três tipos acima são separadores de alto nível, tratados com plasma, sem adesão ao separador

Separação universal:

Temperatura de 350 graus, número de vezes até 200 vezes, econômica;

6. Como escolher uma almofada de grafite e uma porca de coluna?

Primeiro conheça os dois materiais da almofada de grafite:

Grafite → Material macio e alta temperatura.

vespel → é feito de poliamida resistente a altas temperaturas, o material é duro e a alta temperatura produz perdas.

Almofadas de grafite e porcas de coluna:

Almofadas curtas com chapéu curto, almofadas longas com chapéu comprido (por exemplo, o parafuso de coluna de interface MS 05988-20066 deve ser equipado com 85% de vespel pré-envelhecimento, 15% de almofadas longas de grafite, o parafuso de coluna geral pode ser equipado com 85% de vespel, 15% de almofadas curtas de grafite)

A escolha da almofada de grafite (deve depender do material e do tamanho do diâmetro interno da coluna cromatográfica), a frequência de substituição geralmente substitui a coluna cromatográfica, quando o vazamento é substituído.

Qual é o papel do revestimento e quando substituir o revestimento? Quais fatores devem ser considerados na escolha do revestimento?

O revestimento é o elemento central do sistema de amostragem, onde a amostra evapora e se transforma em gás. A substituição regular do revestimento depende principalmente das seguintes circunstâncias: comparação do espectrograma feito anteriormente; Limpeza da amostra; Os picos cromatográficos são anormais: picos fantasmas, mudanças na forma do pico, má reprodutividade, decomposição de alta temperatura da amostra, etc.

Factores a serem considerados na escolha do revestimento: tipo de abertura de amostragem/técnica de amostragem, volume do revestimento, manuseio ou desativação do revestimento, propriedades especiais (algodão de quartzo, copo de quartzo, cone de diámetro fino, etc.)

Por que usar revestimento desativado e algodão de vidro? Quais substâncias são usadas para viver o revestimento sem algodão de vidro?

Os pontos ativos no revestimento da entrada da amostra podem adsorber os componentes da amostra, causando atrasos de pico cromatográfico e perda de sensibilidade e reprodutividade.

Quando a amostragem não é desviada e a análise de compostos ligeiramente polares é recomendada a utilização de revestimentos desativados.

Utilização do algodão:

A. Reduzir a discriminação térmica para fornecer uma área de superfície suficiente para a amostra * volátil

B. Captura de componentes não voláteis e escombros para que não entrem na coluna cromatográfica

C. Limpe a amostra da agulha da seringa para melhorar a reprodutividade e evitar resíduos da amostra no compartimento.

Os compostos usados ​​para desativar sem revestimento de algodão de vidro são: fenóis, ácidos orgânicos, pesticidas, aminas, drogas abusivas, compostos polares reativos, compostos térmicamente instáveis.

Modo de amostragem sem divergência: análise de vestígios, baixa concentração de amostra, baixa velocidade de fluxo e pequena amostragem.

Modo de amostragem de fluxo: alta concentração de amostra, grande velocidade de fluxo e grande volume de amostragem.

Anéis O de hidrocarburos fluorados e anéis O de grafito

Anéis O de hidrocarburos fluorados: não são fáceis de deformar, fáceis de substituir, usados ​​na maioria dos casos

Anel O de grafito: fácil de deformar e descascar, usado quando a temperatura da entrada da amostra é superior a 350 graus.

Frequência de substituição: ambos geralmente substituem o anel O ao mesmo tempo quando trocam o revestimento

10. Como limpar a placa de desvio (almofada de vedação dourada)

A. Limpeza por ultra-som em solvente, secagem;

B. Desativação com reagentes não-clorosilanizados: HMDS (hexametildisilano) ou BSTFA (N, O-duplo (* silsilanilo) ou BSA (N, O-duplo (* silsilanilo) acetamida) ou TSIM, TSIM (N-* silsilanidazol)

C. Limpar com solvente, primeiro lavar inerte - torfeno, depois lavar com álcool - metanol, secar.

Quais são os detectores NPD, ECD, TCD, FID, FPD e quais são as características de desempenho?

Quais são os parâmetros da coluna cromatográfica? Como escolher uma coluna cromatográfica para o cliente com base nesses parâmetros?

Parâmetros da coluna cromatográfica: fase fixa, comprimento da coluna, diâmetro interno, espessura da membrana.

Escolha de fase fixa: princípio de solvência semelhante.

Pilares polares não/fracos – normalmente usados! Colunas polares médias – adequadas para separações complexas/difíceis; Colunas polares fortes - são usadas principalmente em aplicações especiais.

Comprimento da coluna:

Análise rápida de amostras simples de 10 a 15m, geralmente abaixo de dez componentes

Comprimento padrão de colunas de 25 a 30 m para a maioria das aplicações

Análise de amostras complexas de 50m, 60m e 100m

Diâmetro interno:

Colunas de enchimento alternativas de grande diâmetro de 0,53 mm podem suportar amostras de volume maior, análise de vestígios

Diâmetro de 0,32 mm, amostragem de fluxo divergente / sem fluxo divergente, pode suportar amostragem de volume maior

0,25 mm de diâmetro estreito, aplicação GC / MS, maior efeito de coluna

0.18mm diâmetro mais rápido separação de alto efeito de coluna

GC rápido de 0,10 mm, separação rápida para requisitos elevados do instrumento

Espessura da membrana:

Película fina de 0,10um, retenção e baixa capacidade de coluna para compostos de alto ponto de ebulição, amostras densas de componentes ou compostos sensíveis ao calor de 0,25 ~ 0,50um espessura de película padrão

1.0 ~ 10.0um retenção de película espessa e alta capacidade de coluna para compostos voláteis com baixo ponto de ebulição

A membrana espessa é benéfica para esconder o local ativo, mas a perda da coluna inferior de alta temperatura é maior

O que significa o limite de temperatura da coluna cromatográfica, como 60 ° C a 240 ° C / 260 ° C?

60 ℃ - Temperatura inferior, abaixo dessa temperatura, o efeito da coluna será reduzido, mas não danificará a coluna cromatográfica

240 ° C - limite máximo de temperatura constante, pode ser usado durante longos períodos nessa temperatura

260 ℃ - Temperatura máxima de aquecimento do programa, não deve exceder essa temperatura e não deve ser usada por mais de 10 minutos nesta temperatura

Conheça vários parâmetros relativos às colunas de cromatografia líquida e a classificação e aplicação das colunas de cromatografia de Agilen.

Área de superfície - a soma da superfície externa da partícula e da superfície do orifício interno, expressa em m2/grama;

A área de superfície elevada para a separação de amostras multicomponente tem uma forte capacidade de retenção, capacidade de coluna e grau de separação;

O preenchimento com baixa superfície pode chegar rapidamente ao equilíbrio, especialmente importante para lavagem em gradiente

Diâmetro do orifício - tamanho médio do orifício ou cavidade da partícula, gama 60-10.000 Å

As partículas de preenchimento de grandes buracos podem prolongar o tempo de retenção das macromoléculas solúveis na superfície do preenchimento, alcançando a separação completa e melhorando a forma do pico; amostra MW≤4000, escolher 80Å diámetro de abertura, amostra MW> 4000 escolher 300Å diámetro de abertura
Cobertura de carbono - o efeito na separação cromatográfica, a quantidade de fase ligada ligada à matéria matriz.

Alta cobertura de carbono: maior resolução e longo tempo de análise; Cobertura de baixo carbono: tempo de funcionamento reduzido

Fechamento/fechamento - Efeitos na separação cromatográfica, ligação de hidroxilo de silício livre (ligação secundária) com cadeias de alcanos mais curtas

Fechamento: atenuação do pico de atraso cromatográfico causado pela reação de hidroxilo de silício ácido com os resíduos da superfície do silicone dos componentes a testar

Para amostras polares, as colunas cromatográficas não seladas e seladas diferem significativamente em seletividade

Tamanho da partícula - 1.8um3.5um → separação rápida

5um→Padrão da indústria

7um→Preparação da coluna

15. Como lavar a coluna de cromatografia líquida?

Para a lavagem de colunas de cromatografia de fase inversa:

Enxague as colunas cromatográficas (colunas de análise) com pelo menos 25 ml de cada um dos seguintes solventes:

Fase de fluxo sem sal tampão

100% metanol, 100% acetonitril, 75% acetonitril + 25% isopropanol, 100% isopropanol, 100% diclorometano, 100% hexano

* Se a coluna é lavada com hexano ou diclorometano, a coluna deve ser lavada com isopropanol antes de reutilizar a fase de fluxo inverso!!!

Para a lavagem de colunas de cromatografia de fase:

Enxague as colunas cromatográficas (colunas de análise) com pelo menos 50 ml de cada um dos seguintes solventes:

50% metanol + 50% triclorometano

Acetato de etilo 100%

Como envelhecer a coluna de cromatografia de gás?

Após a instalação da coluna de cromatografia, primeiro soprar a coluna de cromatografia de gás com pelo menos 3 vezes a velocidade de fluxo de trabalho normal, em seguida, ajustar a velocidade de fluxo de gás para a velocidade de fluxo normal, começando a aquecer rapidamente de 100 graus para a temperatura de envelhecimento, envelhecimento da coluna de cromatografia.

Temperatura de envelhecimento - no estado de temperatura superior à temperatura final da análise da amostra de 20 graus, mas não excedendo o limite máximo da temperatura da coluna cromatográfica, o método de temperatura constante de 2 horas envelhece rapidamente uma nova coluna cromatográfica capilar, a taxa de aquecimento da coluna cromatográfica quando envelhecer não tem limite, você pode usar a taxa de aquecimento para envelhecer a coluna cromatográfica.

Quais são os componentes importantes do cromatográfico líquido? Quais são os detectores de fase líquida?

Desgasificadores, bombas, caixas de temperatura de coluna, amostradores automáticos, detectores. Os detectores são:

VWD detector de comprimento de onda variável UV, DAD detector de matriz de diodos, MWD detector de comprimento de onda múltiplo, RID、 Detector de refração diferencial, detector de fluorescência FLD.

Como escolher a cabeça de filtro de entrada de solvente?

Cabeças de filtro de solvente para fase líquida convencional e capilar são: cabeça de filtro de vidro com 20 μm de diâmetro (5041-2168), cabeça de conexão PTFE de 5 mm / 3,2 mm (5062-8517), cabeça de filtro de aço inoxidável com 12-14 μm de diâmetro (01018-60025)

Cabeça de filtro de solvente para preparação de fase líquida: cabeça de filtro de vidro com 40 μm de diâmetro (3150-0944), cabeça de conexão de PTFE de 7 mm / 4 mm (G1361-23204)

Se o fluxo envolve os seguintes solventes, deve ser evitado o uso de cabeças de filtro de aço inoxidável: iodeto de lítio, altas concentrações de ácido nítrico e ácido sulfúrico, soluções de ácido orgânico em solventes orgânicos, como o ácido acético de 1% no metanol corroe o aço inoxidável, tetracloreto de carbono e isopropanol ou mistura de THF, etc.

A limpeza diária do filtro de vidro pode ser mergulhada em ácido nítrico de 35% por 1 hora (sem limpeza por ultra-som, causará ruptura)

19. Guia de seleção de piscinas de circulação

Coluna de cromatografia líquida capilar (diâmetro interno 0,3 ou 0,5 mm) 500 nL de piscina de circulação;

Colunas de cromatografia líquida de microdiâmetro ou poupança de solventes (diâmetro interno de 1,0 ou 2,1 mm) com piscina de semicirculação;

Colunas cromatográficas líquidas tradicionais (diâmetro interno 3,0 ou 4,6 mm) contrapressão padrão da piscina de circulação superior a 100 bar, forma de piscina de circulação de alta pressão; amostra MW≤4000, escolha o diámetro de 80Å, amostra MW> 4000 escolha o diámetro de 300Å;

Cobertura de carbono - o efeito na separação cromatográfica, a quantidade de fase ligada ligada à matéria matriz.

Alta cobertura de carbono: maior resolução e longo tempo de análise; Cobertura de baixo carbono: tempo de funcionamento reduzido

Efeitos na separação cromatográfica, ligação de hidroxilo de silício livre (ligação secundária) com cadeias de alcano mais curtas

Fechamento: atenuação do pico de atraso cromatográfico causado pela reação de hidroxilo de silício ácido com os resíduos da superfície do silicone dos componentes a testar

Para amostras polares, as colunas cromatográficas não seladas e seladas diferem significativamente em seletividade

Tamanho da partícula: 1.8um3.5um → separação rápida

5um→Padrão da indústria

7um→Preparação