O espectrofotômetro visível ultravioleta permite análises quantitativas e qualitativas medindo as propriedades de absorção da substância na faixa de luz visível ultravioleta (190-900 nm). Seus principais padrões de medição e cenários correspondentes são os seguintes:
Transmissão (T%)
Princípio: medir a proporção de transmissão da amostra para a luz de entrada, a fórmula é
T% = I0I x 100%, onde I é a intensidade da luz transmitida e I0 é a intensidade da luz de entrada.
Cenário aplicável:
Determinação da concentração da solução: Calcule rapidamente a concentração do solúvel na solução através do desenho de curvas padrão (como a Lei de Bill-Lambert), como a detecção de íons de metais pesados (como chumbo, cádmio) em monitoramento ambiental.
Análise de espessura e uniformidade da película: medir a transmissibilidade da película óptica (por exemplo, filtros, revestimentos) e avaliar a sua espessura e uniformidade da superfície.
Pesquisa de transmissão de luz de materiais: Analise as propriedades de transmissão de luz de materiais como vidro e plástico para otimizar o design de dispositivos ópticos.
Absorbência (Absorbance, A)
Princípio: a relação de absorção e transmissão de luz é logaritmica negativa (A = -log10T), refletindo diretamente a capacidade de absorção de luz da amostra.
Cenário aplicável:
Análise quantitativa: com base na lei de Bill-Lambert (A = εbc), quantificar as concentrações de ácidos nucleicos, proteínas, componentes farmacêuticos e outros na solução, como teste de pureza de DNA (A260 / A280).
Pesquisa de dinâmica de reações químicas: Análise de parâmetros dinâmicos como constantes de taxa de reação e constantes de equilíbrio através do monitoramento em tempo real das mudanças de absorção.
Detecção da qualidade da água: medir a concentração de poluentes como nitratos e nitratos no corpo da água, de acordo com os padrões de proteção ambiental (como GB5749-2022).
Modo de varredura espectral (SpectralScan)
Princípio: varredura contínua da amostra no espectro de absorção da banda UV-visível para obter a posição e intensidade do pico de absorção característica.
Cenário aplicável:
Identificação qualitativa de substâncias: identificação de estruturas de compostos desconhecidos, como intermediários farmacêuticos, análise de corantes orgânicos, comparando bibliotecas de espectros padrão, como o banco de dados NIST.
Avaliação de pureza: deteta picos de absorção de impurezas em amostras para avaliar o grau de pureza de reagentes químicos ou medicamentos.
Estudo da composição do complexo: Análise da estrutura do complexo formado por íons metálicos e ligantes, como picos de absorção característicos (510 nm) do complexo ferro-diantrophil vizinho.
Modo dinâmico (KineticMode)
Princípio: a absorção de monitoramento contínuo sob comprimentos de onda fixos varia ao longo do tempo e a taxa de resposta é calculada.
Cenário aplicável:
Determinação da atividade enzimática: A unidade de atividade enzimática (por exemplo, U/mL) é calculada monitorando as mudanças na absorção do produto ou substância em uma reação de catálise enzimática.
Estudo de reação fotocatalítica: analisar a eficiência do fotocatalisador na degradação de poluentes orgânicos sob a luz e otimizar as condições de reação.
Estudo de liberação de drogas: Simula o ambiente in vivo para monitorar a taxa de liberação de drogas de veículos (por exemplo, nanopartículas, hidrogéis).
Modo de comprimento de onda múltiplo (Multi-Wavelength)
Princípio: medir a absorção em vários comprimentos de onda específicos ao mesmo tempo para melhorar a eficiência da análise.
Cenário aplicável:
Análise de misturas multicomponente: quantificação simultânea através da seleção de comprimentos de onda absorvidos pelas características de cada componente (por exemplo, medição da concentração de hemoglobina pelo método de comprimento de onda duplo).
Estudo de sistemas complexos: análise da sinergia de vários componentes em amostras biológicas, como sangue, urina, por exemplo, testes combinados de indicadores de função hepática (bilirubina total, bilirubina direta).
Resumo
Os padrões de medição do espectrofotômetro visível ultravioleta cobrem uma ampla gama de necessidades, desde medições simples de concentração até estudos dinâmicos complexos. O padrão de transmissão e absorção é adequado para a análise de quantidade comumente prescrita; Modo de varredura espectral para identificação qualitativa; O modelo dinâmico focaliza o processo de reação; O modo de comprimento de onda múltiplo aumenta a eficiência da análise multicomponente. A escolha do padrão adequado com base nos objetivos experimentais pode melhorar significativamente a precisão da análise e a confiabilidade dos dados.