Introdução

A alcalina do ucrino, a alcalina do ucrino, a alcalina do ucrino são altamente tóxicos e podem levar a envenenamento grave e até a morte. A edição de 2020 do "Farmacópio Chinês" ainda tem cerca de 60 variedades de medicamentos chineses e medicamentos chineses que usam a ureterina e a estinina como um controle estritamente controlado de substâncias altamente tóxicas, o Ministério da Segurança Pública exigiu que os controles correspondentes não fossem mais emitidos [1]. Para garantir a ciência, a razoabilidade e a aplicabilidade dos padrões farmacêuticos, é urgentemente necessário substituir o controle de alcalina e estinina por um extrato de controle de alcalina biéster e alcalina total de equine. Em 2016, o Instituto de Pesquisa de Exame de Alimentos e Medicamentos da China iniciou o trabalho de pesquisa relevante [2] [3]; Recentemente, a Comissão Nacional de Farmacópia concluiu revisões adicionais de 57 variedades relacionadas e incluiu-as na edição de 2025 da Farmacópia Chinesa.

Biálcalis de Biéster

Após a preparação (mergulho, cozimento a vapor, queima, etc.) de alcalinos biésteres de uretro (uretro, suburetro, neouretro, etc.), a hidrolização da base acetílica C-8 produz alcalinos monoésteres de uretro (por exemplo, benzotil uretro, benzotil neouretro, benzotil suburetro, etc., baixa toxicidade), enquanto a hidrolização da base benzílica C-14 produz alcalinos de uretroamina (por exemplo, uretro, neouretro, suburetro, etc., microvírus)[4]Como mostrado na Figura 1.

Chuan Wu (fabricação de chuan Wu), herba Wu (fabricação de herba Wu) e adjuntos contêm principalmente alcalina de biséster de uretro, subalcalina de uretro, nova alcalina de uretro, etc., enquanto que o alcalina de biséster de uretro contém principalmente alcalina de uretro, metana de uretro, etc.[5]. O teor de extrato de controle de alcalinismo de uretro-biéster comercializado atualmente é medido por três tipos de alcalinismo novo, subalcalinismo e alcalinismo, e a determinação de alcalinismo de uretro-biéster em algumas variedades farmacêuticas é mais grave por interferência da matriz da amostra. O laboratório Symer Fly desenvolveu um novo método de medição que abrange cinco alcalinos biésteres de uretro e três alcalinos monoésteres de uretro para permitir que as empresas farmacêuticas tenham um controle mais completo sobre a qualidade das preparações relevantes.

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Figura 1 8 formas estruturais

Diagrama das características do anexo cru Solução de aplicação completa da Symer Fly

01

Preparação de soluções de comparação e soluções de ensaio

Oito tipos de soluções de controle de base de uretano são comprados de fornecedores de produtos padrão, e dois lotes de soluções de ensaio de comprimidos são fornecidos pelo cliente.

Preparação da solução de comparação:Tome o controle de benzílido neouretrônico, o controle de benzílido neouretrônico, o controle de benzílido suburetrônico, o controle de neouretrônico, o controle de base de uretrônico, o controle de base de uretrônico, o controle de base de uretrônico, a solução de controle de base de uretrônico grosseira (eumetina) em quantidades moderadas, com precisão, adicione acetonitril para fazer uma solução de mistura de 10 μg por 1 ml.

Preparação da solução de ensaio:Tome este pó de aproximadamente 1,0 g, com precisão, coloque-o em um tubo de vidro de 25 mL, adicione com precisão 10 mL de isopropanol-acetato de éster etílico (1:1) mistura (contendo amônia 0,6 mL), condense, banho de gelo para extração por ultra-som 30 min, a temperatura ambiente para sedimentação. Remover 5 mL de líquido líquido para um tubo de centrifugação de 15 mL, 8.000 rpm 20 ℃ centrifugação por 5 min, tomar com precisão 4,00 mL para um tubo de nitrogênio limpo banho de água de 30 ℃ nitrogênio para quase secar, adicionar com precisão 2,00 mL de solução de nitrílio acetato (vortex / ultra-som / vortex), 5.000 rpm 20 ℃ centrifugação por 3 min, solução de nitrogênio sobre 0,2 μm filtro hidrófilo PTFE (P / N: 42213-NPL), o filtro está à espera do teste de bordo.

Método de determinação:A solução de controle e a solução de ensaio são aspirados com precisão de 5 μL, injetados em um cromatográfico líquido, medidos e obtidos.

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02

Configuração do instrumento e condições cromatográficas

Thermo Scientific ™ Vanquish Core ™ Sistema de cromatografia líquida de alta eficiência, configuração: bomba Quaternary Pump C (VC-P20-A), amostrador automático Split Sampler CT (VC-A12-A), caixa de temperatura de coluna Column Compartment C (VC-C10-A), detector Diode Array Detector CG (VC-D11-A), processamento de dados Chromeleon ™ 7.3

色谱柱： Acclaim WCX-1 de modo misto, 3 μm, 3,0×150 mm (P/N: 070092)

Fase de fluxo: A: Água ultrapura B: 100 mM (NH)4(H)2PO4(Ácido fosfórico regula o pH até 3,0) C: Acenitrilo

Velocidade: 0,5 ml/min

Procedimento de limpeza de gradientes: veja Soluções de aplicação de anexos para mais detalhes

Volume de amostra: 5 µL

Temperatura da coluna: 40 ℃

Detector: DAD, comprimento de onda de captação: 230 / 260 nm; frequência de captação: 5 Hz; captação espectral: 190-400 nm

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03

Espectrogramas e dados

3.1

Espectrograma de solução de comparação

Figura 2 Espectrograma de separação e dados de 8 soluções de controle misturadas de alcalina de uretano (10,0 μg/mL) (clique para ver imagem maior)

Figura 3 Espectrograma de localização de 8 soluções de mono-controle de alcalina de uretano (10,0 μg/mL) (clique para ampliar)

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A separação eficaz pode ser alcançada em 8 tipos de alcalina de uretro na solução de ensaio, dos quais 5 tipos de alcalina de uretro biéster têm uma boa forma de pico, excelente efeito de coluna, precisão e quantificação; A separação da linha de base do benzil-uretano e do benzil-suburetano em 3 tipos de alcalinos monoésteres de uretano não foi possível para análise qualitativa preliminar.

3.2

Espectrograma de solução para ensaios

Figura 4 Espectrograma e dados de separação de soluções de ensaio (S1)

(Clique para ver a imagem)

Figura 5 Espectrograma e dados de separação de soluções de ensaio (S2)

(Clique para ver a imagem)

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Ambos os lotes de episódios secundários foram detectados, episódios, episódios e episódios novos, os picos alvo podem alcançar a separação de linha de base e a quantificação precisa, enquanto episódios e episódios não foram detectados.

3.3

Gráfico de Características

Figura 6 Espectrograma de picos vizinhos de uma nova base de uretano em uma solução de ensaio

(Clique para ver a imagem)

A 230 nm, a solução de ensaio de aditivo cru pode separar dois picos desconhecidos antes e depois do novo pico alvo de alcalina de uretra, identificado por espectrograma, suspeito de outros tipos de alcalina de uretra biéster, posteriormente pode realizar estudos correspondentes.

Figura 7 Espectrograma de superposição de 6 soluções de controle de alcalina de uretano e adesivos crus para soluções de amostra (clique para ampliar)

No espectro de sobreposição de amostragem contínua de soluções de amostragem, o tempo de retenção e a área de pico de cada pico alvo são estáveis, o RSD é inferior a 1%, a reprodutividade e a estabilidade do método são excelentes, e podem ser usados ​​para a criação de mapas de características de álcalis biésteres de cabeça ultravioleta no espectro bruto.

04

Resultados e discussões

1)Utilizando a coluna de cromatografia de modo misturado WCX-1 da Acclaim (fase inversa + troca de catiões fracos) e a fase de fluxo sem íons para reagentes ou tetrahidrofuranos, com o sistema de cromatografia de fase líquida de alta eficiência Vanquish Core, foi possível separar eficazmente oito alcalinos de uretro, dos quais cinco alcalinos de uretro biéster têm picos bem formados, excelentes efeitos de coluna, precisão e quantificação, e três alcalinos de uretro monoéster podem ser usados ​​para análises qualitativas preliminares.

2)Para otimizar as condições cromatográficas para a separação de cinco alcalins biésteres de uretro na solução de ensaio, dois picos desconhecidos foram separados antes e depois do novo pico de uretro e identificados por espectrograma como outros alcalins biésteres de uretro suspeitos, enquanto o uretro e a metana de uretro não foram detectados.

3)Este método é aplicável tanto para a monitorização do grau de hidrolítise do alcalino do uretano durante o processo de elaboração de apêndice bruto, como para a rastreação de origem de substâncias medicinais de apêndice e apêndice.

5. Referências

[1] Li Hao, Shenming Wise, Zhang Peng, etc. Introdução de uma revisão importante da edição de 2025 do Código de Farmacêutica Chinês [J].Padrões de Farmacêutica Chinesa, 2025,26(01):17-22.DOI:10.19778/j.chp.2025.01.003.

[2] Xu Jun, Wang Ruizhong, Zhang Mei, etc. Preparação do extrato de base de controle de uretina biéster e estudos de sua aplicação [J].China Pharmaceutical Standard, 2016,17(04):252-257.DOI:10.19778/j.chp.2016.04.003.

[3] Wang Feifei, Wu Shuhai, Zhang Mei, etc. Estudo do extrato de controle de equine e sua aplicação no controle de qualidade de medicamentos e preparações compostas de equine [J].Journal of Drug Analysis, 2018,38(07):1226-1230.DOI:10.16155/j.0254-1793.2018.07.18.

[4] Hu Jiahao, Li Wenzhu, Shi Qinghin, etc. Progresso da Pesquisa sobre Composição Química Adhesiva e Processo de Fabricação [J].China Medicine Journal, 2025,50(06): 1458-1470.DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20241214.201.

[5] Xu Yi, Qin 波, Cao 红云, etc. O método HPLC determina simultaneamente o teor de alcalina e metálina [J].Yunnan Journal of Chinese Medicine, 2017,38(09):70-72.DOI: 10.16254/j.cnki.53-1120/r.2017.09.033.

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