Kit Soleball CCK-8 para proliferação celular e teste de toxicidade

SolarbioSoleibo do CA1210 CCK-8Kit de Reação(Kit de teste de proliferação celular e toxicidade)

Kit Soleball CCK-8 para proliferação celular e teste de toxicidade

Número do produto:do CA1210

Nome do produto:CCK-8Kit de Reação(Kit de teste de proliferação celular e toxicidade)

Especificações do produto:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

Descrição do produto:

CCK-8Kit de Reação(Kit de teste de proliferação celular e toxicidade)

Os parâmetros de um produto específico dependem dos parâmetros da descrição do produto recebida

Especificações:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T

Condições de armazenamento:4℃ selado para evitar a luz

Contagem de células Kit-8Nome abreviadoCCK-8Kit de teste, paraMTTUma alternativa à lei é baseada emWST(sal tetrazol solúvel em água, nome químico:2-(2-Metoxil-4-Nitrofenilo)-3-(4-Nitrofenilo)-5-(2,4-Disulfobenzo)-2H-Tetrazol monosódio sal) é amplamente utilizado em kits de teste de alta sensibilidade rápida para proliferação celular e citotoxicidade. Pode ser usado para triagem de medicamentos, teste de proliferação celular, teste de citotoxicidade, sensibilidade ao tumor e outros ensaios.

Instruções de uso:
Criação de curvas padrão (ao medir o número específico de células)
1Primeiro, use a placa de contagem de células para contar o número de células na suspensão celular preparada e, em seguida, vacine as células.
2Proporcionalmente diluído em um gradiente de concentração celular com meio de cultura, geralmente3-5Gradiente de concentração de células por grupo3-6Um buraco de volta.
3Depois da vacinação, cultive a parede celular e acrescenteCCK-8Determinação após cultivo de reagenteODvalor, para criar uma coordenada horizontal com o número de células (Xeixo),ODValor de coordenadas (Ycurva padrão do eixo. Esta curva padrão permite determinar o número de células em amostras desconhecidas (esta curva padrão é testada desde que as condições do experimento sejam consistentes, facilitando a determinação do número de células vacinadas e a adição).CCK-8tempo de formação posterior. ）

Teste de atividade celular

1Em 96 Suspensão celular em placa perfurada (100µL/buracos). Coloque a placa de cultivo em uma caixa de cultivo (em37℃, 5% de CO2sob as condições).

2Adicionar a cada buraco10µL do CCK-8Solução (cuidado para não gerar bolhas nos buracos, eles podem afetarODvalores de leitura).

3Incubar a placa na caixa de cultivo1-4Horas.

4Determinado com enzimáticos450 nmAbsorção local.

5Se temporariamente não for determinadoODValores que podem ser adicionados a cada buraco, se pretender medir mais tarde10µL 0.1MdeHClou1% SDS (W / V)Solução e cobrir a placa de cultivo para evitar a luz em temperatura ambiente. Em 24 A absorção não muda durante uma hora.

Valor agregado das células-Teste de toxicidade

1Em 96 Configuração na placa de orifício100 µLSuspensão celular. Pré-cultivo da placa na caixa de cultivo 24 horas (em37 ℃，5% de CO2sob as condições).

2Junte-se ao painel de cultivo10µLsubstâncias em diferentes concentrações. Incubar durante um período apropriado (por exemplo:6、12、24 ou 48 horas).

3Adicionar a cada buraco10 µL de CCK-8Solução (cuidado para não gerar bolhas nos buracos, eles podem afetarODvalores de leitura). Se a substância a ser testada for oxidativa ou redutiva, pode ser adicionadaCCK-8Antes de substituir o meio fresco (remover o meio e lavar as células duas vezes com o meio e, em seguida, adicionar um novo meio), remover o efeito da droga.

4Incubar a placa na caixa de cultivo1-4Horas.

5Determinado com enzimáticos450 nmAbsorção local.

6Se temporariamente não for determinadoODValores que podem ser adicionados a cada buraco, se pretender medir mais tarde10µL 0.1MdeHClou1% SDS (W / V)Solução e cobrir a placa de cultivo para evitar a luz em temperatura ambiente. Em 24 A absorção não muda durante uma hora.

Cálculo da Vitalidade:.

Vitalidade celular (%)=[A(Adição)－A(Espaço)]／[ A(0Adição)－A(Espaço)]×100

A(administração): com células,CCK-8Absorção de buracos de soluções e soluções farmacêuticas

A(em branco): com meio de cultura eCCK-8Absorção de soluções sem buracos celulares

A（0 administração): com células,CCK-8Absorção dos buracos da solução sem solução farmacêutica

Vitalidade celular: proliferação celular ou vitalidade citotóxica

Atenção:

①Recomenda-se primeiro fazer alguns buracos para explorar o número de células vacinadas e juntarCCK-8tempo de cultivo após o reagente.

②Os glóbulos brancos podem precisar de cultivo por mais tempo.

③Quando o padrão é usado 96 No caso da placa perfurada, a quantidade mínima de vacinação das células de parede é pelo menos1 ,000um/Buraco(100 µLMeio de Cultura)A sensibilidade é relativamente baixa na detecção de glóbulos brancos, portanto, a quantidade de vacinação recomendada não é inferior a2,500um/Buraco( 100 µLMeio de Cultura)Se você quiser usar 24 placa de buraco ou 6 Experimento de placa de poço, primeiro calcule a quantidade de vacinação correspondente por poço e de acordo com o volume total de meio por poço10%InscreverCCK-8Solução.

④Se não.450 nmO filtro pode ser usado na absorção430-490 nmfiltros, mas450 nmA maior sensibilidade de detecção.

⑤A absorção do fenol vermelho no meio de cultura pode ser eliminada ao calcular, deduzindo a absorção do fundo no buraco em branco, portanto, não afeta a detecção.

Kit Soleball CCK-8 para proliferação celular e teste de toxicidade

Informações de encomenda do produto:

do CA1210 CCK-8Kit de Reação(Kit de teste de proliferação celular e toxicidade) 100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T