Aladdin RIPA (forte) - em stock

Aladdin R301899-100ml RIPALiquido fissado (forte)

Aladdin RIPA (forte) - em stock

Número do produto:R301899-100ml

Nome do produto:RIPALiquido fissado (forte)

Especificações do produto:100ml

Descrição do produto:

Especificações ou pureza: sem inibidores

Nome em inglês:Solução tamponada de lisa RIPA (forte)

Temperatura de armazenamento:2-8°CArmazenar

Condições de transporte: saco de gelo

RIPAO lito é um lito rápido de tecidos e células tradicionais, usado principalmente para extrair proteínas solúveis de tecidos animais e células de mamíferos, que podem ser usados ​​para romper células de parede e células em suspensão. De acordo com a força de seu lito pode ser dividido em três categorias fortes, médios e fracos, de acordo com as necessidades experimentais, o produto correspondente pode ser escolhido.RIPALiquido fissado(Forte)Pode ser efetivamente extraído núcleo celular, membrana celular e proteína do plasma, a proteína extraída pode ser aplicada à quantificação de proteínas,Blot Ocidental、IPanálise de teste.

Os parâmetros de um produto específico dependem dos parâmetros da descrição do produto recebida

Aladdin RIPA (forte) - em stock

Uso

(um)Cultura de células de parede

1.Tome este produto e coloque-o em solução a temperatura ambiente e misture com inibidores enzimáticos adicionados de acordo com os requisitos experimentais.

2.Remover o líquido de cultura das células, comPBS、NSOu limpeza sem cultivo sérico1Em segundo lugar, centrifugar a baixa velocidade, descartar a limpeza e deixar o precipitado.

3.Seguindo 6 Placa de furos adicionado a cada furo150～250 μlA proporção de lição que contém inibidores enzimáticos é adicionada a este produto. O pipete sopra suavemente para que o lito e as células entrem em contato completo. colocado no gelo ou4℃fissão, geralmente o líquido fissado atua sobre as células 1～3sDentro, as células são divididas. geralmente 6 Placa de buraco para cada célula de buraco adicionado150 μlO lito é suficiente, mas se a densidade celular é muito alta pode aumentar adequadamente a dose de lito para 200～250 μl。

4.10000～12000g，4℃Centrífuga 5～10min(Se não houver centrifugadora de baixa temperatura, a temperatura ambiente também pode ser)Tire-o limpo.

5.subsequentePágina SDS、OcidentalOperações como imunodesiditação e imunodesiditação.

(dois)Células de cultura em suspensão

1.Depois de dissolver a temperatura ambiente, adicione o inibidor enzimático.

2.Células em suspensão centrífuga de baixa velocidade, descartar a limpeza e coletar o precipitado.

3.Leve as células com os dedos para torná-las soltas. Seguindo 6 Placa de buraco para cada célula de buraco adicionado150～250 μlA proporção de lição que contém inibidores enzimáticos é adicionada a este produto. geralmente 6 Placa de buraco para cada célula de buraco adicionado150 μlO lito é suficiente, mas se a densidade celular é muito alta pode aumentar adequadamente a dose de lito para 200～250 μl. Depois, use o dedo para separar completamente as células, não deve haver precipitação celular ou celular óbvia após a separação completa.

4.10000～12000g，4℃Centrífuga5～10min(Se não houver centrifugadora de baixa temperatura, a temperatura ambiente também pode ser)Tire-o limpo.

5.SeguimentoPágina SDS、OcidentalOperações como imunodesiditação e imunodesiditação.

(três)amostra de organização

1.Depois de retirar este produto e misturar em solução a temperatura ambiente, adicione o inibidor enzimático.

2.Ponha o grupoZhiCorte em pedaços pequenos, quanto menor melhor.

3.Congelar em um frigorífico de nitrogênio líquido ou ultra-frio30 minutosOs tecidos acima, moendo rapidamente com nitrogênio líquido, o processo de moagem é controlado tanto quanto possível1～2 minutospara reduzir a degradação das proteínas.

4.De acordo com cada20 mgAssociação 150～250 μlProporção do lito, adicionar o lito que contém inibidores enzimáticos. no gelo ou4℃fissura 15～30 minutos。

5.etapa 3、4 Pode-se aplicar o seguinte procedimento: de acordo com cada20 mgAssociação 150～250 μlA proporção do lito é adicionada a este produto que contém inibidores enzimáticos. Absorba com um amortiguador de vidro ou um moador de tecidos até que o processo seja completamente fissado, e o processo seja tão controlado quanto possível. 1～2 minutospara reduzir a degradação das proteínas.

6.10000～12000g，4℃Centrífuga 5～10min(Se não houver centrifugadora de baixa temperatura, a temperatura ambiente também pode ser)Tire-o limpo.

7.SeguimentoPágina、OcidentalOperações como imunodesiditação e imunodesiditação.

Precauções

1.Após a remoção do líquido de cultura das células adesivas, se a proteína no soro não for interferida, pode não ser lavada.

2.Se a fissagem é insuficiente, a quantidade de fissado pode ser aumentada adequadamente, e se amostras de proteína de alta concentração forem necessárias, a quantidade de fissado pode ser reduzida adequadamente.

3.Se as células forem maiores, devem ser divididas em 50～100 Milhões de células./centrifugar e depois desintegrar. Grandes grupos de células são mais difíceis de se desintegrar adequadamente, enquanto pequenas quantidades de células são relativamente fáceis de se desintegrar adequadamente devido ao fácil contato com as células.

4.Se a amostra de tecido em si é muito pequena, pode ser adicionada diretamente à fissura do lito após o corte adequado, através de fortementeVorte×Deixe a amostra se desintegrar adequadamente. Em seguida, a mesma centrifugação é removida para experimentos posteriores. A vantagem da fissura direta é mais conveniente, não é necessário usar um amortiguador, a desvantagem é que a fissura não é tão completa quanto o uso de um amortiguador.

5.Em situações de baixa temperatura pode ocorrer um fenômeno turbulento,37℃Banho de água estimula a dissolução, não afeta o efeito de uso; O tempo de dissolução não é muito longo para evitar a falha dos ingredientes eficazes.

6.Muitas vezes, um pequeno grupo de cola transparente aparece no produto de fissura, um fenômeno normal. O gel transparente contém o genoma.DNAetc. complexos. No teste e genomaDNANo caso de ligação a proteínas particularmente estreitas, o limpo pode ser retirado por centrifugação direta para experimentos posteriores; Se for necessário detectar e ligar proteínas particularmente fortes ao genoma, o gel transparente pode ser quebrado e disperso por ultra-som e, em seguida, retirado por centrifugação para experimentos posteriores.

7.As etapas operacionais da fissão celular devem ser colocadas no gelo ou4℃Continue.

Âmbito de utilização

Aplicável à pesquisa médica e biológica geral

Informações de encomenda do produto:

R301899-100ml RIPALiquido fissado (forte) 100ml