Kit de ELISA do Fator Complemento Humano I (CFI)

Kit de ELISA do Fator Complemento Humano I (CFI)Precauções

1. Criação térmica de acordo com o tempo e a temperatura especificados para garantir resultados precisos. Todos os reagentes devem atingir a temperatura ambiente de 20-25 ° C antes de serem usados. Mantenha o reagente refrigerado imediatamente após a utilização.

Lavar a placa incorretamente pode levar a resultados imprecisos. Assegure-se de absorver o máximo líquido dentro do orifício antes de adicionar o substrato. Não deixe os microporos secar durante o processo de aquecimento.

Eliminar líquidos e impressões digitais residuais no fundo da placa, caso contrário, afetar o valor de OD.

O líquido de coloração de substância deve ter uma cor incolor ou muito clara, o líquido de substância que se tornou azul não pode ser usado.

Evite a contaminação cruzada de reagentes e amostras para evitar resultados errados.

Evite a exposição direta à luz intensa durante o armazenamento e a criação térmica.

7. Equilibrar até a temperatura ambiente e abrir o saco de vedação para que as gotas de água não se condensem na barra de placa fria.

Nenhum reagente de reação pode entrar em contato com o solvente de branqueamento ou os gases fortes emitidos pelo solvente de branqueamento. Qualquer componente de branqueamento pode interromper a atividade biológica do reagente de reação no kit.

Não é possível usar produtos expirados.

Se a transmissão da doença for possível, todas as amostras devem ser bem administradas e as amostras e os dispositivos de teste devem ser tratados de acordo com os procedimentos prescritos.

Preparação do Reagente

O kit deve ser retirado do ambiente refrigerado antes de ser usado após o equilíbrio de temperatura ambiente.

20 x diluição do tampão de lavagem: a água destilada é diluída em 1: 20, ou seja, 1 porção de tampão de lavagem 20 x mais 19 porções de água destilada.

Kit de ELISA do Fator Complemento Humano I (CFI)Passos de operação

1. Remova a placa necessária do saco de folha de alumínio após o equilíbrio de temperatura ambiente de 20min, e a placa restante é colocada de volta a 4 ° C selada com um saco auto-fechado.

2. Defina o orificio padrão e o orificio da amostra, cada orificio padrão adiciona uma concentração diferente de 50μL do produto padrão;

3. Adicionar 50 μL de amostra a ser testada no orifício da amostra; Nenhum buraco em branco.

4. Além do buraco em branco, cada buraco do tipo padrão e do buraco da amostra adiciona anticorpos de detecção marcados com a peroxidase de raiz (HRP) de 100 μL, sela o buraco de reação com uma membrana de vedação, uma panela de banho de água a 37 ° C ou um termostato para 60 minutos.

5. Eliminar o líquido, secar no papel de absorção de água, encher cada buraco com líquido de lavagem (350 μL), deixar 1 min, descartar o líquido de lavagem, secar no papel de absorção de água, assim repetir a placa 5 vezes (também pode ser lavada com uma máquina de lavar placas).

Adicione 50 μL de substância A e B a cada poço e incube a luz a 37 ° C por 15 min.

Adicione 50 μL de líquido terminal a cada orifício, dentro de 15 min, para medir o valor de OD de cada orifício no comprimento de onda de 450 nm.

Cálculo de resultados experimentais

de acordo com os padrões medidosO valor de OD é uma coordenada horizontal, o valor de concentração do produto padrão é uma coordenada longitudinal, desenhe a curva padrão no papel de coordenadas ou com o software relevante e obtenha a equação de regressão linear, substitua o valor de OD da amostra pela equação para calcular a concentração da amostra.