Kit de ELISA de Trimetilamina Oxidada Humana (TMAO)

Kit de ELISA de Trimetilamina Oxidada Humana (TMAO) Precauções

1.Criação térmica de acordo com o horário e a temperatura especificados para garantir resultados precisos. Todos os reagentes devem estar a temperatura ambiente antes de serem usados.20-25℃. Mantenha o reagente refrigerado imediatamente após a utilização.

2.Lavar a placa incorretamente pode levar a resultados imprecisos. Assegure-se de absorver o máximo líquido dentro do orifício antes de adicionar o substrato. Não deixe os microporos secar durante o processo de aquecimento.

3.Elimina os resíduos de líquidos e impressões digitais no fundo da placa, caso contrárioODValor.

4.O líquido de coloração de substância deve ser incolor ou de cor muito clara, o líquido de substância que se tornou azul não pode ser usado.

5.Evite a contaminação cruzada de reagentes e amostras para evitar resultados errados.

6.Evite a exposição direta à luz intensa durante o armazenamento e a criação térmica.

7.Depois de equilibrar até a temperatura ambiente, abra o saco de vedação para que as gotas impermeáveis ​​se condensem na placa fria.

8.Nenhum reagente de reação pode entrar em contato com o solvente de branqueamento ou os gases fortes emitidos pelo solvente de branqueamento. Qualquer componente de branqueamento pode interromper a atividade biológica do reagente de reação no kit.

9.Não é possível usar produtos expirados.

10.Se a transmissão da doença for possível, todas as amostras devem ser bem administradas e as amostras e os dispositivos de teste devem ser tratados de acordo com os procedimentos prescritos.

Preparação do Reagente

O kit deve ser retirado do ambiente refrigerado antes de ser usado após o equilíbrio de temperatura ambiente.

20x diluição do tampão de lavagem: pressão de água destilada1：20diluição, ou seja,1Parte20× tampão de lavagem mais19água destilada.

Kit de ELISA de Trimetilamina Oxidada Humana (TMAO) Passos de operação

1. Equilíbrio de temperatura ambiente20 minutosA placa necessária é retirada do saco de folha de alumínio posterior e a placa restante é colocada de volta selada com um saco autofechado.4℃。

2. Defina orifícios padrão e orifícios de amostra, cada orifício padrão com diferentes concentrações de produtos padrão50μL；

3. Adicionar amostras a serem testadas ao buraco da amostra50μLNão há buracos em branco.

4. Além dos buracos em branco, a peroxidase de raiz moringa é adicionada a cada um dos buracos padrão e dos buracos da amostra (HRPDetecção de anticorpos marcados100μLpara selar o furo de reação com uma membrana de vedação,37℃ caldeira de banho de água ou termostato60 minutos。

5. Eliminar o líquido, absorver água e secar no papel, enchendo cada buraco com líquido de lavagem (350μL(Estacionamento)1 minutoTire o líquido de lavagem, absorva água no papel para secar, então repita a lavagem5Segundo (também disponível para lavar placas com uma máquina de lavar placas).

6. Adiciona substância a cada buracoA、Bcada50μL，37℃ Incubação à luz15 minutos。

7. Adicionar líquido terminante a cada buraco50μL，15 minutosDentro, dentro450 nmDeterminação de cada furo no comprimento de ondaODValor.

Cálculo de resultados experimentais

de acordo com os padrões medidosODO valor é a coordenada horizontal, o valor de concentração do produto padrão é a coordenada longitudinal, desenhe a curva padrão no papel de coordenadas ou com o software relevante e obtenha a equação de regressão linear, colocando a amostra deODO valor é substituído pela equação para calcular a concentração da amostra.