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Endereço
Edifício 26, 1299 East Road, Rainhua District, Changsha, Hunan
Hunan Zhongcheng Weikang biotecnologia Co., Ltd.
Edifício 26, 1299 East Road, Rainhua District, Changsha, Hunan
Esta caixa é aplicadaELISAProdutos de teste de resíduos de drogas desenvolvidos pela tecnologia,Detecção rápida e econômica de músculos em comparação com a análise instrumentalorganização、Amostras de ração, urina, etc.deConteúdo de lacdopamina。
Taxa de resposta cruzada
Taxa de reação cruzada com análogos:
Lecdopamina…………………………………100%
Sardinanol……………………………………﹤1%
Cloridrato de Toban………………………………﹤1%
Clenbuterol ………………………………﹤1%
Composição do kit
Placa enzimática1blocos,96Buraco/placa
Líquido padrão5garrafa)1em ml/garrafas):
0 ppb、0. 1em ppb、0.3em ppb、0.9em ppb、2.7em ppb
Marcadores enzimáticos ………………………………………7mL
Liquido de trabalho de anticorpos ………………………………………10 metrosL
líquido de substânciaA ………………………………………7mL
líquido de substânciaB………………………………………7mL
Liquido de terminação……………………. .…………………7mL
10×Liquido de lavagem concentrado………………………………40em mL
2×ConcentraçãoSolução múltipla………………………………50mL
Instruções……………………. .………………1Parte
Cinco.Equipamento e reagentes necessários à unidade
(1)Instrumentos
Calificador de microporosas(450 nm)Dispositivos de secagem por sopro de nitrogênio;Oscillador;Centrífugaso turbilhão; Balança Eletrônica (Sensor)0.01 g)。
(2)Equipamento
Capacidade da garrafa:100 mL,500 ml,1000 mL
Caminho únicoTrace Pipeta:20 μL~200 μL,100 μL~1000 μL
MulticanalTrace Pipeta:30 μL~300 μL
(3(Reagentes)
Metanol, acetonitril, hexano, *, ácido clorhídrico concentrado, água desionizada
Preparação da solução
Preparação pré-processamento da amostra:
Distribuição1:1M NaOHSolução
Denominação4.0 g NaOHmaisVai à água iônica.dissolvido,Acomodação para100 mL。
Distribuição2:0.1M HCl
Medição0.83 mLÁcido clorhídrico concentrado adicionado à água deionizadaAcomodação para100 mL。
Distribuição3:25%metanol
Medição25 mlMetanol, adicionado a75 mlVá para a água iónica e misture completamente.
Distribuição4:25%metanol-0,1 MHCLSolução
Medição20mL 0,1MÁcido clorhídricoSoluçãoAdicionar80mL 25%metanolEm solução e misturar completamente.
Distribuição5:Solução de amostra
2×ConcentraçãoSolução múltiplaAntes de usar, pressione1:1diluição (1ParteConcentraçãoSolução de amostra+ 1água deionizada)。
Distribuição6:Liquido de Lavagem
10×O líquido de lavagem concentrado deve ser pressionado antes de ser usado.1:9diluição (1Concentraçãolavagemlíquido + 9Água deionizada (configurada conforme necessário)。
Método de pré-tratamento da amostra
Antes do processamento da amostra:
(1A cabeça de aspiração deve ser usada de uma só vez durante o experimento e a cabeça de aspiração deve ser substituída durante a aspiração de reagentes diferentes.
(2Antes do experimento, deve verificar se os vários equipamentos de teste são limpos e os equipamentos de teste limpos devem ser usados para evitar que a poluição interfera com os resultados do experimento.
amostraAnteriorPassos de processamento:
(A)Grupo Tratamento de tecido (galinha, pato, músculo suíno)/Fígado, ovos, peixe, camarão, etc.)
Tratamento 1:
1precisão.Denominação2.0±0.02 ghomogêneaamostra em50 mLno tubo centrífugo;
2Inscreva-se0,5 milímetrosSolução de amostra diluída (dispensação)5oscilação completa).2 minutosJunte-se.8 ml AcenitriloCompletamente.Oscilação de vortex3~5 minutosTemperatura ambiente.4000 r/minCentrífuga10 minutos;
3、 取2,5 mLlíquido superior paraEm outro tubo centrífugo.,50~60℃ nitrogênio secado;
4Inscreva-se1 em mL Resíduos dissolvidos em hexano, adicionados novamente1mlSolução de amostra (dispensação)5totalmente misturado).30 sTemperatura ambiente.4000 r/minCentrífuga10 minutos;
5Remover o hexano superior e20 μLLiquido inferior para análise。
Tratamento 2:
1precisão.Denominação2.0±0.02 ghomogêneaamostra em50 mLno tubo centrífugo;
2Inscreva-se6 ml25%metanol-0,1 MHCLsolução,OscilaçãoMistura3 ~ 5 minutos,Temperatura ambiente4000 r/minacimaCentrífuga10 minutos(Nota: se a amostra de tecido tiver um alto teor de gordura, pode ser colocada após a oscilação)85Banho de água após 10min);
3、取1 milhalíquido superior paraOutro.2mLTubo Centrífugo,Inscrever20μL 1M* Solução e mistura completa (medição após a mistura)O pHValor, aproximadamente7-8);
4、4000 r/minCentrífuga3~5 minutosremover o líquido;20 μLPara análise。
(B)Urina, soro.
取20 μLDeterminação direta de amostra de urina clara ou soro (por exemplo, amostra de urina ou soro turbo)
É necessário filtrar ou4000 r/minem15℃Centrífuga10 minutosAté a limpeza.
BrilhanteAs amostras não utilizadas devem ser congeladas.
Passos de teste imunológico enzimático
Antes da medição:
1、 Levante todos os reagentes e placas microporosas necessárias para temperatura ambiente antes de usar.
2、 Retornar todos os reagentes imediatamente após a utilização2~8 ℃。
3、 Não deixe os microporos secar durante o uso.
4、 EmELISAA repetitividade na análise depende em grande parte da consistência da placa de lavagem, a operação correta da placa de lavagem éELISADeterminação dos pontos do processo.
5、 Durante todo o processo de incubação, evite a exposição à luz.tampaA placa cobre a placa microporosa.
Etapas de medição:
1、Reagentes necessáriose placas microporosasExtraído do ambiente refrigerado e equilibrado a temperatura ambiente30 minTodos os líquidos devem ser agitados antes de serem usados. Atenção ao líquido padrão2um experimento paralelo.
2、Adicionando produtos padrão/Amostras:maisentrarProdutos padrão/amostras20 μL/Buraco,InscreverenzimasMarcadores50 μL/O buraco. Junte-se.Liquido de trabalho de anticorpos80 μL/Buraco,Oscilação suave,usarTampaTampa bem,Temperatura ambiente25℃Reação à luz30 minutos。
3、Lavagem:Descubra cuidadosamente a capa e seque o líquido dentro do buraco.Adicionar líquido de lavagem 250 μL/buracos, cada vez.Mergulhar15~30 slavagem completa.4~5Segundo, tirar com papel de absorção de água.Faça.
4、Visualização de cores:Junte-se primeiro a cada buraco.líquido de substânciaA 50 μLJunte-se cada um.líquido de substânciaB 50 μLCom calma.Oscilaçãomisturado e emTemperatura ambiente25℃abaixoResposta à luz10~15 minutos。
5、Determinação:Cada buraco50 μLliquido terminado,Oscilação suaveEm enzimas de450 nmDeterminação localODValor (recomendado)450/630 nmDetecção de comprimento de onda duplo, em5 minleitura dos dados).
Nove,Análise de resultados
A média da absorção do líquido padrão ou da amostra medida (B(Dividido pela
um líquido padrão (0Absorção do líquido padrão)B0O valor é multiplicado por100%,
Obter o valor de absorção percentual.
Percentagem de absorção (%)=![]()
em concentração padrão.10O logaritmo do fundo éXEixo, valor percentual de absorção éYEixo, desenhe curvas padrão. Substituir o valor de absorção percentual da amostra para a curva padrão e ler o valor correspondente à amostra da curva padrão como10a potência, multiplicada pelo múltiplo de diluição, ou seja, o conteúdo da amostraLecdopaminaQuantidade.
Os cálculos são feitos com software de análise especializado de kits para facilitar a análise precisa e rápida de grandes quantidades de amostras.
Dez,Múltiplo de diluição da amostra
Organizações Animais:2multiplicação (método 1),4Multiplicação (Método 2)
Amostras de urina e soro:1vezes
DezumSensibilidade, precisão e precisão
Sensibilidade da caixa:0. 1em ppb
Limite de teste de amostra:
amostra de tecido (método 1)…………………0.2em ppb
amostra de tecido (método 2)…………………0.4 em ppb
Amostras de urina e soro………………………0.1em ppb
Taxa de recuperação:
organizaçãoamostras …………………………75±20%
Amostras de urina e soro………………………95±20%
PrecisãoO fator de variação da caixa é menor do que10%
DezdoisAtenção
1Temperatura ambiente inferior a20 ℃Ou o reagente e a amostra não voltaram à temperatura ambiente.(20~25 ℃)Isso levará a todos os padrões.ODValor baixo.
2No processo de lavagem da placa, se houver uma situação de secagem do furo da placa, haverá uma curva padrão não linear, fenômeno de má repetitividade,Portanto, a próxima operação deve ser realizada imediatamente após a lavagem.
3Não use caixas com data de validade; Também não use nenhum reagente no kit expirado, dopagem com o kit expirado pode causar uma redução da sensibilidade; Não alterne o uso de reagentes em caixas de lotes diferentes.
4Mantenha a caixa em2~8 ℃Não congele, coloque a placa microporosa desnecessária em um saco autofechado para selar novamente.;Substâncias padrão e colorantes incolores são sensíveis à luz, por isso é importante evitar a exposição direta à luz.
5Reagentes de corQualquer cor indica deterioração do colorante de cabelo, deve ser descartadoÉ.
6、Participandolíquido de substânciaDepois, geralmente a cor15 minÉ possível. Se a cor for mais clara, o tempo de reação pode ser prolongado.20 min(ou mais), mas não mais do que30 min;Ao contrário, o tempo de reação é reduzido.
DeztrêsCondições de armazenamento e período de conservação
Condições de armazenamento: no2~8 ℃Salvar o kit。
Período de conservação: Esta caixa é válida para12Um mês.