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Beijing Beijiameiyi Biotechnology Co., Ltd
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Sequenciador de segunda geração illumina

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Visão geral

O sistema MiSeq do sequenciador de segunda geração illumina facilita sua pesquisa através de várias aplicações de sequenciamento. Ele é capaz de gerar automaticamente leituras de duas extremidades, com saída de até 15 Gb por execução e fornece mais de 600 bases de dados de sequência por leitura. Seus kits de preparação de biblioteca foram otimizados para uma variedade de aplicações, incluindo sequenciamento genético direcionado, sequenciamento genômico pequeno, sequenciamento amplificador, macrogenomica 16S e muito mais.

Detalhes do produto

LuzEmpresa lançadoO MiSeq é um novo sequenciador que integra amplificação, sequência e análise de dados em um único instrumento e pode gerar mais de 1Gb de dados por execução em apenas 2 pés quadrados. O processo e a precisão do MiSeq tornam-no a plataforma ideal para análises genéticas rápidas e econômicas para uma ampla gama de aplicações. Enquanto o Illumina foi adquirido em massa pela FDA e está prestes a ser certificado pela FDA, em outubro de 2012, o fluxo de sequência do sistema MiSeq foi atualizado para cerca de 8G. A atualização é feita em dois aspectos, um é o aumento da densidade do cluster, a densidade do cluster aumentará para 15-17 milhões após a atualização, e o número de leituras do par-end aumentará para 30-34 milhões; Por outro lado, o fluxo foi aumentado pelo comprimento da leitura de sequência, o comprimento da leitura de sequência atingiu 2 * 300bp, ao mesmo tempo que a velocidade de sequência também foi melhorada. Atualmente, o Instituto Broad já usou os reagentes existentes para alcançar o sequenciamento de uma extremidade de 300 bp de comprimento de leitura, e o sequenciamento interno da Illumina atualmente concluiu o sequenciamento de par-end de 2 * 400 bp. Tudo isso é feito com base em dados de alta qualidade.


Parâmetros de desempenho do MiSeq


Tempo de sequência Illumina MiSeq e quantidade de dados


Comprimento de leitura (bp) tempo Quantidade total de dados Q30
1×36 ~ 4 horas 540-610 Mb ﹥90%
2×25 ~ 5,5 horas 750-850 Mb ﹥90%
2×100 ~ 16,5 horas 3.0-3.4 Gb ﹥85%
2×150 ~ 24 horas 4.5-5.1 Gb ﹥80%
2×250 ~ 39 horas 7.5-8.5 Gb ﹥70%



Comparação de leitura Illumina MiSeq


Tipo de execução Leituras filtradas (milhões)
Antes da atualização Após a atualização
Leitura única 5-7 M 15-17 M
Leitura de emparelhamento final 10-14 M 30-34 M


Fluxo de trabalho


Sequenciador de segunda geração illuminaMiSeq quatroGrandes características

Ciclo experimental mais curto: leva 8 horas a partir do início da preparação da amostra para obter resultados de sequência de alta qualidade de mais de 100M.

Processo de preparação de amostras conveniente: é necessário um modelo de 50ngDNA, e 2 horas de operação automatizada podem completar todo o trabalho de preparação de amostras.

Princípio de sequenciamento: o MiSeq continua o princípio químico de sequenciamento de laterais sintéticos das plataformas GA e HiSeq.

Integração completa: o MiSeq pode realizar a geração de clusters, o sequenciamento bidirecional e a análise de dados de forma independente, para que o financiamento e o espaço de laboratório não sejam mais obstáculos para a pesquisa do NGS.


Sequenciador de segunda geração illuminaAplicações do MiSeq

1 Sequência de transcrição

A Plataforma de Sequenciamento MiSeq da Passenor é uma plataforma de análise transcriptiva de espécies sequenciadas pelo genoma. A equipe técnica da empresa já concluiu a sequência e análise do transcritoma de várias plantas e animais, incluindo peixes zebras.


Sequenciamento da região V única do rDNA 16S do macrogenoma

Sequenciamento de alto fluxo da única região V (V3 V4) do ADNr 16s para identificar a flora bacteriana e paleontológica. A equipe técnica da Passenor identificou com sucesso as bactérias do ambiente intestinal das galinhas usando o Illumina MiSeq para sequenciar a região V4 do 16S rDNA e em combinação com o Roche 454 FLX+ para sequenciar as regiões V1 a V3 do 16S rDNA.


Sequência de pequeno RNA

O comprimento de leitura de 1 * 35bp é combinado com o comprimento de sequência de pequeno RNA, velocidade rápida e alta sensibilidade. A equipe técnica da Paisennor já concluiu o sequenciamento de pequenos RNAs em gansos e em várias ervas.


Re-sequenciamento: inclui o sequenciamento completo do genoma, sequenciamento simplificado do genoma e sequenciamento de exons.

O Illumina MiSeq é ideal para a reesequenciação de genomas microbianos, permitindo que um genoma microbiano seja sequenciado a cada execução. Em 27 de dezembro de 2011, a equipe técnica da Paisennor reutilizou o MiSeq para sequenciar simultaneamente bactérias lácticas (Lactobacillus casei Zhang e Lactobacillus casei P8) com uma profundidade de cobertura genômica de 404 e 213 vezes, respectivamente, em comparação com a sequência de referência, alcançando a cobertura total do genoma, detectando várias variações estruturais, incluindo inserção, ausência e locais SNP, e detectando todos os plasmídeos.


Apresentação de dados

* As descrições dos produtos e dados acima são da Illumina, apenas para fins informativos.De acordo.