Precauções para a operação do kit de ELISA do hormônio do crescimento bovino (GH)

Preparação de materiais experimentais e reagentes:

1. Instrumentos e materiais: marcador enzimático (pré-aquecimento 30 minutos antes do uso), agregador de microfluidos, aspirador, água destilada ou água desionizada, papel de filtro.

20 x diluição do tampão de lavagem: diluição de água destilada em 1: 20, ou seja, 1 porção de tampão de lavagem 20 x mais 19 porções de água destilada.

Coleta, processamento e conservação de amostras:Precauções para a operação do kit de ELISA do hormônio do crescimento bovino (GH)

: adequado para a detecção de componentes secretórios de células em cultura in vitro. Recolha o líquido supracelular com um tubo estéril e centrifugar a 1000 x g por 15 minutos para recolher o líquido supracelular.

[Soro]: A temperatura ambiente, o sangue coagula naturalmente e é centrifugado por 1.000 x g por 15 minutos para ser testado.

[Plasma]: deve ser selecionado EDTA ou citrato de sódio como anticoagulante de acordo com as exigências da amostra, depois de misturar 10-20 minutos, centrífuga a 1000 x g por 15 minutos, coletar a limpeza superior.

: incluindo água do peito e abdômen, líquido cerebrospinal, secreções, etc. Recolha com um tubo centrífugo sem termogênio e endotoxinas, centrífuga a 1.000 x g por 15 minutos para recolher a limpeza superior.

Requisitos de amostra: A amostra não pode conter NaN3, pois o NaN3 inibe a atividade da peróxidase de raiz de moringa (HRP).

[Conservação da amostra]: se a amostra não for detectada imediatamente, deve ser dividida e mantida a -80 ° C para evitar o congelamento repetido. Se houver precipitação durante a conservação, deve ser novamente centrifugado. Sempre que possível, não use amostras de sangue hemolíticas ou hiperlipídicas. Se o soro contém grandes quantidades de partículas, centrifuge ou filtre antes da detecção. Não descongelar a 37 ° C ou mais. Deve descongelar-se a temperatura ambiente e assegurar que as amostras sejam descongeladas adequadamente e uniformemente.

Precauções para a operação do kit de ELISA do hormônio do crescimento bovino (GH)：

1) Criação térmica estritamente de acordo com o tempo e a temperatura especificados para garantir resultados precisos, todos os reagentes devem atingir a temperatura ambiente de 20-25 ° C antes do uso, imediatamente após o uso, refrigeração e conservação do reagente.

2) a lavagem incorreta da placa pode levar a resultados imprecisos, antes de adicionar o substrato, certifique-se de aspirar o líquido dentro do furo o máximo possível e não deixe o microporo secar durante o processo de aquecimento.

3) Eliminar líquidos e impressões digitais resíduos da placa de fundo, caso contrário, afetar o valor de OD.

4) O líquido de coloração de substância deve ter uma cor incolor ou muito clara, o líquido de substância que se tornou azul não pode ser usado.

5) Evite a contaminação cruzada das amostras da caixa para evitar resultados errados.

6) Nenhum reagente de reação pode entrar em contato com o solvente de branqueamento ou os gases fortes emitidos pelo solvente de branqueamento, evitando afetar a atividade biológica no reagente.

7) Depois de equilibrar até a temperatura ambiente, abra o saco de vedação para que as gotas de água não se condensem na barra de placa fria.

Indicadores de teste frequentes:

1. Detecção de citocinas (por exemplo, interfeína, necrosis, interferônios, fatores de crescimento transformados, quimicos, receptores de citocinas, estimuladores de colônias, moléculas de adesão, fatores de crescimento, etc.)

2. Testes endócrinos (tais como tireóide, pâncreas, sexo, progesterona, crescimento, endotelina, óseo-cálcio, prolactina, testosterona, promotor da corteza adrenal, folulina, estradiol, estratriol, serotonina, 17-hidroxiprogesterona, etc.)

3. Detecção de infarto cardíaco (por exemplo, proteína miocálcica, mioglobina, proteína C-reativa, etc.)

4. Detecção de fibrose hepática (por exemplo, conectivina, ácido transparente, colágeno, fator de protease metálica de matriz, protease metálica de matriz, viscosina de camada, etc.)