Expressão de shRNA clonada

OmicsLink ™ Propriedades da expressão de shRNA clonado
A seleção de todas as sequências de alvo do shRNA é calculada por algoritmos precisos. Dependendo do gene, o comprimento do tronco do shRNA varia entre 19 e 29 pares de bases. Estes garantem uma alta eficiência de inibição da expressão e um baixo efeito off-target após a expressão de shRNA clonado.
Os veículos usados ​​para clonar shRNA incluem veículos slowvirus e veículos hospedados por células de mamíferos, com diferentes promotores e genes marcadores de rastreamento disponíveis para escolher.
O gene marcador de rastreamento de fluorescência verde (eGFP) carregado no veículo pode ser usado para monitorar a eficiência da transfecção do veículo plasmídico e a eficiência da infecção do vírus transdutor.
O veículo é estruturado com marcadores de triagem de cepas celulares estáveis (purimicina) e o gene de rastreamento de fluorescência verde (EGFP), características que permitem que o veículo seja usado tanto para estudos de inibição estável quanto para estudos de inibição instantânea.
Usando um sistema de transportador de vírus lento, o shRNA pode ser redigido para células divididas convencionais, bem como para linhagens celulares de destino que não se dividem e são difíceis de transfectar.
As sequências parciais do veículo foram sequenciadas, incluindo iniciadores, cadeias justas e antisentificadas que codificam shRNA, estruturas de pinças de cabelo, terminadores e outras sequências de junção.

OmicsLink ™ Aplicações
O efeito da inibição da expressão genética de um único gene por meio de um clone de shRNA pode ser comparado a um clone controlado negativo que contém uma sequência irregular.
Os clones ORF do gene humano da nossa empresa são classificados de acordo com diferentes sinalizações, metabolismo, vias e correlações da doença, famílias de genes, etc. Colocar clones de shRNA conhecidos da mesma via em placas de 96 ou 384 buracos permite estudar a função de um conjunto de genes em uma única via de sinalização. Atualmente, nossa empresa está disponível para fornecer clones de shRNA para todos os genes das quinases humanas e foram classificados de acordo com a função das diferentes quinases.
Confirmação de Clonagem de Expressão ORF Nossa empresa já possui clonagem ORF do gene alvo humano shRNA correspondente, que pode ser colocado em vários veículos de expressão, com diferentes genes de marcação e rastreamento. Estes clones de expressão ORF normal e os mesmos clones de expressão ORF com mutações silenciosas na sequência alvo do shRNA podem ser usados ​​para estudos de confirmação do shRNA e estudos de salvação da função genética.

Garantia do produto

A caixa de expressão foi sequenciada em todo o comprimento, incluindo iniciadores, sequências de alvos justos e contrários, estruturas de pinças de cabelo, sinais de terminação e outras sequências de junção. Para os clones de shRNA do quinasoma humano construídos no veículo psi-sH1, fornecemos 1 a 3 clones por gene, e todos os clones foram confirmados por cromatografia AP com níveis de inibição da expressão do gene alvo acima de 70%. Para os clones de shRNA construídos para slowvirus e veículos de mamíferos, fornecemos quatro clones de cada gene. Garantimos que pelo menos um clone atingiu um nível superior a 70% de inibição da expressão do gene alvo a nível de mRNA, desde que o método de detecção mencionado acima seja usado e experimentado de acordo com os procedimentos operacionais e precauções fornecidas nas instruções. Se nossa empresa verificar que nenhum dos quatro clones apresenta o nível esperado de inibição da expressão, nossa empresa promete substituir 1-4 clones de shRNA gratuitamente.


* Este produto é somente para pesquisa, não para diagnóstico clínico