Polietilamina linear de grau transfectável (MW40000)

Apresentação do Produto

polietilamina linear de grau transfectável (MW40000É um produto de reagente de transfeção instantânea baseado em polietilamina, com um efeito de transfeção elevado. A polietilamina é um polímero de macromolécula orgânica com alta carga solar, que se liga facilmente a moléculas de ácido nucleico com carga negativa para formar um complexo com carga positiva. O complexo liga-se aos íons da superfície da célula e entra na célula através da ingestão intracelular. Este reagente de transfecção é baixo em citotoxicidade, aplicável a várias linhas celulares e amplamente utilizado em proteínas recombinantes,AAVprodução etc.

comMW25000Em comparação com os reagentes de transmissão,MW40000A solubilidade do reagente de transfecção é boa e pode ser dissolvida diretamente na água, sem a necessidade de regular a solução ácido-alcalina; A operação é mais fácil e a transmissão é eficaz.

Informações básicas

Instruções de uso

Configuração do Reagente

Material necessário:

Água deionizada ou superior,1 mol / L*（NaOH(Único)0.1~0.2μm PESFiltro estéril a vácuo, estérilHDPEou garrafas de armazenamento de polipropileno.

Configuração do líquido de armazenamento:

⑴ Será1 gr.polietilamina linear de grau transfectável (MW40000(dissolvido em900 mLDesionizar em água, agitar uniformemente no agitador magnético até dissolver;

⑵ usar1 mol / L* AjusteO pHpara6.9~7.1(comoO pHmaior que7.1Com o ácido clorhídrico,O pHAjustar o valor para6.9~7.1）；

⑶ Transferir a solução para o cilindro (ou copo)Dentro, com água.Acomodação para1 L；

⑷ Usando uma única vez0.2 µmFiltro de vácuo filtragem de desinfecção, isto é, obter1 mg/mllíquido de armazenamento;

⑸ O líquido de armazenamento pode ser dividido conforme necessário e armazenado em4℃ pode ser conservado1Um mês.

Processo de operação de transfecção

Vacinação de células: para melhorar a eficiência da transfeção, recomenda-se que as células sejam vacinadas um dia antes da transfeção para a densidade celular no momento da transfeção.Em70~80%adequado；

Preparação.DNA...Complexo de Reagentes de Transfecção:

⑴ SeráDNAReagentes de transfecção e diluentes retornam à temperatura ambiente;

⑵ Diluir quantidades moderadas com meios apropriados sem soroDNA；

⑶ De acordo com uma certa proporção(cada1 μg de DNANecessário1-5 μLReagentes de transfecção, recomenda-se encontrar sua própria proporção)Adicione o reagente transfectante diluído gota a gota.DNATubos de ensaio da solução(Não adicione a ordem)De um lado.suavementeVortex, misturado completamenteTemperatura ambiente.10~25minutoincubação。

Células transfectadas:

⑴ Quando se transfige sem soro, remova o meio de cultura celular e substitui-o por meio sem soro;

⑵ Adicionar quantidades adequadas às célulasDNA...Complexo de Reagentes de TransfecçãoMisture suavemente.Transfecção.6-8Depois de uma hora, substituir o meio recém-aquecido；

⑶ EmCondições adequadasmeioCultivo, após a infecção24HorasA expressão do gene transferido pode ser detectada (o tempo de detecção apropriado pode ser determinado por si mesmo).

Condições de transporte e armazenamento

Condições de transporte: Transporte a temperatura ambiente

Condições de conservação: pó a temperatura ambiente ou4℃ conservação, prazo de validade2anos.

Precauções

1. Para a maioria das células, cada1 μg de DNAusar3 μLO reagente de transfeção pode obter uma eficiência de transfeção mais elevada, e também pode tentar cada1 μg de DNAusar1,5 ~ 4 μLReagentes de transfecção otimizados.

2. Para sua segurança e saúde, por favor, use uma roupa experimental e use luvas descartáveis ​​para operação.

3. Este produto é usado apenas para fins de pesquisa científica.