Serviço técnico Fish

Os serviços de tecnologia fish são usados ​​no início para entender a proliferação, ausência, fusão ou ruptura de genes ou cromossomas e são adequados para: diagnóstico pré-natal, teste de doenças genéticas pós-natais, diagnóstico de tumores e avaliação do prognóstico. Ampla variedade de amostras: tecidos, células descartadas, vesículos, sangue, medula óssea podem ser detectados, e não se limitam a amostras frescas, amostras de parafinas de 2-3 anos podem ser detectadas.

O FISH também pode detectar os ácidos nucleicos em chips de tecido (atualmente usados ​​para detectar ncRNA: microRNA, lncRNA, circRNA), pode saber a localização da expressão de ácidos nucleicos em dezenas ou centenas de espécimes, pode ser usado para analisar as diferenças de expressão de ácidos nucleicos ao lado do câncer, a relação entre a expressão de ácidos nucleicos e a sobrevivência, a expressão de ácidos nucleicos e o desenvolvimento do tumor, etc.

Processo de Experimentação de Serviço Tecnológico Fish:

Serviço técnico FishFlorescência In-Situ Hybridization (FISH) é uma técnica para a detecção de amostras híbridas in situ usando sinais fluorescentes não radioativos. Ele combina a alta sensibilidade, segurança, intuitividade do sinal fluorescente e alta precisão de hibridação in situ, através de uma sonda de DNA marcada por fluorescência para hibridação in situ com DNA de amostras a serem testadas, para identificar e contar o sinal fluorescente sob o microscópio fluorescente, para detectar e diagnosticar amostras de células e tecidos com cromossomas ou anomalias genéticas, fornecendo uma base precisa para a classificação, pré-prognose e pronóstico de várias doenças relacionadas com genes. Desde que Pinkel e Heiles introduziram a tecnologia FISH no campo da detecção cromossómica no final da década de 1980, a tecnologia FISH tem sido amplamente utilizada em diagnósticos clínicos e pesquisas científicas, mostrando vantagens significativas em comparação com algumas técnicas tradicionais.

Tecnologia híbrida fluorescente in situServiço técnico FishO FISH apresenta boa estabilidade e repetibilidade em comparação com o método imunohistoquímico tradicional (IHC). Atualmente, a imunohistoquímica está sendo amplamente usada no diagnóstico clínico em várias áreas, incluindo tumores. O alvo de teste de imunohimicidade é a proteína associada à doença. Como a expressão e a própria configuração das proteínas são altamente influenciadas por vários fatores (por exemplo, ácidos, álcalis e agentes de degeneração), a estabilidade das condições de teste é essencial para os resultados do teste. Além disso, o julgamento dos resultados do teste imunohimico depende do julgamento subjetivo do testador sobre os resultados de coloração, e para alguns resultados fracamente positivos, os diferentes testadores são propensos a divergir. Todos os fatores acima podem influenciar o diagnóstico final do médico da doença.

Tecnologia híbrida fluorescente in situServiço técnico FishO objeto é o DNA da célula, a estrutura densa de dupla espiral permite que o DNA possa permanecer bom por milhões de anos, sua estrutura é estável e não é facilmente afetada pelas condições ambientais, fornecendo uma boa base para a estabilidade da tecnologia de híbrido in situ fluorescente. Além disso, a determinação dos resultados de cruzamento in situ da fluorescência quantificou objetivamente os resultados do local de detecção com a ajuda do julgamento da cor da fluorescência e da contagem do sinal. Se o sistema operacional FISH correspondente (por exemplo, o híbrido da Abbott-Vysis e o sistema de pré-processamento de amostras VP2000) e o sistema de imagem cromossômica permitem automatizar toda a operação FISH, minimizando os fatores subjetivos do operador e do detector e garantindo a precisão dos resultados.

PCR devido à alta sensibilidade, fácil e rápida operação é a técnica de diagnóstico genético aplicada nos últimos anos, mas a proporção de falsos negativos e falsos positivos da técnica de diagnóstico de PCR é alta, a mesma amostra só pode ser analisada uma vez e os resultados experimentais não podem ser repetidos. À medida que a tecnologia de sonda continua a evoluir, a sensibilidade atual do FISH se aproxima ou atinge os níveis da PCR e compensa bem as limitações da tecnologia de PCR. A tecnologia de hibridação in situ de fluorescência não só oferece uma taxa extremamente baixa de falsos positivos e falsos negativos (29.000 resultados de diagnóstico pré-natal da Abbott-Vysis, por exemplo, confirmam uma taxa de precisão de até 99,9%), mas também permite realizar várias operações FISH na mesma amostra e detectar anomalias em vários cromossomas ou genes de uma só vez usando sondas fluorescentes de cores diferentes, economizando muito tempo. Além disso, atravésServiço técnico FishEstudos diagnósticos podem ser realizados sobre o número anormal de cromossomos ou genes específicos, a ausência, o deslocamento e a reorganização de segmentos específicos.

A hibridação in situ de fluorescência (FISH) é um método de aplicar o princípio de hibridação de sonda de ácido nucleico a substâncias fluorescentes não radioativas para mostrar a localização da sequência de DNA no núcleo ou no cromossomo. Esta tecnologia tem características como rapidez, segurança, alta sensibilidade e conservação a longo prazo da sonda, e tem sido amplamente usada em áreas como citogenética, biologia tumoral, localização genética, mapeamento genético, amplificação genética, diagnóstico pré-natal e pesquisa de evolução cromossômica em mamíferos.

Em termos simples, o princípio de emparelhamento complementar de bases é que emparelhamos o ácido nucleico exótico (ou seja, muitas vezes chamado de sonda molecular) com o DNA ou o RNA a ser detectado no tecido, na célula, para formar uma molécula híbrida de ácido nucleico, e depois por certos meios mostrar a localização desta molécula híbrida.

ARN > ADN > ADN

　　Serviço técnico FishTem sido amplamente utilizado em áreas como citogenética, biologia tumoral, localização genética, mapeamento genético, amplificação genética, diagnóstico pré-natal e estudos de evolução cromossómica de mamíferos.

A hibridação in situ fluorescente simplifica a detecção de variações estruturais cromossómicas. Se o haplosoma não inteiro do cromossoma vegetal é devido a comportamento cromossómico anormal, isso pode ser causado por fatores como diferenças no número e estrutura dos cromossomas parentais ou parentesco cromossómico mais distante. A utilização de híbridos in situ facilita a detecção de cromossomas ausentes, adicionais ou substituídos.

A resolução espacial e a sensibilidade do FISH tornam possível a localização de genes parentais e amplificadores em células antiparasitárias. Os genes amplificados estão principalmente no mesmo braço cromossómico, mas a uma certa distância do gene parental inicial e, muitas vezes, localizados independentemente no telómero cromossómico; A análise FISH sugere que a ruptura celular pode ser devido a uma reorganização estrutural dos cromossomas que contêm regiões de amplificação. A localização e o número de cópias de genes estrangeiros em plantas geneticamente modificadas também podem ser usadas com o FISH, o que tem sido bem sucedido em culturas como tomate, tabaco, cevada, trigo e cevado. A tecnologia FISH também pode ser usada para detectar algumas deficiências genéticas associadas a doenças hereditárias, como a detecção bem sucedida de genes ausentes em pessoas com doença aniridia.

A tecnologia de localização genética de hibridação in situ fluorescente tem amplas aplicações. A localização de genes relacionados ao câncer de pulmão com mutações PP2Ac na região cromossômica é observada sob microscópio fluorescente para gravar e analisar as características do sinal híbrido. Os resultados mostraram sinais híbridos evidentes nos cromossomas 5q23-31 dos linfocitos humanos normais, com sinais mais fortes nos cromossomas 5 e 7 das células GLC-82. A mutação do ponto de descrição provoca alterações na atividade do PP2Ac e, portanto, a deslocação genética, levando à produção de tumores pulmonares. A combinação da tecnologia FISH com bioquímica, computação e técnicas de DNA recombinante para detectar locais Alu sugere que a sequência de DNA está relacionada ao tipo de banda. Pesquisas com a tecnologia FISH sobre a distribuição de genes que codificam no genoma humano revelaram que os genes se concentram principalmente na seção de DNA G + C (35% do genoma total) no cromossoma. A tecnologia FISH fornece um instrumento importante para a investigação da estrutura dos grânulos de seda. A aplicação da técnica FISH permite a observação direta dos telômeros cromossómicos, o que simplifica o estudo estrutural e funcional dos cromossómios dentro do núcleo.