Na pesquisa neurocientífica, modelos animais estáveis ​​e confiáveis ​​são a pedra angular da exploração dos mecanismos vitais e da validação de estratégias terapêuticas. Como técnica central para a construção de vários modelos de pesquisa científica do cérebro, a regularidade e a precisão de sua operação são essenciais. Uma cirurgia bem sucedida não só minimiza os danos aos animais, mas também é fundamental para garantir a precisão e a repetibilidade dos dados experimentais subsequentes.

O domínio da cirurgia escranica é inevitável sem uma compreensão profunda da estrutura anatômica do cérebro e refinamento repetido de técnicas operacionais sofisticadas. Na prática, muitos pesquisadores frequentemente enfrentam os seguintes problemas típicos:

✅ Como remover o crânio com segurança para garantir que o tecido cerebral esteja intacto?

✅ Como equilibrar a força de fixação com a integridade do campo de visão da imagem ao fixar o vidro craniano?

✅ Quais são os detalhes da operação estéril durante a cirurgia e do cuidado com os animais após a cirurgia?

Este artigo será desenvolvido em torno do processo clássico de cirurgia de excrénio em ratos, com uma demonstração clara de passos e uma análise de pontos-chave para sistematizar a abordagem central da técnica. Como o primeiro artigo de "Cirurgia de preparação para ratos com imagem de fluorescência de dois fotões", este artigo tem como objetivo ajudar os leitores a fortalecer as bases cirúrgicas. No futuro, também iremos detalhar mais detalhes sobre o implante de lentes GRIN, abertura da janela da medula espinhal, combinação de fótons duplos e implante de eletrodos EEG, para acompanhá-lo no avanço tecnológico no caminho da pesquisa científica.

　　Conselhos:Considerando como você se sente assistindo, tratamos algumas imagens cirúrgicas suavemente, por favor, fique tranquilo assistindo.

　　

　　PARTE 01Preparação pré-operatória

Instrumento cirúrgico: duas pinças finas, uma micro-raspadora de duas cabeças e um corte de mola.

Consumíveis de Experimento: Consumíveis necessários para a preparação do experimento e água salina fisiológica (1% de sódio de cefalotrexona).

3. desinfecção de instrumentos: todos os instrumentos ou implantes usados ​​na cirurgia precisam ser desinfetados antes de serem usados, podem ser desinfetados com 75% de etanol e podem ser esterilizados regularmente sob alta pressão.

4. desinfecção da mesa de cirurgia: a mesa de cirurgia deve ser limpa com etanol de 75% antes de usar a desinfecção, a mesa de cirurgia deve ser coberta com pano estéril, almofada de absorção limpa ou toalha, e esses materiais devem ser substituídos após cada cirurgia.

　　PARTE.02Anestesia, Fixação

1. Coloque os ratos no depósito de anestesia para anestesia induzida, o fluxo de gás e a escala de anestesia são ajustados de acordo com a máquina de anestesia de gás do laboratório. Quando os ratos apresentaram uma respiração significativamente mais lenta e membros relaxados, isso indica que os ratos entraram em um estado de anestesia.

Fixe o rato anestésico no localizador cerebral e mantenha a anestesia, observando a respiração do rato durante a cirurgia.

　　PARTE 03Depilação

1. aplicar uniformemente a crema para os olhos do rato, a dose deve cobrir completamente os olhos do rato para que os olhos não sejam expostos.

Use uma barra de algodão médica mergulhada para remover a pasta, aplique uniformemente na raiz do cabelo em oposição à direção do crescimento do cabelo e limpe o cabelo da cabeça com uma barra de algodão após cerca de 2 minutos.

3. Use uma barra de algodão médica para mergulhar em água salina fisiológica e limpar os resíduos de creme de depilação da cabeça do rato.

4. Use iodo para limpar a pele eliminada.

PARTE 04Expor e limpar o crânio

1. Use a mola para cortar o couro cabeludo.

Remova toda a gordura em excesso no crânio exposto e nas duas ligações musculares.

3. Use uma micro-escavadeira de cabeça dupla para raspar a superfície do crânio com resíduos de mucosa, tecido conjuntivo, etc.

Mantenha a bola de ouvido e sopra a superfície do crânio até secar completamente.

　　PARTE 05Abrir o crânio

1. com o orificio de injeção de vírus ou o local de localização como centro círculo, com uma pinça fina para colocar o slide redondo de especificações apropriadas na superfície do crânio.

2. Ajuste a velocidade da perfuração do crânio para a faixa baixa, depois de polir ao longo do tamanho da lâmina uma volta, use a bola de lavagem suavemente para remover os detritos, repita esta operação até que a faixa de polimento corresponda totalmente ao tamanho da lâmina, em seguida, ajuste a velocidade de rotação para a faixa média e alta, continue a polir.

Quando o crânio aparece rachadura, ajuste a velocidade de rotação da broca do crânio para a faixa baixa, continue a polir e repita a operação até que toda a janela do crânio quebre completamente.

Mantenha a pinça fina e desbloqueie lentamente a peça do crânio.

　　PARTE 06Apagar as cascas

Usando uma pinça fina para abaixo do lado da janela do crânio, selecione suavemente os fragmentos circundantes e repita a operação até que a janela do crânio esteja completamente livre de fragmentos.

PARTE 07Instalação de slides

1. Use pinças finas para segurar a lâmina limpa e colocar suavemente no tecido cerebral exposto; Pressione suavemente o slide com uma pinça para que o slide se encaixe bem na face do crânio polido e se encaixe debaixo do crânio; Verifique sob o microscópio corporal se houver bolhas sob o slide e, se houver, desbloqueie o slide e adicione gotas de água salina fisiológica e repita até que não haja bolhas.

2. Use a ponta do papel de absorção de umidade para absorver o líquido em excesso que se infiltra fora do slide, use a bola de lavagem de ouvidos para secar suavemente a superfície do crânio, para a ordem de fora para dentro, mergulhe uma pequena quantidade de cola de tecido biológico com uma escova pequena, aplique na pele da borda, todo o crânio e a borda da janela craniana.

Espere que a cola do tecido biológico seja seca, mergulhe a cola 406 com uma barra de revestimento dental, aplique o mesmo âmbito e espere que a cola 406 seja seca.

Use a ponta do papel de absorção de umidade para mergulhar a mistura de 502 e cimento dental, aplicar uma pequena quantidade de várias vezes na borda da janela craniana, durante todo o processo de operação, evite que a cola flua para o centro do slide.

PARTE.08Instalação de peças

1. Use cola 502 para dissolver o cimento dentário misturado, cobrir o crânio exposto com uma camada fina e uniforme, fechar completamente o crânio exposto e instalar a cabeça quando o cimento dentário não está seco.

Preencha completamente as lacunas ou as fraquezas de conexão entre a cabeça e a cabeça com cimento dental para reforçar a solidez da cabeça.

Depois de esperar que o cimento dentário seco, coloque o rato na caixa de aquecimento e espere que o rato acorde.

PARTE.09Cuidados pós-operatórios

Fornecer boas condições de sobrevivência para os animais, é recomendado criar uma gaiola única e espalhar a ração dentro da gaiola para evitar que os animais se alimentem ou colidam com a cabeça durante a luta, causando deslocamento de campo de visão ou queda da cabeça.

1-7 dias após a cirurgia, injete a solução de sódio de cefalosporsona na cavidade abdominal do animal, uma vez por dia.