Proteína óssea humana recombinante 3 (BMP-3)

Propriedades do produto:

Antecedentes:

BMP-3Também conhecido como ossogenina, é um alto teor nos ossos adultos.BMPPelo menos.15Estrutura e funções relacionadasBMPUm deles pertenceTGFMembros da família beta.TGFOs membros da família beta são reguladores chave da proliferação celular, diferenciação, síntese de matriz e apoptose. Como o seu nome indica,BMPsInicia, promove e regula o desenvolvimento, crescimento e remodelação dos ossos e cartilagens. Além disso,BMPsTambém está envolvido no desenvolvimento pré-natal, crescimento pós-natal, remodelação e manutenção de vários outros tecidos e órgãos.BMP-3Existe em grande quantidade nos ossos dos adultos, seguido pela cartilagem fetal.BMP-3Através da ativação da cascade de sinalização, o antagonismo promove a transmissão de sinalização da genética óssea, inibindo assim a formação de ossos e ossos.

Marcação:

Misture o meio de cultura celular com a solução EdU em uma proporção de 500: 1 para formar um meio marcado 2 x EdU.

2. pré-aquecer o meio de marcação 2 x EdU com antecedência e, em seguida, misturar 150 microlitros de meio de marcação 2 x EdU com o meio de cultura de células de volume equivalente para obter uma solução de 1 x EdU.

NOTA: Não é recomendado substituir todo o meio de cultura, o que pode afetar a velocidade de proliferação celular. ② O meio de cultura bem configurado é recomendado para uso atual, a quantidade é apropriada para as células sem.

Incubar as células 2 h e descartar o meio de cultura.

O tempo de cultivo depende da taxa de proliferação e do estado de crescimento das células. A maioria das células tumorais e linhas celulares adherentes podem ter um tempo de incubação de 2 h.

Limpe as células com 1xPBS duas vezes, por 5 min cada vez, para remover os resíduos de EdU não incorporados ao DNA.

[Nota]: Para as células com paredes fracas pode reduzir a intensidade de limpeza.

Passos experimentais:

Vacinar as células com uma densidade de 104-105 células / buraco em uma placa de 96 buracos, adicionando 100 μL de meio, com ou sem compostos a testar. Cultivar células em um recipiente de CO2 a 37 ° C por 24 horas.

2. Adicione 10 μL de substância a ser testada em diferentes concentrações à placa.

Cultivar a placa no recipiente durante o tempo apropriado (por exemplo, 6, 12, 24 ou 48 horas).

Adicione 10 μL de solução CCK-8 a cada orificio da placa. Cuidado para não introduzir bolhas no buraco.

Incubar o comprimido na caixa de cultivo por 1-4 horas.

Antes de ler a placa, misture suavemente no oscilador de trilho.

Medir a absorção a 450 nm usando um calibrador enzimático.

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Transcriptase Reversa M-MuLVEspecificações:1000 unidades

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DNA polimerase Taq (recombinante)Especificações:10x500 unidades

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