Kit de ELISA de Complemento Humano 5a

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ELISAObservações experimentais
　　1.No teste formal, as condições de teste devem ser controladas por controle positivo e controle negativo, respectivamente, e as amostras a serem examinadas devem ser feitas em duas cópias para garantir a precisão dos resultados do experimento. Às vezes, o fundo é elevado, indicando uma reação não específica, pode ser usado soro de ovelha, soro de coelho ouBSAEspere fechar.
　　2.EmELISAA escolha de várias condições experimentais é importante, incluindo::
　　(1)Escolha de veículos em fase sólida: muitas substâncias podem ser usadas como veículos em fase sólida, como cloruro de polivinilo, poliestireno, polipropiamida e celulose. Sua forma pode ser placa plana, tubo de ensaio, grânulos, etc. Atualmente é comumente usado40Placa perfurada de poliestireno. Qualquer que seja o veículo, pode ser triado antes do uso: embalado com uma quantidade equivalente de antígeno, reagir nas mesmas condições experimentais, observar a homogeneidade de sua reação de coloração, para determinar se seu desempenho de adsorção é bom.
（2)Pacote com anticorpos(ou antígeno.)A opção: tomar anticorpos(ou antígeno.)A adsorção na superfície do veículo de fase sólida requer uma melhor pureza,Requisitos gerais na adsorçãoO PHEm9.0～9.6Entre. A temperatura de adsorção, o tempo e a quantidade de proteínas também têm algum efeito.,Geralmente mais adotado4℃18～24Horas. A concentração adequada do pacote de proteína precisa ser titrada: ou seja, com concentrações diferentes de proteína.(0.1、1.0e10μg／mlEsperem.)Após a embalagem, observar as amostras positivas em outras condições de ensaio ao mesmo tempo.ODValor. escolhaODValoresConcentração alta e baixa de proteína. Normalmente, para a maioria das proteínas1～10μg／ml。
　　(3)Escolha da concentração de trabalho de anticorpos de marcação enzimática: primeiro comELISATitração da Eficiência Preliminar(Veja enzimas marcando partes de anticorpos). Em seguida, fixar outras condições ou tomar“Lei da Frente Quadrada”(As embalagens, as amostras de referência e os anticorpos marcados por enzimas têm diferentes diluições, respectivamente.)Titre com precisão sua concentração de trabalho em um sistema experimental formal.
　　(4)Substrato enzimático e seleção do fornecimento de hidrogênio: os requisitos para a seleção do fornecimento de hidrogênio são baratos, seguros, com uma reação claramente colorida e incolores em si mesmos. Alguns fornecem hidrogênio.(ComoOPDEsperem.)Existem potenciais efeitos cancerígenos e deve-se prestar atenção à proteção. As pessoas afetadas devem usar um fornecimento de hidrogênio não cancerígeno e altamente sensível, como:TMBeABTSO fornecimento de hidrogênio é atualmente mais satisfatório. Após algum tempo de ação do sustrato, deve ser adicionado ácido forte ou álcali forte para terminar a reação. Normalmente, o tempo de ação do substrato é10-30minutos são apropriados. O líquido de uso de substância deve ser preparado fresco, especialmenteH2O2aderir antes da utilização.