Kit de extração de DNA de RNA de sangue em pequenas quantidades

Série de extração de kits de extração de DNA de RNA de sangue em pequenas quantidades

A composição do kit inclui protetor de RNA e DNA sanguíneo (Buffer BR1, Cat#RP601) para facilitar a coleta, o transporte e a conservação de amostras.

A amostra de sangue foi misturada com o Buffer BR1 em uma proporção de 1: 2,5 e colocada a temperatura ambiente durante 2 horas, o DNA e o RNA da amostra foram curados em um aglutinado em pó que foi facilmente precipitado por centrifugação.

A coluna de adsorção de DNA-RD adsorbe seletivamente o DNA, mantendo o RNA no filtro. Após a adição de etanol ao filtro para ajustar as condições de ligação, a coluna de adsorção de RNA-A adsorbe eficazmente o RNA macromolecular (incluindo mRNA e rRNA, excluindo tRNA e pequeno RNA degradado em 5S).

Após a lavagem da coluna de adsorção de DNA-RD e da coluna de adsorção de RNA-A, respectivamente, o DNA e o RNA podem ser lavados usando água deionizada ou solução de baixo teor salino, respectivamente, para uso direto em experimentos posteriores.

Este kit é adequado para extrair DNA e RNA de ≤1ml fresco de sangue humano ou de mamíferos, ≤3ml congelado de sangue humano ou de mamíferos, respectivamente, o sangue adequado para o tratamento é anticoagulante EDTA-K2, não adequado para o tratamento de sangue anticoagulante de hepatina ou ácido cítrico.

Produção e aplicação de RNA: 3-8 μg de RNA / ml de sangue fresco, 1-2 μg de RNA / ml de sangue congelado; Pequeno volume de lavagem de 15 μl. A maioria do tRNA foi removida e o pequeno RNA degradado em 5S pode ser usado diretamente para 5 `RACE e 3 `RACE.

Produção e aplicação de DNA: 5-10 μg de DNA / ml de sangue; Pequeno volume de lavagem de 50 μl. A pureza é inferior à da série de kits de extração de DNA do genoma sanguíneo e pode ser usada para corte enzimático e PCR convencional.

Este kit também é adequado para extrair RNA e DNA viral de fezes de animais e conteúdos intestinais de moluscos.
Amostras de água salina fisiológica dispersas e soro centrífugo contendo RNA viral e DNA. O soro supercentrifugado é misturado com o Buffer BR1 em uma proporção de 1:2,5 e colocado a temperatura ambiente durante 2 horas, o DNA e o RNA da amostra são curados em um aglutinado em pó que é facilmente precipitado por centrifugação, eliminando a grande maioria dos componentes inibidores da PCR. A operação de seguimento é a mesma que o tratamento de amostras de sangue.

Extração de RNA de 0,4 ml de sangue inteiro fresco

Volume de lavagem 25 μl, volume de eletróforese 2 μl, 1 x TAE, 2% agarose, 6,7 V / cm 15 min

O RNA obtido de sangue fresco não possui DNA genômico e RNA 5S evidentes.

No gel de aglomerase não degenerado, as taxas de migração do ARN 28S, ARN 18S e ARN 5S foram semelhantes a taxas de migração do ADN de 2000 bp, 750 bp e 100 bp, respectivamente.

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