Células-tronco metabólicas sem meio sérico(HuMSC Médio-sério livre)

Descrição do produto

Células-tronco metabólicas sem meio séricoÉ um produto de cultura de células estaminais de qualidade entre cordão umbilical humano sem soro e sem ingredientes de origem animal, com os principais ingredientes: aminoácidos, vitaminas, sais inorgânicos, albina, transferína, insulina, oligoelementos, citofatones, etc.

Este produto pode ser usado para culturas originais e transmissões múltiplas de células-tronco mesoclimais, mantendo o seu potencial de diferenciação multidirecional, como a capacidade de se diferenciar em células ósseas, cartilaginosas e células de gordura, sem a necessidade de adicionar soro ou soro substituto.

Informações de encomenda

Componente do produto

Transporte e conservação

ComponentesATransporte de gelo azul,4conservação ℃; ComponentesBTransporte de gelo seco,-20Conservar abaixo de ℃. validade12 Um mês.

Uso

1.Preparação de meios de cultura

取500mlComponentesAJunte-se.25 metrosL ComponentesBA mistura uniforme éCélulas-tronco metabólicas sem meio sérico。Nota:Se necessário, o usuário pode propor a quantidade necessária.

2. Isolação e Cultura de Células PrimáriasT75Exemplo de garrafa)

(1) Retire o cordão umbilical, desinfete a superfície externa do cordão umbilical e limpe para remover as manchas de sangue, cortando o pacto2cm ~ 4cmPequenoBloco, remover as veias arteriais, fazer um comprimento lateral5 milímetros~10 milímetrosPequenos pedaços, colocados emT75Arranjado bem na garrafa de base de cultura,cada garrafa.15~20Blocos.Nota:É necessário distinguir o lado cutâneo do cordão umbilical e o lado colado Huatong, para garantirA cola Huatong é colada no fundo da garrafa de cultivo.

(2) Vire a garrafa e coloque-a emCO2na caixa de cultivo,37℃Estacionamento60 minutos。

(3) Retire a garrafa e adicione lentamente à garrafa.15 mlCélulas-tronco metabólicas sem meio séricoColoque-o. 37℃ 、5%CO2 cultivo na caixa.

(4) 第 7Deus, cada umT75Agregação de garrafas frescasCélulas-tronco metabólicas sem meio sérico5 ml。

(5) Depois da hidratação cada3Semi-troca diária, aspiração.10 metrosL Eliminar o meio de cultivo, adicionar novamente10 metrosLfrescodeCélulas-tronco metabólicas sem meio sérico。

(6) 第13No início do dia, observe blocos de tecido, como blocos de tecidoA fusão das células circundantes é alcançada90%Pode ser recebidoas células, caso contrário continuam3Semi-troca diária para atingir a fusão celular ao redor do bloco de tecido90%。

3. Cultivo e congelamento de células estaminaisT75Pegarrafas por exemplo)

(1) SeráCélulas-tronco metabólicas sem meio séricoEquilibrar à temperatura ambiente.

(2) Limpeza: remover as células, aspirar o meio da garrafa para descartar, cadaT75Cultivar garrafasUsar10mL~15mLPBSLimpe as células uma vez.

(3) Digestão: Junte-se 3 mllíquido digestivo para que o líquido digestivo penetre toda a superfície de crescimento celular, depois de CO2 na caixa de cultivo,37℃Digestão 2 minutos~6 minutosEspelho de observação, aproximadamente 80%Quando as células acima retornam ao redor e caem,Adicione o dobro do volumeCélulas-tronco metabólicas sem meio séricoTerminar a digestão, bater para que as células se espalhemCélula única, contagem celular.

Nota:Se a maioria das células retornar redondo, mas não cair, você pode bater suavemente na parede da garrafa.sua queda. Se as células não se separarem, o tempo de digestão pode ser prolongado.

(4) Coleta:300g，5 minutosCentrífuga recolhe a precipitação celular e descarta o limpo superior.

(5) Geração/congelamento: para operações de transmissão,Células-tronco metabólicas sem meio séricoSuspender as células de acordo com a densidade de vacinação adequada (recomendado)8000Uma célula./centímetros₂Vacinar as células que foram adicionadas ao equilíbrio à temperatura ambiente.20 mlCélulas-tronco metabólicas sem meio séricode T75na garrafa de cultivo, coloque-a 37℃、5%CO2 Continue a cultivar na caixa.

Se as células forem congeladas, o passo4precipitação das células coletadas, adicionando a quantidade apropriada de células por densidade de congelamentoLiquido congelado suavemente soprar para a ressuspensão das células e misturar para transferir para o tubo de congelamento celular, o tubo de congelamento é colocado no programa para baixarcaixa quenteno meio,-80℃A noite,24 horasDepois é transferido para nitrogênio líquido para conservação a longo prazo.

4. Recuperação de células estaminais (com T75Exemplo de garrafa)

(1) SeráCélulas-tronco metabólicas sem meio séricoEquilíbrio à temperatura ambienteAdicione cada garrafa.15 ml deCélulas-tronco metabólicas sem meio sérico。

(2) Retire as células congeladas e coloque-as 37℃Descongele rapidamente na panela de banho.

(3) Transferência de suspensão celular imediatamente após a absorção descongelada 1mlpara 15 ml Tubo centrífugoAdicione gota a gota 4 metrosL Células-tronco metabólicas sem meio séricoA contagem após a mistura.

(4) De acordo com os resultados da contagem, de acordo com a densidade de vacinação adequada (recomendada). 8000 Uma célula.em cm₂) as célulasVacinação para aderir 15 metrosL Células-tronco metabólicas sem meio séricoem um recipiente de cultura celular.

Nota:Se as células não estiverem congeladas DMSOAs células podem ser adicionadas diretamente 20 metrosL Células-tronco metabólicas sem meio séricoNão é necessário trocar no dia seguinte.líquido.

(5) Coloque as células no 37℃ ,5% de CO2 cultivo na caixa.

(6) 12 horas~24 horasDepois, para que as células se apeguem normalmente à parede, descarte a cultura e adicioneFresco, equilibrado a temperatura ambiente 20 mlCélulas-tronco metabólicas sem meio séricode acordo com o crescimento celularAlém disso, cada 3Diário de troca de líquido para a fusão celular alcançada 80%~90%。

Atenção

1. Este produto é limitado a pesquisas experimentais científicas e não deve ser usado em diagnóstico clínico, tratamento ou outras áreas.

2. Este produto não contém antibióticos e a adição de antibióticos não é recomendada. Se necessário adicionar antibióticos,As condições de cultivo devem ser otimizadas.

3. Este produto não contém fenol vermelho, não contém soros e ingredientes de origem animal, se necessário.pode ser adicionado adicionalmente.

4. Para alcançar o efeito ideal de cultura celular, este produto pode ser usado diretamenteTambém é possível adicionar fatores de crescimento celular ou hormônios adicionais necessários, de acordo com o tipo de célula ou necessidades de pesquisa.

5. livroprodutoOs efeitos da cultura de células podem depender da origem celular, condições de armazenamento, amostrasQualidade, operadorteste há diferença.

6. Os produtos devem ser armazenados nas condições de armazenamento especificadas e usados ​​durante o período de validade.

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