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Lane 908, Rua Ziping, Nova Distrito de Pudong, Xangai
Heyuan Li Jie (Xangai) biotecnologia Co., Ltd.
Lane 908, Rua Ziping, Nova Distrito de Pudong, Xangai
Descrição do produto
2 x mistura Taq PCR Plus simPCRpré-mistura de reação, que contémTaq DNA polimerase、dNTPstampão de reação,carga coranteOutros ingredientes, ao usar apenas tomar a quantidade apropriada deste produto, adicionar modelos e introdutores e adicionarddH2Ovolume de reabastecimento para que a concentração do sistema de reação seja 1× Pode ser feitoPCRReação.PCRProdutos3'Destaque da faixaABase, pode ser usada diretamente após a purificaçãoT / Aclonagem.
Este produto usa um sistema de complexas.DNA do TaqPolimerase e3'5'Sinergia de proteína ativa de exotase, pode alcançar a amplificação de alto rendimento sob o sistema de tampão de reação otimizado, pode aumentar ≤7 kbdeDNAfragmento e compatível.30%-70% GCmodelo de conteúdo. Em comparação com a tradiçãoTaqenzimas (O WT-TaqAumenta a taxa de extensão2-4vezes, reduzindo significativamente o ciclo de reação.
Este produto contém dois tipos de corantes:PCRSem adição adicional após a reaçãobuffer de cargaA eletroferese pode ser realizada diretamente, e duas faixas de indicação azuis e vermelhas aparecerão durante o processo de eletroferese. O corante não afetaPCRAumentar a eficiência, mas para as necessidades corretasPCROs experimentos de análise óptica de absorção, fluorescência e outros produtos são recomendados antes da análise.PCRProdutos para purificação ou uso sem corantesPCRpré-mistura.
Informações de encomenda
Nome do produto |
Número da mercadoria |
especificação |
2 x mistura Taq PCR Plus |
O AN11L828 |
2 * 1 ml |
2 x mistura Taq PCR Plus |
AN11L829 (em inglês) |
5 * 1 ml |
Transporte e conservação
Transporte de gelo azul.-20℃ conservação, prazo de validade24Um mês.
Uso
1. rotinaPCRSistema de reação (operação no gelo)
Componentes |
20 μLSistema |
50 μLSistema |
Concentração final |
2 x mistura Taq PCR Plus |
10 μL |
25 μL |
1 x |
正向引物(10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
Inversão (10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
DNAModelo(2) |
XμL |
XμL |
- |
ddH2O |
Para 20μL |
Para 50μL |
- |
(1) A concentração final recomendada é0.2~0.4μMQuando o efeito é mau, pode0.1~1μMajustes dentro da faixa de concentração;
(2) Diferentes modelos * concentrações de boa reação variam para 50 μLExemplo de sistema: modelo para genomaDNAO uso geralmente recomendado é10~200 ngQuando o modelo é plasmido ou vírusDNAO uso geralmente recomendado é10 pg ~ 5 ngO número excessivo de modelos pode causar expansões não específicas.
2. Método de três passosPCRProcedimento de Reação
etapa |
temperatura |
tempo |
Previsível(3) |
95℃ |
3~5 minutos |
Alteração |
95℃ |
30 segundos |
Incendio(4) |
55~65℃ |
30 segundos |
Extensão(5) |
72℃ |
15~30 segundos/kb |
30~35 ciclos |
||
Extensão final |
72℃ |
5 minutos |
3. Método de dois passosPCRProcedimento de Reação
etapa |
temperatura |
tempo |
Previsível(3) |
95℃ |
3~5 minutos |
Alteração |
95℃ |
30 segundos |
Cozimento e extensão(4) |
60~65℃ |
30 segundos/kb |
30~35 ciclos |
||
Extensão final |
72℃ |
5 minutos |
(3) Esta condição predispostiva é adequada para a grande maioria das reações de amplificação, para alguns modelos complexos, por exemplo, de micróbios, colônias (especialmente leveduras)PCRAmpliação, o tempo preditivo pode ser prolongado adequadamente para10 minutospara aumentar o efeito preventivo;
(4) Temperatura de cozimento de acordo com o introdutorTmConfiguração de valores. Se necessário, recomenda-se encontrar a temperatura * adequada para a combinação do preliminar com o modelo, criando um gradiente de temperatura. Além disso, a temperatura de cozimento determina diretamente a especificidade da amplificação, se a especificidade da amplificação for descoberta, a temperatura de cozimento pode ser melhorada adequadamente.
(5) Quanto à taxa de extensão, quando o comprimento do segmento de destino não excede3 kbQuando o uso é recomendado15 sec/ kbQuando o comprimento do segmento de destino é maior do que3 kbQuando o uso é recomendado30 segundos/kbA taxa de extensão está relacionada com a complexidade do modelo. Se a taxa de produção for baixa, o tempo de extensão pode ser melhorado adequadamente.
Atenção
1. Este produto é usado para pesquisa experimental científica e não deve ser usado em diagnóstico clínico, tratamento e outras áreas.
2. Neste produto2 x mistura Taq PCR PlusÉ necessário fundir * após o uso completo para evitar a concentração de íons desigual.
3. Recomenda-se que todos os componentes da reação sejam preparados no gelo e finalmente adicionados.2 x mistura Taq PCR Plus。
4. Ampliação de segmentos mais longos com modelos de genoma requer purificação de alta qualidadeDNAModelos que podem ser melhoradosPCRTaxa de sucesso.
5. Este produto de expansão pode ser usadoT / Aclonagem. Como este produto contémCarga corante,PCRO produto precisa ser retirado completamente após a recuperação de cola cortada.Carga corante。
6. Recomenda-se o uso do método de tintura de bolha para a coloração após a eletróforese, o método de tintura de cola levará à dispersão da faixa de indicação vermelha, desfavorável para a indicação da faixa e não afetará a faixa de indicação azul. A faixa azul está1% TAEA taxa de migração no tampão é aproximadamente igual a1500 bpA faixa vermelha está1% TAEA taxa de migração no tampão é aproximadamente igual a100 bp。
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