Voo EZ ECLFluido luminescente químico (grau Feiger)

Descrição do produto

EZ ECL voarLuminescente Químico é uma luminescência química melhorada de alta sensibilidade atual*(ECL) HRPSubstratos que ajudam os usuários a realizar a detecção de proteínas de baixo grau de flexo durante a análise da impressão imunológica(<1×10^-13、-14g)É extremamente econômico em anticorpos.Oeste FemoSubstratos podem ser usados ​​para peroxidase de raiz(HRP)Experimentos de impressão imunológica de acoplados fornecem sinais brilhantes e sensibilidade de detecção de nível Pheeker. OECLO substrato é compatível com uma variedade de membranas, líquidos fechados e diluições de anticorpos de ampla gama para atender às necessidades de aplicações de impressão imunológica dos usuários com excelente desempenho, versatilidade e custo-benefício.

Oeste FemoCaracterísticas do Substrato：

•Alta sensibilidadeDetecção de membranas de nitrocelulose ouPVDFFixas de proteína de grau Flick na membrana.

•Longa duração do sinal: Em condições otimizadas, a tira de impressão incubada através do substrato pode ser produzida continuamente6~8 hsinais de luz detectáveis.

Concentração de diluição recomendada：

•Anticoncentração: Recomendação para1 µg/mLDilução de líquido de armazenamento1:5,000para1:100,000vezes

•Concentração secundária: Recomendação para1 µg/mLDilução de líquido de armazenamento1:100,000para1:500,000vezes

Informações de encomenda

Componente do produto

Transporte e conservação

Transporte de gelo azul.4℃ conservação seca, prazo de validade12Um mês.

Uso

1. Retire a membrana de impressão e adicione o líquido fechado adequado para incubar sob a estufa20~60 minutosAo mesmo tempo, oscilar para fechar os locais de ligação de proteínas não específicas na membrana.

2. Retire a membrana do líquido fechado e incube no estufa com um líquido de trabalho de resistência1 horaoscilação ao mesmo tempo; Ou em28Incubação durante a noite, sem oscilação.

3. Adicione uma quantidade suficiente de tampão de lavagem à membrana para garantir que o tampão cobra completamente a membrana*. Incubação de oscilação ≥5 minutosSubstitua o tampão de lavagem e repita esta etapa.4~6Segunda vez. Aumentar o volume de tampão de lavagem, o número de lavagens e o tempo de lavagem ajuda a reduzir o sinal de fundo.[Nota]① Antes da incubação, uma curta lavagem da membrana no tampão de lavagem melhorará a eficiência da lavagem. Segundo a recomendação anteriorHRPMarcar a diluição de resistência secundária é muito importante.

4. SeráHRPFluido de trabalho anti-secundário marcado com membrana incubada em estufa1 horaao mesmo tempo oscilar.

5. Repita os passos3Para remover o não combinadoHRPMarca a segunda resistência.[Nota]membrana eHRPO marcador II anti deve ser completamente lavado após a incubação.

6. SeráASolução eBO líquido é misturado em proporção e preparado para o líquido de trabalho. cadacentímetros²Utilização da membrana0.01~0.1 mLLiquido de trabalho, o líquido de trabalho pode ser estabilizado sob a estufa8 horas。[Nota]A exposição à luz do dia ou a outra luz intensa pode danificar o líquido de trabalho, para obter melhores resultados, guarde este líquido de trabalho em uma garrafa de âmbar à luz; A iluminação comum no laboratório não danifica o líquido de trabalho.

7. Incubar a membrana de impressão no líquido de trabalho5 minutos. Remova a película de impressão do líquido de trabalho e coloque-a em uma folha de plástico ou papel plástico limpo (membrana), absorva o líquido excessivo com uma folha de papel absorvente de água e prensa cuidadosamente a bolha entre a impressão e o papel plástico.

8. Coloque a película de impressão embalada em papel plástico (filme) em uma caixa escura de filme com a proteína virada para cima e desligue todas as luzes, exceto as luzes adequadas para a exposição ao filme, como a luz de segurança vermelha.[Nota]O filme deve ser mantido seco durante a exposição. ② Certifique-se de remover completamente o substrato excessivo da membrana e do papel plástico; Use luvas durante todo o processamento do filme.

9. SeráXO filme é colocado acima da película. Recomendação * Uma exposição60 sDepois, o tempo de exposição pode ser ajustado para obter * melhores resultados. Reações químicas antes da incubação do substrato5~30 minutosO período é * intenso. Essa reação pode durar várias horas, mas a intensidade diminui com o tempo e, se houver uma exposição mais longa após a incubação do substâcio, o tempo de exposição pode precisar ser prolongado para obter um sinal mais forte. Se você usar um dispositivo de imagem de armazenamento fosforescente (comoBio-Radsistema de imagem molecular) ouCCDA câmera pode precisar de um tempo de exposição mais longo.[Nota]Qualquer movimento entre o filme e a membrana pode causar sinais não específicos artificiais no filme.

10. Projete o filme com os projectores e fixadores adequados. Se o sinal for muito forte, o tempo de exposição será reduzido ou a membrana de impressão será retirada e a concentração de anticorpos reduzida será detectada novamente.

Atenção

1. Este produto é usado para pesquisa experimental científica e não deve ser usado em diagnóstico clínico, tratamento e outras áreas.

2. Para obter os melhores resultados, todos os componentes do sistema devem ser otimizados, incluindo o volume de amostra, as concentrações anti-I e anti-II e o tipo de membrana e reagente fechado.

3. Use este produto em comparação com a cor do precipitadoHRPA concentração de anticorpos necessária para a detecção de substância é baixa. Para otimizar a concentração de anticorpos, faça uma análise sistemática de marcas de pontos.

4. Nenhum reagente fechado é ideal para todos os sistemas, por isso é essencial encontrar o tampão fechado mais adequado para cada sistema de teste de impressão imunológica. Os reagentes fechados podem reagir cruzadamente com anticorpos, resultando em sinais não específicos. O fechamento do tampão também afeta a sensibilidade do sistema. Quando se converte de um substrato para outro, às vezes ocorre um declínio do sinal ou um aumento do fundo, provavelmente porque o tampão fechado não é adequado para o novo sistema de detecção.

5. Uso de afinidade/Evite o uso de leite como um reagente fechado no sistema de detecção de biotina, pois o leite contém quantidades indeterminadas de biotina endógena que podem levar a sinais de fundo elevados.

6. Garantir o volume de uso de tampão de lavagem, tampão fechado, solução de anticorpos e líquido de trabalho de substância para garantir que a membrana de impressão esteja completamente * coberta de líquido durante todo o processo experimental, evitando que a membrana se asseque. Aumentar o uso de tampões fechados e tampões de lavagem pode reduzir sinais não específicos.

7. Para obter * melhores resultados, use um agitador durante a etapa de incubação.

8. SeráTween20(Concentração final0.05~0.1%)Adicione tampão fechado e solução de anticorpos diluída para reduzir o sinal não específico. Utilize produtos de alta qualidade, tais como desinfetantes. É mantido em ampulas com baixos teores de peróxidos e outras impurezas.

9. Não use o sódio como conservante para o tampão. O sódio éHRPA supressão.

10. Evite o contato direto das mãos com a membrana, usando luvas ou pinças limpas durante o experimento.

11. Todos os equipamentos devem ser limpos e livres de substâncias estranhas. Os instrumentos metálicos (como tesouras) não devem ter manchas visíveis de ferrugem. As manchas de ferrugem podem levar à formação de manchas e alto fundo.

12. O fluido de trabalho do substrato é estável a temperatura ambiente8 horas. Pode danificar o substrato sob a luz do dia ou qualquer outra luz intensa, para obter * melhores resultados, mantenha o líquido de trabalho do substrato em garrafas de âmbar e evite a exposição a longo prazo sob qualquer luz intensa, exposição curta à iluminação regular do laboratório não danifique o líquido de trabalho.

Recomendações de produtos relacionados

EZ TransReagentes de transfecção celular(Eficiente) (Número do produto:O AC04L092）

Marcador de DNA EZSérie ( Número da mercadoria:AN33L086 (em inglês)）