78PEI MAX 40K Reagentes de Transfecção

🔍 Visão geral do produto

Nome químico:polivinilamina linear, PEI linear, polivinilamina, linear, MW 40000， Polietilamina linear de grau transfectado (peso molecular 40.000)

Número de encomenda:78pei40000

Especificações:100mg / 500mg / 5g

Marca:O BIOHUB

CAS:49553-93-7

Peso Molecular:40.000 (~22.000 radicais livres)

Solução em:水

insolúvel em:Solvente orgânico comum (etanol, acetona, tetrahidrofurano oral)

Aparência:Sólidos de fluxo livre de branco a cinzento

Tratamento:Luvas e armários de ventilação

Armazenamento:Armazenamento à temperatura ambiente

Apresentação:

1.78PEI MAX 40K Reagentes de Transfecção（Também conhecido como PEI 22K em álcalis livres) é um reagente de transferência instantânea funcional*, confiável e acessível. Na maioria dos sistemas de expressão HEK293 e CHO, o PEI MAX oferece alta expressão estável (placas de 96 buracos a biorreatores de 100L). Cada ano, mais pesquisadores e empresas usam o PEI MAX para transfecções celulares, porque o PEI MAX pode esperar até uma alta expressão estável e reduzir o custo da transfecção em 40% em comparação com a maioria dos reagentes de transfecção.

O PEI MAX 40K é mais fácil de usar do que o PEI 25K e tem maior eficiência de transfeção do que o PEI 25K, geralmente o processo de transfeção do PEI 25K normalmente leva algumas horas para completar a preparação, enquanto o PEI MAX 40K pode completar todo o processo de transfeção em duas horas. Além disso, o PEI 25K contém 4-11% de bases propiílicas residuais, o que pode impedir a ligação eficaz da cadeia principal do polímero ao DNA, enquanto o PEI MAX 40K é facilmente desligado, o que significa que o desempenho do PEI MAX é mais estável por lote.

💎 Método de configuração do produto

Preparação de líquido de armazenamento (1 mg/mL)

- Material: 78PEI40000 pó, água ultrapura, 1N NaOH, 0,1 μm filtro

- Passos:

① Tome 1 g de pó dissolvido em 900 ml de água ultra-pura e mexa magnéticamente até a dissolução;

② Adicionar gota a gota 1N NaOH para regular o pH para 6,9-7,1 (se exceder o limite, com 1N HCl);

② Capacitação para 1 L, 0,1 μm filtragem de filtragem de desinfecção;

Depois de partilhar 4 ° C, o líquido é válido por 6 meses e o pó congelado é válido por 1 ano.

2. Preparação de fluido de trabalho

- diluir na proporção de 1 μg de DNA: 1-5 μL de líquido de armazenamento 78PEI40000 (proporção inicial recomendada 1: 3);

Diluir o DNA e o PEI usando um meio sem soro (como Opti-MEM) e deixar em reposo a temperatura ambiente por 10-25 minutos para formar o complexo.

📌 Processo de operação de transfecção

1) Transfecção de células de parede

Vacinação celular: Vacinação celular 24 horas antes da transfecção, densidade de até 70% -80% convergência, substituído por meio de cultura contendo 5% de soro;

Incubação do complexo: adicionar o complexo DNA-PEI gota a gota ao prato de Petri e incubar suavemente durante 4-6 horas após um vortex;

3. troca de fluido e teste: substituição de meio fresco, expressão genética pode ser detectada após 7 horas, transmissão após 24 horas e adição de drogas de triagem.

b) Transinfecção celular suspensa

Preparação celular: ajustar a densidade celular para 1 x 106 células / mL, cultivo de cama agitada por 2-4 horas;

Adição do complexo: adicionar o complexo de DNA-PEI diretamente ao agitador e continuar a oscilar durante 24-72 horas;

Otimização de amplificação: as células podem ser diluídas (1: 2-1: 5) 24 horas após a transfecção para aumentar a produção de proteínas.

⚡78PEI MAX 40K Reagentes de TransfecçãoNotas essenciais

Requisitos de dissolução:

- Deve ser completamente dissolvido, as partículas não dissolvidas podem levar a uma redução da eficiência da transfecção;

Recomenda-se o uso de centrifugadores NEST de 5 mL/14 mL para soluções de grande volume.

Controle do pH:

O pH deve ser ajustado com precisão para 6,9-7,1 na dissolução inicial, tanto alto quanto baixo afetam a formação do complexo.

Estado das células:

- Recomenda-se o uso de células de crescimento logarístico para evitar a digestão excessiva danificar a membrana celular.

Controle de Toxicidade:

Células de alta densidade (> 90% convergência) precisam reduzir a dose de PEI (proporção recomendada 1: 1).

Para mais informações sobre o produto, entre em contato com o agente regional da China: Shanghai Starting Experimental Reagents Co., Ltd.

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(Nota: o conteúdo deste artigo é baseado em dados públicos da marca e informações gerais da indústria, com base no documento de informação da marca.)

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(Nota: Conteúdo do artigo