IMR-90 Fibrocitos Embriopulmonares Humanos

Células IMR-90 (Fibrocitos Embriopulmonares Humanos IMR-90) ATCC ® CCL-186 ™ Detalhes

Informações básicas​

• Número ATCCModelo: CCL-186™
• ​ designaçãoO IMR-90
• ​ depositantesWW Nichols (em inglês)
• Nível de BiosegurançaNível 1 (BSL-1)
• Modo de transporteCongelação (gelo seco)
• Características de crescimentoCrescimento adherente (adherente)
• EspéciePessoas (Homo sapiens）
• FormaçãoFibroblastos (fibroblastos)
• Fontes organizacionaisPulmão (Pulmon)
• Estado da doençaNormal (Normal)
• Tipo de célulaFibroblastos (fibroblastos)

Licenças e regulamentos​

aplicação​

• Transfecção do hospedeiro (técnica Nucleofection da Lonza).

Sensibilidade ao vírus​

• Vírus da poliomielite humana 1 (Human Poliovirus 1)
• Vírus da poliomielite humana 2 (Human Poliovirus 2)
• Vírus da varicela (Varicella-Zoster)
• Vírus do herpes simples 1 (Herpes simplex virus 1)
• Vírus do herpes simples 2 (Herpes simplex virus 2)
• Vírus da poliomielite humana 3 (Human Poliovirus 3)
• Vírus da vacina (Vaccinia virus)
• Vírus do herpes humano 5 (CMV)
• Vírus da stomatite vesicular (Vesicular stomatitis virus)

Características moleculares​

• Atividade da transcrição inversaTranscrição Reversa: Negativa
• Espectro de DNA STR(Sequência de repetição curta):
  • Amelogenina (local do sexo): X
  • CSF1PO: 11,13
  • D13S317：11,13
  • D16S539：10,13
  • D5S818：12,13
  • D7S820：9,12
  • THO1: 8,9,3
  • Tpox: 8, 9
  • vWA: 16,19
• Análise citogenéticaDiplosoma feminino normal (46, XX), cromossomo estável (fêmea humana normal; diploide; estável)
• Enzimas isogênicasGlucose-6-fosfato deshidrogenase (G6PD) tipo B (isoenzimas: G6PD, B)

Fonte e contexto​

Condições de cultivo​

1. Meio de Crescimento Completo​

2. Cultivar o ambiente​

• Atmosfera de gásAr (95%) + dióxido de carbono (CO2, 5%)
• temperatura：37.0°C

Transição (subcultura)​

1. Remova e descarte a cultura antiga.
2. Lavar brevemente a camada celular com uma solução de 0,25% (w / v) panproteinase-0,53 mM EDTA para remover os resíduos séricos contendo inibidores de pancrease.
3. Adicione 2,0-3,0 ml de solução de panprotease-EDTA à garrafa de cultura e observe-a sob microscópio invertido até que a camada celular se disperse (geralmente leva 5-15 minutos).
   NOTA: Evite agitar ou bater em garrafas de cultura para evitar a ligação celular. Células difíceis de dispersar podem ser colocadas em uma incubadora de 37 ° C para acelerar a dissociação.
4. Adicione 6,0-8,0 ml de meio de crescimento completo e soprar suavemente as células para terminar a digestão panenzimática.
5. Divida a suspensão celular em um novo recipiente de cultura (por exemplo, garrafas de cultura ou pratos de petri).
6. Coloque-o em uma caixa de cultivo de 5% de CO2 a 37°C.

Congelação (Preservation)​

• Liquido congelado: meio de crescimento completo (95%) + dimetilo-acetato (DMSO, 5%).
• Temperatura de armazenamentoA fase de vapor de nitrogênio líquido (liquid nitrogen vapor phase).

Produtos relacionados​

• Médio de base recomendado(sem suplementos adicionais ou soros): ATCC 30-2003 (Médio Essencial Mínimo da Águia).
• Soro recomendadoATCC 30-2020 (soro fetal bovino).

Referências​

1. Nichols WW, et al. Caracterização de uma nova cepa de células diplóides humanas, IMR-90.Ciência196: 60-63, 1977.（PubMed: 841339）
2. Rad50 humano está fisicamente associado ao Mre11 humano: identificação de um complexo multiproteico conservado implicado na reparação do DNA recombinacional.Mol Célula Biol16: 4832-4841, 1996.（PubMed: 8756642）
3. Ostlund RE Jr., et al. Um transportador estereoespecífico de mioinositol/D-quiro-inositol em células hepáticas HepG2.J Biol Química271: 10073-10078, 1996.（PubMed: 8626564）

Outras informações​

• Informações do banco de célulasA Banca de Células do Comitê de Conservação de Culturas Típicas da Academia Chinesa de Ciências (GNHu32) forneceu a célula, e os testes de broncógenos, bactérias e fungos foram negativos e foram identificados por STR.
• Restrições de fornecimentoPara uso de pesquisa (research use only).

Células IMR-90, Fibrocitos Embriopulmonares Humanos

Número ATCC®: CCL-186™

Designações: IMR-90

Depositores: WW Nichols

Nível de Biosegurança: 1

Enviado: congelado

Médio & Sério: Veja Propagação

Propriedades de Crescimento: aderente

Organismo: Homo sapiens (humano)

Morfologia: fibroblasto

Fonte: Órgão: pulmão

Doença: normal

Tipo de célula: fibroblasto

Permissões / Formulários: Além do MTA mencionado acima, outras permissões ATCC e / ou regulamentares podem ser necessárias para a transferência deste material ATCC. Qualquer pessoa que compre material ATCC é o último responsável pela obtenção das licenças. Clique aqui para obter informações sobre os requisitos específicos para o envio para a sua localização.

Aplicações: hospedeiro de transfeção (tecnologia de Nucleofecção da Lonza)

Susceptibilidade ao vírus: poliovirus humano 1

Poliovírus humano 2

Varicela-Zoster

Vírus do herpes simplex 1

Vírus herpes simplex 2

Poliovírus humano 3

Vírus da vacina

Herpesvírus humano 5

Vírus da estomatite vesicular

Transcrição inversa: negativa

Perfil de DNA (STR): Amelogenina: X

CSF1PO: 11,13

D13S317: 11,13

D16S539: 10,13

D5S818: 12,13

D7S820: 9,12

THO1: 8,9.3

Tpox: 8, 9

vWA: 16,19

Análise citogenética: fêmea humana normal; diplóide; estável

Isoenzimas: G6PD, B

Idade: 16 semanas de gestação

Sexo: mulher

Etnia: Caucasiano

Comentários: A cepa de fibroblastos diplóides humanos IMR-90 foi derivada por W.W. Nichols e associados dos pulmões de um feto feminino de 16 semanas. [22381]

O potencial de divisão, susceptibilidades virais e outras propriedades foram estudadas minuciosamente de modo que a linha pode ser considerada como uma alternativa para WI-38 e outras cepas de células pulmonares humanas padrão.

As células foram relatadas como capazes de atingir 58 dobramentos populacionais antes do início da senescência. [22381]

Propagação: meio de crescimento completo ATCC: O meio base para esta linha celular é o meio essencial mínimo da águia formulado ATCC, Catálogo n.º 30-2003. Para fazer o meio de crescimento completo, adicionar os seguintes componentes ao meio base: soro bovino fetal a uma concentração final de 10%.

Atmosfera: ar, 95%; dióxido de carbono (CO2), 5%

Temperatura: 37.0°C

Subcultura: Protocolo:

Remova e descarte o meio de cultura.

Enxague brevemente a camada celular com 0,25% (p/v) solução de EDTA tripsina-0,53 mM para remover todos os vestígios de soro que contém inibidor de tripsina.

Adicione 2,0 a 3,0 ml de solução de tripsina-EDTA ao frasco e observe as células sob um microscópio invertido até que a camada celular seja dispersa (geralmente dentro de 5 a 15 minutos).

Nota: Para evitar aglomeração, não agite as células batendo ou agitando o frasco enquanto espera que as células se desprendam. As células que são difíceis de separar podem ser colocadas a 37 ° C para facilitar a dispersão.

Adicione 6,0 a 8,0 ml de meio de crescimento completo e aspirar as células por pipetação suavemente.

Adicionar alícuotas apropriadas da suspensão celular a novos vasos de cultura.

Incubar as culturas a 37°C.

Proporção de substância: Recomenda-se uma proporção de substância de 1:2 a 1:8

Renovação média: a cada 3 a 4 dias

Conservação: meio de congelamento: meio de crescimento completo 95%; DMSO, 5%

Temperatura de armazenamento: fase de vapor de nitrogênio líquido

Médio recomendado (sem os suplementos adicionais ou soros descritos em ATCC Médio):ATCC 30-2003

soro recomendado: ATCC 30-2020

Referências: 22381: Nichols WW, et al. Caracterização de uma nova cepa de células diplóides humanas, IMR-90. Science 196: 60-63, 1977. PubMed: 841339

32932: Dolganov GM, et al. Rad50 humano está fisicamente associado ao Mre11 humano: identificação de um complexo multiproteico conservado implicado na reparação do DNA recombinacional. Mol. Célula. Biol. 16: 4832-4841, 1996. PubMed: 8756642

33041: Ostlund RE Jr., et al. Um transportador esteroespecífico de mioinositol/D-quiro-inositol em células hepáticas HepG2. J. Biol. Química. 271: 10073-10078, 1996. PubMed: 8626564

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