Células renais do macaco verde africano VERO

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Células renais do macaco verde africano VEROApresentação detalhada

Condições de cultivo:

Médio de cultura: DMEM alto açúcar 90%; Sério bovino de 10%.

Condições de cultivo: 37.0C dióxido de carbono (CO2), 5%

Método de transmissão:

Depois de receber as células, retire a garrafa para observar o crescimento celular sob um microscópio invertido.

(1) Se as células não estiverem cheias, pulverize a garrafa inteira com 75% de álcool e coloque-a na mesa de superbactéria, operação estritamente estéril, abra a garrafa de cultura celular, aspirar o líquido de cultura, deixando apenas 10 ml de cultura na garrafa para continuar a cultivar.

Se as células estiverem cheias, a cultura de transmissão pode ser realizada. As etapas específicas são as seguintes:

1. Elimine o líquido de cultura e lave 1-2 vezes com PBS (sem cálcio, íons magnésio).

Adicione 1 ml de líquido digestivo (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTA) na garrafa de cultura, inverte e coloque no recipiente de cultivo de 37 graus por 1-3 minutos para pré-aquecimento, em seguida, inverte a garrafa de cultura cerca de 30 segundos depois, observar a digestão celular sob o microscópio invertido, se a maioria das células se arredondar e se dispersar, toque em algumas garrafas de cultura, as células imediatamente cair.

Adicionar 6-8ml de meio de cultura, aspirar e dividir em uma nova garrafa de cultura. 1:3-1:6 transmissão; 2-3 dias uma vez. A partir de então, o número de pessoas que estão a trabalhar na área é de 1.

Nota: metade da geração será feita com nosso meio de cultura e metade com o seu, para evitar que as células não se adaptem.

Crescimento é ruim.

Método de congelamento: líquido de congelamento: meio de base + 5% DMSO + 20 S

Armazenamento: Armazenamento de nitrogênio líquido