Kit de ELISA de Microcistina LR (MC-LR)

Kit de ELISA para toxinas de microcistas LR (MC-LR)

Esta caixa é destinada apenas a estudos.

检测范围：96T

20 ng / L - 480 ng / L

Finalidade do uso:

Esta caixa é usada para medirConteúdo de toxinas microcisticas LR (MC-LR) na amostra。

Princípios experimentais

Esta caixa de ensaio é aplicada em amostras de centrifugação de anticorpos duplosToxina de microcistas LR (MC-LR)Nível. com purificação.Toxina de microcistas LR (MC-LR)O pacote de anticorpos é composto por placas de microporos, fabricados em anticorpos de fase sólida, adicionados ao pacote de microporos monoresistentesToxina microcistica LR (MC-LR),Marcado com HRP.Toxina de microcistas LR (MC-LR)Os anticorpos se ligam para formar um complexo anticorpo-antigénico-enzimático e são coloridos após a lavagem do substrato TMB. O TMB é transformado em azul sob a catalisação da enzima HRP e em amarelo final sob a ação do ácido. Luz de cor e amostraToxina de microcistas LR (MC-LR)relacionado positivamente. Determinação da absorção (OD) a um comprimento de onda de 450 nm com um calibrador enzimático e cálculo da amostra através de curvas padrãoToxina de microcistas LR (MC-LR)Concentração.

Composição do Kit

Requisitos de amostra

A extração é realizada o mais cedo possível após a coleta da amostra, a extração é realizada de acordo com a literatura relevante, e a extração deve ser realizada o mais cedo possível após o experimento. Se o ensaio não for realizado imediatamente, as amostras podem ser mantidas a -20 ° C, mas deve ser evitado congelamento repetido.

As amostras que contêm NaN3 não podem ser detectadas porque o NaN3 inibe a atividade da peroxidase de raiz de moringa (HRP).

Kit de ELISA para toxinas de microcistas LR (MC-LR)​Passos de operação

• Dilução do produto padrão: Este kit fornece um produto padrão original, que o usuário pode diluir em pequenos tubos de ensaio de acordo com o gráfico abaixo.

• Amostragem: configurar um buraco em branco (buraco de controle em branco sem amostras e reagentes enzimáticos padrão, as operações restantes são as mesmas), um buraco padrão e um buraco de amostra a ser testado. Em um pacote enzimático, o padrão na placa é amostrado com precisão de 50 μl, e 40 μl de diluição da amostra é adicionado primeiro ao orifício da amostra a ser testada e, em seguida, 10 μl de diluição final da amostra a ser testada (5 vezes a diluição final da amostra). Coloque a amostra no fundo do orificio da placa de marcação enzimática, tente não tocar a parede do orificio e agite suavemente.
• Criação a temperatura: usar a placa de membrana de vedação após 37 ° C durante 30 minutos.
• Distribuição: diluir o líquido de lavagem concentrado 30 vezes com água destilada 30 vezes
• Lavagem: remover cuidadosamente a membrana de vedação, descartar o líquido, secar, encher cada buraco com o líquido de lavagem, deixar em reposo 30 segundos depois de descartar, assim repetir 5 vezes e secar.
• Adição de enzimas: Adicione 50 μl de reagente marcador enzimático a cada poço, exceto os poços em branco.
• Criação: operação 3.
• Lavagem: operar com 5.
• Coloração: Adicione primeiro o colorante A50 μl a cada buraco, depois adicione o colorante B50 μl, misture suavemente e abale, mantenha a cor à luz por 10 minutos a 37 ℃.
• Terminação: adicionar 50 μl de líquido de terminação por orifício para terminar a reação (neste momento, o azul vira para amarelo).
• Medição: medir a absorção (OD) de cada orifício em sequência com um comprimento de onda de 450 nm em um orifício em branco. A determinação deve ser feita no prazo de 15 minutos após a adição do terminal.

Resumo do processo operacional:

cálculo

Leve a concentração do objeto padrão como coordenada horizontal, o valor do OD como coordenada longitudinal, desenhe uma curva padrão no papel de coordenadas, de acordo com o valor do OD da amostra para determinar a concentração correspondente pela curva padrão; multiplicar por múltiplos de diluição; Ou usar a concentração do objeto padrão e o valor do OD para calcular a equação de regressão linear da curva padrão, substituir o valor do OD da amostra pela equação, calcular a concentração da amostra e multiplicar pelo múltiplo de diluição, ou seja, a concentração real da amostra.

Precauções

A caixa de reagente deve ser retirada do ambiente refrigerado após o equilíbrio de temperatura ambiente de 15 a 30 minutos, o pacote de marcação enzimática deve ser armazenado no saco selado após a abertura da placa, se não estiver acabada.

O líquido de lavagem concentrado pode ser cristalizado, diluído pode ser aquecido no banho de água, e a lavagem não afeta o resultado.

Cada etapa de amostragem deve usar um amostrador e regularmente corrigir sua precisão para evitar erros de teste. O tempo de amostragem é controlado dentro de 5 minutos, se o número de amostras for grande, recomenda-se o uso de amostragem de pistola.

• Por favor, faça a curva padrão ao mesmo tempo em cada medição e faça um buraco composto. Se o conteúdo de substância a medir na amostra for muito alto (o valor de OD da amostra é maior do que o valor de OD de um poço padrão di), dilua primeiro um certo múltiplo (n vezes) com a diluição da amostra e depois medir, no cálculo, multiplique o múltiplo de diluição total (×n×5).
• A membrana de vedação é limitada a um uso único para evitar a poluição cruzada.

Por favor, guarde o substrato à luz.

De acordo estritamente com as instruções de operação, os resultados do ensaio devem ser determinados com base nas leituras enzimáticas.

Todas as amostras, líquidos de lavagem e vários resíduos devem ser tratados como infecciosos.

Os diferentes componentes do lote deste reagente não devem ser misturados.

Condições de conservação e prazo de validade

Conservação da caixa:; 2-8 ° C.

2. Período de validade: 6 meses