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Significado experimental

A ciência que pode ser aplicada para esclarecer a estrutura e função do genoma e as interações entre os genes é importante para explorar o papel dos genes na atividade da vida e seus mecanismos.

Capacidade de fornecer novos métodos de diagnóstico e tratamento para algumas doenças pode ajudar os médicos a obter mais informações sobre o tratamento e personalizar o zhunMédico.

Princípios e passos experimentais

Projeto e seleção de siRNA: selecionar um banco de dados adequado e um software para triagem de sequências alvo de siRNA de acordo com o objetivo da pesquisa, geralmente requer o projeto de vários siRNAs para encontrar*Excelente*sequência de siRNA eficaz;

Preparação de siRNA: métodos comuns de preparação in vitro incluem síntese química, transcrição in vitro, degradação de fragmentos longos de dsRNA pela RNase II e preparação de siRNA em células por meio de veículos plasmídicos ou virales de expressão de siRNA e cassetes de expressão de siRNA (SECs) preparadas por PCR;

3. Transfeção de siRNA: siRNA. Os métodos de transferência de veículos de expressão de siRNA ou quadro de expressão de siRNA para as células são principalmente a transfeção co-sedimentada de fosfato de cálcio e a mecânica de transfeção de eletroporação (microinjeção e arma genética). Transfecção de reagentes liposomáticos catiônicos;

Detecção da expressão de genes alvo: métodos como WB para detectar a expressão de genes alvo ou podem analisar sua expressão através de marcadores de siRNA (como marcadores fluorescentes), também podem ser usados ​​como localização intracelular de siRNA e experimentos de marca dupla para rastrear o processo de transfecção e o processo silencioso de expressão de genes alvo.

Ciclo experimental e critérios de entrega

1. Ciclo experimental: 2-4 semanas

Critérios de entrega: plasmidos, resultados de validação de fragmentos, relatórios experimentais (etapas experimentais, reagentes, instrumentos, etc.)

Informações para confirmação

A espécie e o número de identificação do gene

2. Sequência genética

Experimento em serviço: