Kit de teste genético de relatório de fluorescenase de luminosas em um passo

Os testes genéticos de relatório são uma ferramenta importante no campo da biologia molecular moderna para analisar as interações entre os potenciais componentes homogênicos (como promotores, amplificadores e silenciadores, etc.) e os fatores trans nas regiões adjacentes aos genes estruturais.
A fluorescerase de fogueros é amplamente utilizada na regulação genética e na triagem de medicamentos. A fluorescenase de luciferas é uma proteína com um peso molecular de cerca de 61 kD que, na presença de ATP, íons de magnésio e oxigênio, cataliza a fluorescência para produzir oxido de fluorescência (Oxyluciferin), que produz sinais fotológicos durante a oxidação, como mostrado na Figura 1.
O sinal óptico deste kit é uma luz instantânea que precisa ser detectada imediatamente após a adição do líquido de trabalho. A meia-vida do sinal é de cerca de 5 min.

Composição do produto:

1. Configuração do líquido de trabalho
Restaure todos os componentes à temperatura ambiente.
(2) Diluir completamente o componente B (líquido de armazenamento) com o componente A, prepará-lo para 0,2 mg / mL de líquido de trabalho de fluorescenase de fogueiras e agitar com turbulência para garantir a mistura adequada.
NOTA: O líquido de trabalho da fluorescenase de fogueras não pode ser congelado repetidamente, se a dose experimental é menor, é recomendado dividir por dose única. A temperatura ambiente, após 3 h de configuração do líquido de trabalho, a atividade diminui em cerca de 10% e após 5 h, a atividade diminui em cerca de 25%.
2, Detecção de luminosidade química
(1) Tire a placa de cultura celular da caixa e incube a temperatura ambiente por 20 min para torná-la a temperatura ambiente (22 - 25 ° C).
(2) Adicionar a placa de cultivo com o volume do líquido de trabalho de fluorescenase de fogueiras e outros meios de cultivo, misturar.
(3) Incubação a temperatura ambiente 5 min.
NOTA: O tempo de incubação pode ser ajustado adequadamente com o tipo de célula e número de células.
(4) Leia os valores com um calibrador enzimático multifuncional ou um luminômetro químico (parâmetros do instrumento: tempo de medição de 10 s, intervalo de medição de 2 s).

Conservar a -80°C. O componente B recomenda o uso pré-estéril de água configurada para armazenamento de 2 mg/mL, o componente A e o componente B configurado para armazenamento, de acordo com o experimento.
Necessidade de pequenas partilhas. O líquido de trabalho de teste é recomendado para uso atual para evitar o congelamento repetido.

Antes do uso, centrifuge o produto instantaneamente para o fundo do tubo e faça uma experiência posterior.
2, o comprimento de onda forte zui da bioluminescência catalizada pela fluorescenase de fogo-luzes é de 560 nm.
Para evitar interferências entre os buracos, recomenda-se o uso de uma placa de buraco branca impermeável.

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