CTG-L™ Kit de teste de vitalidade celular 3D

Kits de teste de vitalidade celular 3D homogêneos prontos para uso são usados ​​para detectar quantitativamente o teor de ATP em células modelo 3D, enquanto o teor de ATP é proporcional ao número de células vivas. O reagente tem alta relação sinal-ruído, boa repetibilidade e boa estabilidade. A fórmula pronta para uso reduz as etapas experimentais de fissura e detecção, reduzindo ainda mais os erros devido à amostragem frequente, e seu sinal luminoso estável torna o produto especialmente adequado para detecção de proliferação celular de modelos 3D de alto fluxo e triagem de compostos.
Características do produto:
Alta estabilidade: meia-vida do sinal fluorescente > 3 horas.
Alta sensibilidade: pode detectar menos de 100 células / buraco em uma placa de 96 buracos.
Amplo alcance dinâmico: mantenha uma relação linear estável dentro de quatro níveis de quantidade de alcance dinâmico.
Passos experimentais convenientes: adição - mistura - teste "torna toda a etapa experimental mais simples e fácil de operar.
Adequado para a detecção de alto fluxo: a intensidade relativa da fluorescência mantém uma relação linear estável para satisfazer as necessidades de uma grande quantidade de experimentos de placas microporosas ao mesmo tempo.
Composição do produto:

Aplicável à detecção de atividade de fatores bioativos, triagem de medicamentos anti-tumorais em larga escala, proliferação celular, testes de citotoxicidade, etc.

1 Preparação das células:
(1) Construção de modelos celulares 3D: Construir modelos celulares 3D relevantes de acordo com as necessidades experimentais, por exemplo, modelos de esferas celulares 3D.
(2) Se o experimento for para determinar o papel do composto no modelo celular 3D, adicionar a concentração apropriada do composto a ser detectado ao orificio da placa celular. A concentração de solvente orgânico no líquido de cultura é mantida abaixo de 2%. Continue cultivando o tempo adequado de acordo com as necessidades experimentais.
Teste de vitalidade celular:
Retirar o CTG-LTMKit de teste de vitalidade celular 3D , equilibrar a temperatura ambiente (22 ° C-25 ° C) [Nota 2], agitar suavemente e misturar.
(2) Retire a placa de cultura celular a testar e equilibre a temperatura ambiente (22 ° C-25 ° C). O teste de vitalidade celular 3D deve ser realizado em uma placa branca e, se a placa de cultura celular a ser testada for transparente ou preta, o modelo 3D deve ser transferido para a placa branca.
(3) Adicionar 50 µL de reagente de teste de vitalidade celular 3D para 100 µL de células de modelo 3D de placa de 96 poços ou 10 µL de reagente para 20 µL de células de modelo 3D de placa de 384 poços .
(4) placa experimental de oscilação intensa por 5 minutos para separar completamente as células [Nota 4] e colocar no escuro para equilibrar a resposta por 25 minutos.
(5) Leitura do sinal fluorescente no leitor de placa de luminescência [Nota 5].

Depois do uso do reagente, deve ser dividido e armazenado a -20 ° C e abaixo para garantir a estabilidade do reagente. O reagente de teste de vitalidade celular 3D foi congelado repetidamente 5 vezes com uma redução da intensidade do sinal de < 10% e sem perda de função, colocado a temperatura ambiente (22 ° C) para 8 horas ou 4 ° C para 72 horas com uma redução da intensidade do sinal de < 10% e sem perda de função.
A resposta da fluorescenase no reagente de teste de vitalidade celular 3D é sensível às mudanças de temperatura. Os reagentes e placas experimentais precisam ser equilibrados até a temperatura ambiente (22 ° C-25 ° C), mantendo a temperatura do processo de teste constante (± 1 ° C).
Sem rigorosa verificação, não é recomendado alterar arbitrariamente a dose de reagente de reação. A relação de volume entre o meio de cultura celular e o reagente de teste deve ser de 2: 1.
É muito necessário que a placa experimental oscile fortemente para quebrar completamente as células, ao mesmo tempo em que deve prestar atenção ao não derramamento de líquido no buraco experimental.
5, o reagente de detecção de vitalidade celular 3D para os diferentes tipos de células, a velocidade de decadência do sinal do modelo 3D é diferente, a meia-vida do sinal é de 1,5 hora a 3 horas, o tempo de leitura da placa não é recomendado para exceder 1 hora a 2 horas.

Transporte de gelo seco. Armazenamento a -20 ° C e abaixo, com validade de 12 meses.