Células musculares esqueléticas de galinha

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Nome do produto:Células musculares esqueléticas de galinha

Fonte da organização:Tecido muscular esquelético

Especificações do produto:5×105 células/T25garrafa de cultura celular

Informação de cultivo:

Condições do pacotePLL（0,1 mg / ml）

O meio de cultura contémFBSAditivos de Crescimento,penicilina、estreptomicinaEsperem.

Frequência de troca por2-3Troca de líquido uma vez por dia

Características de crescimento

Morfologia celular Fibrocitotipo

Características transmissíveis2-3geração

Liquido digestivo0.25%

Condições de cultivo Fase gás: ar,95%；CO2，5%

Introdução das células:

Músculo esquelético de galinha separado do tecido muscular dos membros; Músculo esquelético também chamado de músculo transversal, um músculo que representa aproximadamente todo o peso corporal.40%As fibras do músculo esquelético são células polinucleares em forma de coluna longa, com a membrana base estreitamente ligada à parte externa da membrana muscular. O músculo transversal também inclui o músculo cardíaco e o músculo transversal interno, onde o músculo esquelético é distribuído principalmente nos membros. Cada músculo é um órgão com uma determinada forma, estrutura e função, com uma distribuição rica de vasos sanguíneos e linfáticos, que se contraem ou expandem sob o domínio dos nervos do corpo e realizam movimentos aleatórios. Os músculos podem ser nomeados de acordo com a forma comum, tamanho, posição, ponto de partida, direção e ação das fibras. Nomeados de acordo com a morfologia, como o músculo diagonal, o músculo diamante, o músculo triangular, o músculo em forma de pera, etc. As células do músculo esquelético são fibrosas, não ramificadas, com linhas transversais evidentes, com muitos núcleos e estão localizadas abaixo da membrana celular. Dentro das células musculares existem muitas fibras físicas de miogênio alinhadas em paralelo ao longo do eixo longo da célula. Cada fibra miogênica tem uma faixa clara (faixa I) e uma faixa escura (faixa I).Acinturão). A faixa clara é mais clara e a faixa escura é mais profunda. Há uma linha mais brilhante no meio da faixa escura.Hlinha.HNo centro da linha há umaMlinha. No meio, há uma linha mais escura chamadaZlinha. doisZO segmento entre as linhas é chamado de músculo. As células do músculo esquelético também são chamadas de células do músculo transversal, as células são fibrosas, não ramificadas, têm transversalidades óbvias, muitos núcleos, e estão localizados abaixo da membrana celular, as células são multifilamentares, com uma certa direção. Cultura de separação original de células do músculo esquelético3Dias depois, a parede celular visível se estende, a morfologia celular é de tamanho diferente, em forma de nave, irregular, triângulo ou setor, o óvulo nuclear é redondo e centrado;2Semana após a convergência celular, a maioria das células se estende em forma de barraco, o plasma é rico, tem protuberâncias ramificadas, as células estão alinhadas em paralelo em camadas únicas ou áreas parciais de crescimento de camadas múltiplas sobrepostas, altos e baixos; Quando a densidade celular é baixa, muitas vezes entrelaçada em uma rede; Quando a densidade é alta, é disposta em forma de vortex ou cerca. As células crescem mais rápido após a transmissão.4-6Os dias podem convergir e manter as características morfológicas e de crescimento acima.

Descrição do método:

O músculo esquelético de galinha isolado em laboratório da empresa foi preparado usando a digestão de colagenase misturada em combinação com o método de adesão diferencial, o número total de células é de aproximadamente5×10? células/garrafa.

Teste de qualidade:

Isolamento de músculo esquelético de galinha em laboratório da empresaActina sarcométricaIdentificação por imunofluorescência, pureza alcançável90%acima e não contémO HIV-1、HBV、VHC, brongênios, bactérias, leveduras e fungos, etc.

Passos de formação:

Células de recuperação: o tubo de congelamento que contém 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente em banho de água a 37 ° C para descongelar e adicionar 5 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos em 1000RPM, descartar o líquido superior e soprar bem depois de adicionar 4-6mL de meio. Em seguida, adicione toda a suspensão celular em uma garrafa para a cultura durante a noite (ou adicione a suspensão celular em um prato de 6 cm) e cultive durante a noite. No dia seguinte, troce o líquido e verifique a densidade celular.

Transmissão celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

a）、 Para as células adesivas, a transmissão pode ser feita através dos seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicione 1-2ml de líquido digestivo (0,25% Trypsin-0,53mM EDTA) em uma garrafa de cultura, coloque-a em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir 1-2min, em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar mais de 5ml de meio que contém soro de 10% para terminar a digestão.

3. Sopre suavemente as células, aspirar após a queda, centrifugar em condições de 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura depois de soprar bem.

Adicione a cultura em 5-6 ml / garrafa e divide a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em um novo prato ou garrafa com 5-6 ml de cultura.

b）、 Para células suspensas, a transmissão pode ser feita com referência aos seguintes métodos:

Método 1: coletar as células, centrifugar em 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido, adicionar 1-2ml de líquido de cultura e soprar bem, dividir a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8ml.

Método 2: pode escolher metade do método de troca de líquido, depois de descartar metade do meio de cultura, as células restantes são suspensas e a suspensão celular é dividida na proporção de 1: 2 a 1: 3 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8 ml.
Produtos que a empresa está vendendo:

Mioglobina de coelho(Mioglobina do coelho) Função: ELISA Especificações: Distribuição de importação

Química de células uninucleares de coelho-1 (coelho MCP-1) Função: ELISA Especificações: Distribuição de importação

Protease metálica de base de coelho-1 (coelho MMP-1) Função: ELISA Especificações: Distribuição de importação

Protease metálica de base de coelho-2 (coelho MMP-2) Função: ELISA Especificações: Distribuição de importação

RatoDNAMetal transferensa1 (DNMT1)Kit de Reação96T/48T

Kit de ELISA de vitamina D (VD) em ratosRato(VD)Kit de Reação

Encontre uma bindingglobin, shbgelist,Hormônio humano ligado à globulina(SHBG)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação

câncer de cólon humano-específico-2, CCSA-2Kit de antígeno específico do câncer do cólon humano2(CCSA-2)Especificações do kit:96T/48T

organizaçãoARG / ABL2Kit de quantificação de atividade de kinase(A/B/C) 20Seguinte

Piravataquinase humana，M2-PKELISAKitQuinase homônica humanaM2Tipo de isoenzima(M2-PK)Especificações do kit:96T/48T

PRELPAnticorpos proteicos

Fatores de reforço de células musculares2CAnticorpos

VP0Reconstrução do vírus intestinal humano71tipoVP0Proteína(Seu & GSTEtiquetasProteína

TLR4/CD284 (receptor semelhante ao pedágio 4) 0,5mgTLR4/CD284 (receptor semelhante ao pedágio 4) PedágioReceptores semelhantes4antígeno

CDK2Reorganizar pessoasCDK2 / p33ProteínaProteína

HS3ST1 Proteína humanaReorganizar pessoasHS3ST1Proteína

proteína TCN2 humanaReorganizar pessoasTCN2Proteína

TLR4/CD284 (receptor semelhante ao pedágio 4) 0,5mgTLR4/CD284 (receptor semelhante ao pedágio 4) PedágioReceptores semelhantes4antígeno

HS3ST1 Proteína humanaReorganizar pessoasHS3ST1Proteína

VP0Reconstrução do vírus intestinal humano71tipoVP0Proteína(Seu & GSTEtiquetasProteína

proteína TCN2 humanaReorganizar pessoasTCN2Proteína

CDK2Reorganizar pessoasCDK2 / p33ProteínaProteína

Células musculares esqueléticas de galinhaLigana de Rato(Laminina)Kit de teste, nome em inglês:Kit ELISA de laminina

Kit de ELISA associado ao fator químico 1 (AmAC-1) de ativação de macrófagos alternativos do ratoMacrófagos de ratos substituem a ativação de fatores químicos relacionados1(AmAC-1)Kit de Reação

MouseProteinFosfatase, PPELISAKitOvatase de Rato(PP)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação

CLIAKitforMarcador de câncer de ovário humano-CA125ELISAKitMarcadores de câncer de ovário humanoCA125

同位素核酸(PCR)Produtos)Kit de análise de pegada de interferência por metilação ligada a proteínas10Seguinte

ELISAKitGM-CSFEstimulador de colônia de macrófagos de ratos

Como as células recebidas são tratadas?

1, em primeiro lugar, observe se a garrafa de cultura celular está intacta, se o líquido de cultura tem vazamentos, fenômenos turbulentos e outros. Se sim, tire uma foto e entre em contato com o suporte técnico em tempo útil (as fotos tiradas servirão como base para o serviço de acompanhamento).

Limpe a superfície da garrafa de cultura celular com 75% de álcool e observe o estado celular sob o microscópio. Devido a problemas de transporte, algumas células adesivas cairão pequenas quantidades da parede da garrafa; Primeiro, não abra a tampa da cultura e coloque as células no recipiente de cultura celular por 2-4 horas para estabilizar o estado das células.

Leia cuidadosamente as instruções das células para entender as informações relacionadas com as células, como as propriedades da parede de adesão (adesão / suspensão), a morfologia celular, o meio de base usado, a proporção sérica, as citocinas necessárias, a proporção de transmissão, a frequência de troca de fluido, etc.

Após a conclusão da posição, retire a garrafa de cultura celular, faça uma inspeção espelhada, tire fotos e registre o estado celular (as fotos tiradas serão usadas como base de serviço de acompanhamento); Recomenda-se que após a cultura de transmissão celular, tire fotos regularmente e registre o estado de crescimento celular.

Células de parede: se a densidade de crescimento celular for superior a 80%, podem ser transmitidas normalmente; Se não exceder 80%, remova o meio da garrafa de cultura celular e reserve cerca de 5 ml para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão, a tampa da garrafa pode ser ligeiramente solta.

Células em suspensão: transferir todo o líquido dentro da garrafa de cultura celular para o tubo de centrifugação estéril de 50ml, centrifugação de 1200rpm em 5min, o meio de cultura superior pode ser recolhido após a centrifugação, a precipitação de células do fundo do tubo adiciona o meio de cultura de 5ml para soprar e ressuspender. Se a densidade celular for superior a 80%, a suspensão celular pode ser dividida em 2 garrafas de cultura celular e o meio de cultura adicional é de 5 ml; se a densidade celular não for superior a 80%, mova a suspensão celular para a garrafa original para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão.