Células endoteliais da artéria principal do suíno

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Nome do produto:Células endoteliais da artéria principal do suíno

Fonte da organização:Organização arterial principal

Especificações do produto:5×105 células/T25garrafa de cultura celular

Informação de cultivo:

Condições do pacotePLL（0,1 mg / mlgelatina (0.1%）

O meio de cultura contémFBSAditivos de Crescimento,penicilina、estreptomicinaEsperem.

Frequência de troca por2-3Troca de líquido uma vez por dia

Características de crescimento

Morfologia celular Endotelíaco

Características transmissíveis2-3geração

Liquido digestivo0.25%

Condições de cultivo Fase gás: ar,95%；CO2，5%

Introdução das células:

separação endotelial da artéria principal do suíno do tecido da artéria autônoma; A artéria principal é o tronco arterial da circulação corporal. Seu caminho é: a artéria superior começa no ventro esquerdo, para a direita.2As costas torácicas movem-se para o arco da artéria principal, para a esquerda4Movimento da margem inferior do tórax da artéria principal; No número12A ruptura da artéria principal altamente perfurada no corpo torácico move a artéria abdominal, acima a artéria torácica principal, para o segundo4As margens inferiores do corpo lombar são divididas em artéria angular esquerda e direita; A artéria total é dividida em artérias internas e externas. As células endoteliais da artéria arterial são células de camada única cobertas dentro da artéria arterial, que secretam uma série de substâncias ativas vasculares e mantêm o estágio sanguíneo, quando o estágio sanguíneo é perturbado por inflamação ou outros fatores, o que leva à ocorrência de algumas doenças cardiovasculares. Assim, as células endoteliais da artéria arterial se tornaram ferramentas para estudar os mecanismos de patologia das doenças cardiovasculares e para tratar medicamentos. As células endoteliais ou endoteliais vasculares são uma camada fina de células epiteliais especializadas, compostas por uma camada de células planas. Forma a parede interna dos vasos sanguíneos e é a interface entre o sangue dentro da cavidade vascular e outras paredes dos vasos sanguíneos (epitêlio escamoso de camada única). As células endoteliais estão ao longo de todo o sistema circulatório, do coração até os menores microvasos sanguíneos.

Descrição do método:

Adopção endotelial da artéria principal de suíno isolada em laboratório da empresa-O método de digestão combinada de colagenase combina o método de adesão diferencial e é preparado por meio de triagem de cultura de meios específicos de células endoteliais, o número total de células é de aproximadamente5×10? células/garrafa.

Teste de qualidade:

Endotelia da artéria principal de suíno isolada em laboratório da empresaCD31Identificação por imunofluorescência, pureza alcançável90%acima e não contémO HIV-1、HBV、VHC, brongênios, bactérias, leveduras e fungos, etc.

Passos de formação:

Células de recuperação: o tubo de congelamento que contém 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente em banho de água a 37 ° C para descongelar e adicionar 5 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos em 1000RPM, descartar o líquido superior e soprar bem depois de adicionar 4-6mL de meio. Em seguida, adicione toda a suspensão celular em uma garrafa para a cultura durante a noite (ou adicione a suspensão celular em um prato de 6 cm) e cultive durante a noite. No dia seguinte, troce o líquido e verifique a densidade celular.

Transmissão celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

a）、 Para as células adesivas, a transmissão pode ser feita através dos seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicione 1-2ml de líquido digestivo (0,25% Trypsin-0,53mM EDTA) em uma garrafa de cultura, coloque-a em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir 1-2min, em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar mais de 5ml de meio que contém soro de 10% para terminar a digestão.

3. Sopre suavemente as células, aspirar após a queda, centrifugar em condições de 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura depois de soprar bem.

Adicione a cultura em 5-6 ml / garrafa e divide a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em um novo prato ou garrafa com 5-6 ml de cultura.

b）、 Para células suspensas, a transmissão pode ser feita com referência aos seguintes métodos:

Método 1: coletar as células, centrifugar em 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido, adicionar 1-2ml de líquido de cultura e soprar bem, dividir a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8ml.

Método 2: pode escolher metade do método de troca de líquido, depois de descartar metade do meio de cultura, as células restantes são suspensas e a suspensão celular é dividida na proporção de 1: 2 a 1: 3 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8 ml.

Como as células recebidas são tratadas?

1, em primeiro lugar, observe se a garrafa de cultura celular está intacta, se o líquido de cultura tem vazamentos, fenômenos turbulentos e outros. Se sim, tire uma foto e entre em contato com o suporte técnico em tempo útil (as fotos tiradas servirão como base para o serviço de acompanhamento).

Limpe a superfície da garrafa de cultura celular com 75% de álcool e observe o estado celular sob o microscópio. Devido a problemas de transporte, algumas células adesivas cairão pequenas quantidades da parede da garrafa; Primeiro, não abra a tampa da cultura e coloque as células no recipiente de cultura celular por 2-4 horas para estabilizar o estado das células.

Leia cuidadosamente as instruções das células para entender as informações relacionadas com as células, como as propriedades da parede de adesão (adesão / suspensão), a morfologia celular, o meio de base usado, a proporção sérica, as citocinas necessárias, a proporção de transmissão, a frequência de troca de fluido, etc.

Após a conclusão da posição, retire a garrafa de cultura celular, faça uma inspeção espelhada, tire fotos e registre o estado celular (as fotos tiradas serão usadas como base de serviço de acompanhamento); Recomenda-se que após a cultura de transmissão celular, tire fotos regularmente e registre o estado de crescimento celular.

Células de parede: se a densidade de crescimento celular for superior a 80%, podem ser transmitidas normalmente; Se não exceder 80%, remova o meio da garrafa de cultura celular e reserve cerca de 5 ml para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão, a tampa da garrafa pode ser ligeiramente solta.

Células em suspensão: transferir todo o líquido dentro da garrafa de cultura celular para o tubo de centrifugação estéril de 50ml, centrifugação de 1200rpm em 5min, o meio de cultura superior pode ser recolhido após a centrifugação, a precipitação de células do fundo do tubo adiciona o meio de cultura de 5ml para soprar e ressuspender. Se a densidade celular for superior a 80%, a suspensão celular pode ser dividida em 2 garrafas de cultura celular e o meio de cultura adicional é de 5 ml; se a densidade celular não for superior a 80%, mova a suspensão celular para a garrafa original para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão.

Produtos que a empresa está vendendo:

Rato(CH)Kit de Reação 96T/48T

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Químoproteína de células mononucleares de ratos4 (MCP-4/CCL13)Kit de Reação 96T/48T

Químoproteína de células mononucleares de ratos3 (MCP-3/CCL7)Kit de Reação 96T/48T

Fatores neuronutricionais de origem da linha de células gliais do ratoELISA (GDNF)Kit de Reação96T/48T

Kit de ELISA de proteína oligomérica de milho (COMP) cailage humanaProteína de oligomateria da cartilagem humana(COMP)Kit de Reação

Produtos de proteína de oxidação avançada humana, AOPPELISAKitProdutos de proteína de oxidação tardia humana(AOPP)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação

HumanAi-Complexo1qaibody, C1qKit de anticomplementos humanos1qAnticorpos(C1q)Especificações do kit:96T/48T

Kit de separação de mitocondrias ativas vegetais10Seguinte

Humanosα1βglicoproteína,α1β- Sim, senhor.Pessoa α1Beta-glicoproteína(α1βGP)Especificações do kit:96T/48T

PerCP-Cy5,5MarcadorCD9Anticorpos monoclonais

Ativação de moléculas induzidasCD69Anticorpos

CXCL 12Reorganizar pessoasCXCL12 / SDF1bProteína(Fc)EtiquetasProteína

Globina cerebral(NGB)Proteína recombinanteNeuroglobina recombinante (NGB)

ADPRHReorganizar pessoasADPRH / ARH1ProteínaProteína

Proteína EGF HumanaReorganizar pessoasEGF / Fator de Crescimento EpidérmicoProteína

Proteína HA H7N9Reconstrução da gripe AH7N9 (A/Anhui/1/2013)A hemoglobina(Hemaglutinina / HA)Proteína

Globina cerebral(NGB)Proteína recombinanteNeuroglobina recombinante (NGB)

Proteína EGF HumanaReorganizar pessoasEGF / Fator de Crescimento EpidérmicoProteína

CXCL 12Reorganizar pessoasCXCL12 / SDF1bProteína(Fc)EtiquetasProteína

Proteína HA H7N9Reconstrução da gripe AH7N9 (A/Anhui/1/2013)A hemoglobina(Hemaglutinina / HA)Proteína

ADPRHReorganizar pessoasADPRH / ARH1ProteínaProteína

Células endoteliais da artéria principal do suínoProteína de Camada de Rato(LN)Kit de teste, nome em inglês:Kit ELISA LN

Kit de ELISA do fator estimulante da colônia de macrófagos do rato (M-CSF)Factores estimulantes da colônia de macrófagos de ratos(M-CSF)Kit de Reação

MouseThioredoxina, xELISAKitProteína de oxidação de enxofre do rato(x)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação

CLIAKitforHumanP27proteinELISAKitPessoasP27Proteína

Método isótopoDNAKit híbrido sul5Seguinte

ELISAKitLptn/LTN/XCL1 (em inglês)Químico de linfocitos de rato