Células-tronco epitonicas da medula óssea suína

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Nome do produto:Células-tronco epitonicas da medula óssea suína

Fonte da organização:Medula óssea

Especificações do produto:5×105 células/T25garrafa de cultura celular

Informação de cultivo:

O meio de cultura contémFBSAditivos de Crescimento,penicilina、estreptomicinaEsperem.

Frequência de troca por2-3Troca de líquido uma vez por dia

Características de crescimento

Morfologia celular Fibrocitotipo

Características transmissíveis5geração em torno;3Excelente estado em substituição

Liquido digestivo0.25%

Condições de cultivo Fase gás: ar,95%；CO2，5%

Introdução das células:

Secação entre medula óssea suína（BMSCseparação da medula óssea; A medula óssea é o tecido hematológico do corpo, localizado dentro de muitos ossos do corpo. Os animais adultos têm duas espécies de medula óssea: medula vermelha e medula amarela. A medula vermelha produz glóbulos vermelhos, plaquetas e vários glóbulos brancos. As plaquetas têm efeito antihemorrágico, os glóbulos brancos podem matar e inibir vários patógenos, incluindo bactérias, vírus, etc.; Alguns linfocitos podem produzir anticorpos. Portanto, a medula óssea não é apenas um órgão hematogênico, mas também um órgão imunológico importante. A medula óssea é um tecido em forma de esponja que se encontra na retina entre a cavidade da medula óssea dos ossos longos (por exemplo, os ossos do tronco e do quadril) e os ossos lisos dos ossos planos (por exemplo, os ossos do tronco), que produzem células sanguíneas com medula óssea ligeiramente vermelha, chamada medula vermelha. Ao nascer, a medula vermelha preenche toda a cavidade da medula óssea do corpo, com a idade, as células de gordura aumentam, uma parte considerável da medula vermelha é substituída pela medula amarela e, finalmente, quase apenas a medula óssea plana tem medula vermelha. A célula-tronco medula óssea intercopial presente no sistema de matriz da medula óssea é uma célula-tronco com alta capacidade de auto-renovação e potencial de diferenciação multidirecional, além das células-tronco hematopoiéticas, que podem diferenciar-se em vários tecidos como osso, cartilagem, tecido muscular, pele, gordura, nervos e assim por diante, podem servir como sementes de engenharia de tecidos. na medula óssea,BMSCO número total de células nucleares da medula óssea0.001%-0.1%O conteúdo é muito baixo. As condições de cultivo in vitro das células-tronco metabólicas da medula óssea são altamente exigentes, durante o processo de cultivo, o tempo de adesão à parede, a densidade de cultivo, o teor sérico, a temperatura de cultivo e o meio de cultivoO pHefeito de condições como o valor.

Descrição do método:

A separação de laboratório da empresa entre a medula óssea suína seca com lavagem da medula óssea, centrifugação de gradiente de densidade, método de adesão diferencial em combinação com a triagem do meio de cultura, o número total de células é de aproximadamente5×10? células/garrafa.

Teste de qualidade:

Menstruação seca de qualidade entre medula óssea suína separada em laboratório da empresaCD90Identificação por imunofluorescência, pureza alcançável90%acima e não contémO HIV-1、HBV、VHC, brongênios, bactérias, leveduras e fungos, etc.

Passos de formação:

Células de recuperação: o tubo de congelamento que contém 1 ml de suspensão celular é agitado rapidamente em banho de água a 37 ° C para descongelar e adicionar 5 ml de meio de cultura para misturar uniformemente. Centrifugar durante 5 minutos em 1000RPM, descartar o líquido superior e soprar bem depois de adicionar 4-6mL de meio. Em seguida, adicione toda a suspensão celular em uma garrafa para a cultura durante a noite (ou adicione a suspensão celular em um prato de 6 cm) e cultive durante a noite. No dia seguinte, troce o líquido e verifique a densidade celular.

Transmissão celular: se a densidade celular chegar a 80% -90%, a cultura de transmissão pode ser realizada.

a）、 Para as células adesivas, a transmissão pode ser feita através dos seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicione 1-2ml de líquido digestivo (0,25% Trypsin-0,53mM EDTA) em uma garrafa de cultura, coloque-a em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir 1-2min, em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura depois de adicionar mais de 5ml de meio que contém soro de 10% para terminar a digestão.

3. Sopre suavemente as células, aspirar após a queda, centrifugar em condições de 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura depois de soprar bem.

Adicione a cultura em 5-6 ml / garrafa e divide a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em um novo prato ou garrafa com 5-6 ml de cultura.

b）、 Para células suspensas, a transmissão pode ser feita com referência aos seguintes métodos:

Método 1: coletar as células, centrifugar em 1000RPM por 8-10 minutos, descartar o líquido, adicionar 1-2ml de líquido de cultura e soprar bem, dividir a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 a 1: 5 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8ml.

Método 2: pode escolher metade do método de troca de líquido, depois de descartar metade do meio de cultura, as células restantes são suspensas e a suspensão celular é dividida na proporção de 1: 2 a 1: 3 em um novo prato ou garrafa com meio de cultura de 8 ml.

Como as células recebidas são tratadas?

1, em primeiro lugar, observe se a garrafa de cultura celular está intacta, se o líquido de cultura tem vazamentos, fenômenos turbulentos e outros. Se sim, tire uma foto e entre em contato com o suporte técnico em tempo útil (as fotos tiradas servirão como base para o serviço de acompanhamento).

Limpe a superfície da garrafa de cultura celular com 75% de álcool e observe o estado celular sob o microscópio. Devido a problemas de transporte, algumas células adesivas cairão pequenas quantidades da parede da garrafa; Primeiro, não abra a tampa da cultura e coloque as células no recipiente de cultura celular por 2-4 horas para estabilizar o estado das células.

Leia cuidadosamente as instruções das células para entender as informações relacionadas com as células, como as propriedades da parede de adesão (adesão / suspensão), a morfologia celular, o meio de base usado, a proporção sérica, as citocinas necessárias, a proporção de transmissão, a frequência de troca de fluido, etc.

Após a conclusão da posição, retire a garrafa de cultura celular, faça uma inspeção espelhada, tire fotos e registre o estado celular (as fotos tiradas serão usadas como base de serviço de acompanhamento); Recomenda-se que após a cultura de transmissão celular, tire fotos regularmente e registre o estado de crescimento celular.

Células de parede: se a densidade de crescimento celular for superior a 80%, podem ser transmitidas normalmente; Se não exceder 80%, remova o meio da garrafa de cultura celular e reserve cerca de 5 ml para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão, a tampa da garrafa pode ser ligeiramente solta.

Células em suspensão: transferir todo o líquido dentro da garrafa de cultura celular para o tubo de centrifugação estéril de 50ml, centrifugação de 1200rpm em 5min, o meio de cultura superior pode ser recolhido após a centrifugação, a precipitação de células do fundo do tubo adiciona o meio de cultura de 5ml para soprar e ressuspender. Se a densidade celular for superior a 80%, a suspensão celular pode ser dividida em 2 garrafas de cultura celular e o meio de cultura adicional é de 5 ml; se a densidade celular não for superior a 80%, mova a suspensão celular para a garrafa original para continuar a cultura até que a densidade celular chegue a cerca de 80% para a operação de transmissão.

Produtos que a empresa está vendendo:

Principais complexos de compatibilidade de tecidos de porcos(MHC / gpla) elisay A Elisa. 96T/48T

Sintese endotelial de porco(eNOS) ELISAKit A Elisa. 96T/48T

Péptidos relacionados ao gene de calcinidade em porcoElisação (CGRP) A Elisa. 96T/48T

Complexo anti-fibrolase de fibrolase de porco(Pap) Elisay A Elisa. 96T/48T

Monoamina oxidase do ratoA(MAOA)Kit de Reação96T/48T

Kit de ELISA de peptidoglicano humano (PG)Açúcar péptido humano(PG)Kit de Reação

Glicogenofosforilase humana MM, GP-MMELISAKitSugerênio humano0Isoenzimas da acidaseMM(GP-MM)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação

Bactericida humano/permeabilidade na proteína crescente, BPIKit de Reação Bactericida Humana/Aumenta a permeabilidade das proteínas(BPI)Especificações do kit:96T/48T

Kit de quantificação de coloração de amido de cadeia ramificada de plantas20Seguinte

HumaGF-beta-induzível leaarlyresponsegene-1, TIEG1ELISAKitPessoasTGFBeta induz os primeiros genes1(TIEG1)Especificações do kit:96T/48T

ORC5LAnticorpos proteicos

O melanoma prioriza a expressão de anticorpos antigénicos

EPHB1Reestruturação do Macaco-CaranguejoEphB1 / EPHT2Proteína(Fc)EtiquetasProteína

Receptor de insulina-alfa (ISR-alfa 0,5mgReceptor de insulina-alfa (ISR-alfa)Receptores de insulina-α(antígeno)

do HTRA2Reorganizar pessoasHTRA2 / OMIProteínaProteína

FKBP14 Proteína humanaReorganizar pessoasFKBP14Proteína

Mouse Proteína FIGFReorganizar ratosVEGF-D / VEGFD / FIGFProteína(Fc)Etiquetas)

Receptor de insulina-alfa (ISR-alfa 0,5mgReceptor de insulina-alfa (ISR-alfa)Receptores de insulina-α(antígeno)

FKBP14 Proteína humanaReorganizar pessoasFKBP14Proteína

EPHB1Reestruturação do Macaco-CaranguejoEphB1 / EPHT2Proteína(Fc)EtiquetasProteína

Mouse Proteína FIGFReorganizar ratosVEGF-D / VEGFD / FIGFProteína(Fc)Etiquetas)

do HTRA2Reorganizar pessoasHTRA2 / OMIProteínaProteína

Células-tronco epitonicas da medula óssea suínaProteína de choque térmico hipersensível em ratos70 (HSP-70)Kit de teste, nome em inglês:Kit de ELISA HSP-70

Kit de ELISA de cadherina E do rato / cadherina epitelial (E-Cad)RatoEProteína adesiva de cálcio/Proteína adesiva de cálcio epitelial(E-Cad)Kit de Reação

ELISARatoO C-péptidos(péptido C do rato) Distribuição de importação

Cliakildl-icelisatraçãoComplexo imunológico de lipoproteínas de baixa densidade em ratos

Tipo geralKSHV (Kaposisarcoma-herpesvírus associado)Kit de Qualidade Viral20Seguinte

Elisakinottam- 1Moléculas de adesão intercelular solúveis em macacos1