Kit de teste de atividade de inibidores de esterase de butanilbile*

Instruções do kit de teste de atividade de inibidores de esterase de butanilbile*

Espectrofotomia visível

Número da mercadoria:BC5980

Especificações:50T/48S

Composição do produto: verifique cuidadosamente se o volume do reagente é consistente com o volume dentro da garrafa antes de usar, por favor, entre em contato com a equipe da Solebar em tempo útil.

Formulação da solução:

1. Reagente 1: tomar um reagente 1 antes da administração, adicionar1,8 mlÁgua destilada, totalmente dissolvida, reagentes inexhaustíveis-20℃Pode ser guardado após a separação4Semana, evite o congelamento repetido (o reagente é um reagente de liofilização, pode haver diferentes doses de observação de olho nu entre garrafas com grandes diferenças ou até pequenas quantidades, este fenômeno não afeta o uso, a mesma qualidade real).

Reagente 4: adição de 17 ml de reagente 2 antes da administração, totalmente dissolvido, reagente inextituído-20℃Salvação partilhable4Semana, evite congelamento repetido.

Reagente V: 10 mmol / L de solução clara de Levens. Antes da administração, tome 15 μL de 10 mmol / L de solução de levans, adicionando 985μLÁgua destilada, preparada0.15Solução clara de mmol/L de Levance, atualmente disponível (este reagente é usado para experimentos de tubo positivo, escolhido).

Descrição do produto:

Butirilcolinesterase (Butyrylcholinesterase)BchE，EC3.1.1.8A bile esterase plasmática, também conhecida como bile esterase falsa, é uma hidrolise de ácido silético que entra na corrente sanguínea após sua síntese pelo fígado e está presente em quase todos os tecidos animais. Acetilbile esterase (AchE(Em comparação,BchEPode hidrolizar eficazmente os grandes ésteres de bile *, como o butanilbile * e o benzetilbile *, e pode remover os efeitos tóxicos de agentes neurotóxicos como pesticidas de fosfororgânicos e pesticidas de aminometatos. Alguns estudos mostram,BchEpode ser um alvo importante para o tratamento da doença de Alzheimer,BchEOs inibidores são usados ​​para melhorar sintomas como perda de memória e disfunção cognitiva em pacientes com doença de Alzheimer.

BchE cataliza bile butanil * hidrolítica para a produção de bile *, bile * é gerada pela ação do ácido benzônico di-sulfodinitro (DTNB)5-Base-ácido nitrobenzônicoTNB），BchEinibidores através da inibiçãoBchEAtividade que reduz a hidrolítise de butanilbile *.TNBEm412nmpico de absorção, que pode ser medido412nmAlterações na absorção local, a atividade do inibidor BchE é calculada.

Nota: Antes do experimento é recomendado selecionar 2-3 amostras com grandes diferenças esperadas para pré-experimento.

Instrumentos e equipamentos necessários:

Espectrofotômetro visível, balança, forno, triturador/triturador/amortiguador,30-50Filho ocular, máquina de limpeza por ultra-som, centrífuga, panela de banho/caixa de cultivo termostática,1mlVasos de vidro, pistolas de pipeta ajustáveis, gelo e água destilada.

Passos operacionais: Veja o documento "Perfil do produto" para detalhes específicos

Atenção:

Para garantir a precisão e a estabilidade dos resultados experimentais, controle rigorosamente o tempo de resposta e o tempo de operação.

Absorção da amostra A’_{Determinação}Mais de 1,5 ouΔA_{Determinação}AproximaçãoΔA_EspaçoRecomenda-se aumentar a proporção de amostras de tecido durante as etapas de processamento da amostra ou combinar a amostra de pó em uma solução de maior concentração para medição. quandoΔA_{Determinação}Quando inferior a 0,01, a amostra pode ser diluída com extração.

Para comparar o grau de inibição da BchE de diferentes reagentes, extratos, medicamentos ou tecidos, a combinação de reagentes, extratos, medicamentos ou homogêmeros de tecidos deve ser comparada para a mesma concentração.

Exemplos experimentais:

1. Pegue uma amostra de casca de fruta de 0,1005g (secado) e adicione1mlExtração de líquido para extração por ultra-som, centrifugação após a remoção, operação de acordo com as etapas de medição, com1mlCálculo de medição de vaso de vidro:ΔA_Espaço=（A»_{Espaço 1}- A_{Espaço 1}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Determinação}=（A»_{Determinação}- A_{Determinação}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（1.117-0.485）-（0.166-0.112）=0.578Calcular a taxa de supressão:

Taxa de inibição do inibidor BchE (%）=（1.113-0.578）÷1.113×100%=48.068%。

2. Pegue uma amostra de casca de tomate de 0,1014g (secado) e adicione1mlExtração de líquido por ultra-som, extração por centrifugação e diluição16Depois de seguir as etapas de medição,1mlCálculo de medição de vaso de vidro:ΔA_Espaço=（A»_{Espaço 1}- A_{Espaço 1}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Determinação}=（A»_{Determinação}- A_{Determinação}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（0.706-0.149）-（0.166-0.112）=0.503Calcular a taxa de supressão:

Taxa de inibição do inibidor BchE (%）=（1.113-0.503）÷1.113×100%=54.807%。

3. Tome 50 μL de solução clara de 0,15 mmol / L de Levens e siga as etapas de medição, com1mlCálculo de medição de vaso de vidro:ΔA_Espaço=（A»_{Espaço 1}- A_{Espaço 1}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA_{Determinação}=（A»_{Determinação}- A_{Determinação}）-（A»_{Espaço 2}- A_{Espaço 2}）=（0.838-0.171）-（0.166-0.112）=0.613Calcular a taxa de supressão:

Taxa de inibição do inibidor BchE (%）=（1.113-0.613）÷1.113×100%=44.924%。

Referências:

[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. Uma nova e rápida determinação colorimétrica da atividade da acetilcolinesterase [J]. Farmacologia Bioquímica, 1961, 7(2): 88-95.

[2] Noor Atatreh, Sara Al Rawashdah, Shaikha S Al Neyadi. Descoberta de novos inibidores da butirilcolinesterase através de triagem virtual baseada em estrutura [J]. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2019, 34(1): 1373-1379.

[3] Li Q, Chen Y, Xing S. et al. Inibidores altamente potentes e seletivos da butirilcolinesterase para melhoria cognitiva e neuroproteção [J]. Journal of Medicinal Chemistry, 2021, 64(10): 6856-6876.

Série de produtos relacionados:

BC0840/BC0845 Carboxilatase (CarEKit de teste de atividade

Kit de teste de atividade de acetil-bile-esterase (AchE) BC2020/BC2025

BC2130/BC2135 Fosfatase ácida em tecidos e sangueACPKit de teste de atividade

BC2140/BC2145 Fosfatase alcalina em tecidos e sangueAKP/ALPKit de teste de atividade

BC5970/BC5975 Kit de teste de atividade de Butil-Bil-Esterase (BchE)

Kit de teste de atividade de inibidores de esterase de butanilbile*