E14 Mídio específico para células

Operação estéril:A cultura celular deve ser realizada em um ambiente estéril, antes do uso, a mesa de trabalho ultra-limpa deve ser esterilizada por radiação ultravioleta e a caixa de cultura deve ser limpa regularmente. Os experimentadores precisam trocar roupas de trabalho, sapatos, máscaras e luvas.

Esterilização do equipamento:Os utensílios de vidro, utensílios metálicos, etc. podem ser esterilizados a vapor de alta pressão, enquanto os produtos plásticos preferem a esterilização com epóxido de etano ou a compra de produtos esterilizados.

Escolha do Reagente:O líquido de cultura, soro, tampão e outros reagentes usados ​​devem ser estériles e sem poluição, e devem ser testados estériles antes de serem usados. As diferentes células têm diferentes requisitos para a composição do líquido de cultura, o líquido de cultura adequado deve ser selecionado de acordo com o tipo de célula.

Condições de cultivo:A maioria das células de mamíferos é adequada para a temperatura de cultivo de 37 ° C, o desvio deve ser controlado em ± 0,5 ° C. As salas de cultura devem ser bem seladas, verificar regularmente a concentração e o fluxo de gás, e a cultura celular geralmente requer 5% de CO2 para manter o pH do líquido de cultura estável. A umidade no recinto deve ser mantida em torno de 95%.

‌Observação diária:A morfologia celular, o estado de crescimento e as mudanças de cor do líquido de cultura são observados diariamente sob o microscópio.

Testes regulares:As células são testadas regularmente para poluição por brancos, bactérias e fungos.

E14Mídios de cultura específicos para células

Introdução do produto

E14Base de cultura celularEquipe cuidadosamente otimizado, após testes de longo prazo, este produto pode manterExcelente crescimento das células E14.

Este produto já está incluído Os vários ingredientes necessários para o crescimento das células E14 podem ser usados ​​diretamente para a cultura de células E14, sem a necessidade de adicionar qualquer ingrediente.

Principais ingredientes do produto

DMEM Base 405mL

Soro de vaca de pneu especial 75 mL

Transporte e conservação

Transporte: Transporte a baixa temperatura em caixas isolantes contendo sacos de gelo biológico

Método de conservação: 2 ° C a 8 ° C, protegido da luz, conservar por 2 meses; ׏

Atenção apenas para uso científico.

Alguns componentes do sistema de cultura são substâncias perigosas para a saúde humana, por favor, não toque com a pele exposta o líquido do sistema de cultura e o interior do recipiente com resíduos líquidos do sistema de cultura; Esta parte da substância perigosa é baixa em concentração e perigosidade, se houver contato, pode ser lavado imediatamente com água da torneira.

Recuperação

1) Pré-aquecer a água da panela de banho de água termostática a 37 ° C;

2) Preparar um tubo centrífugo de 15 ml, adicionar 5 ml de meio contendo 10% FBS, colocar em uma panela de banho de água de 37 ° C pré-aquecido;

3) Coloque óculos de proteção, depois de uma luva de fio grosso, retire as células para recuperação do tanque de nitrogênio líquido e mude-as para uma panela de banho de água térmica de 37 ° C o mais rápido possível

Reescaldamento agitação tubo de congelamento para aumentar a taxa de reescaldamento;

4) Inhale as células do tubo de congelamento derretido em um tubo de centrifugação pré-preparado e, depois de misturar, centrifuge em 1000rpm em 5min;

5) Preparar uma garrafa de cultura T-25, escrever o nome da célula, a data e adicionar o meio de cultura de 4 ml;

6) Depois de terminar a centrifugação, descartar a limpeza superior, ressuspender as células com 1 ml de meio de cultura, transferir para a cultura de células T-25, misturar e transferir para

Estacionamento de cultivo em uma caixa de cultivo de CO2.

Transmissão (sugestão de transmissão celular I-II)

1) Quando a convergência celular atinge mais de 85%, a transmissão pode ser realizada.

2) dentro do gabinete de segurança biológica, abra a boca da garrafa de cultura e colete o meio de cultura dentro da garrafa;

3) Depois de adicionar 3 ml de 1 x PBS estéril à garrafa de cultura, coloque a garrafa de cultura horizontalmente para que o PBS possa penetrar em toda a área do fundo da garrafa de cultura e absorver o PBS;

4) Adicionar 1 ml de líquido digestivo para a garrafa, incubar 1 ~ 2 min após a infiltração no fundo no recipiente de CO2 de 37 ℃;

5) Observe se as células se arredondam e flutuam sob o microscópio invertido após a incubação, e se tudo for digerido, adicione 2 ml de meio de cultura contendo 10% de FBS diretamente para a garrafa e inale a suspensão em um tubo centrífugo de 15 ml;

① Preparar um tubo centrífugo estéril de 15 ml e adicionar 2 ml de meio que contém 10% de FBS;

② Inhalar as células digeridas no tubo centrífugo de ① para neutralizar (evitar soprar ②②②); Adicione 1 ml para a garrafa de cultura antes de digerir para continuar a digerir por cerca de 2 min, tocar a garrafa de cultura e cerca de 95% das células removidas.

6) 1000rpm centrífuga 5min;

7) Prepare duas novas garrafas de cultura T-25, cada uma com o meio de cultura de 4 ml.

8) Depois de terminar a centrifugação, descarte a limpeza, resuspenda as células centrifugadas com meio de cultura de 2 ml e transfira as células resuspendidas para 2 garrafas de cultura T-25, cada garrafa de cultura de 1 ml;

9) Coloque a garrafa de cultura horizontalmente, depois de misturar a agitação, coloque a garrafa de cultura em 37 ° C e coloque a cultura em um recipiente de CO2 de 5%.

Congelação (congelamento celular recomendado para congelar um T25 por garrafa)

1)~6) Faça referência aos passos de transmissão

7) Depois de terminar a centrifugação, descarte a limpeza, resuspenda as células com 1 ml de líquido congelado e, em seguida, transfira para um tubo de congelamento de 1,8 ml;

8) Transferir o tubo de congelamento para a caixa de resfriamento do programa cheia de isopropanol e, em seguida, transferir para o refrigerador de -80 ° C para resfriar durante a noite;

9) No dia seguinte, retire o tubo de congelamento da caixa de refrigeração sequencial concluída e coloque-o no tanque de nitrogênio líquido o mais rápido possível para conservar.

Proteína reguladora de tromboses de suínoELISA (TM)Kit de Reação

Kit de ELISA de miosina humana (miosina)Musculoglobulina humana(Miosina)Kit de Reação

Coelhoprotrombinfragme1+2, F1+2ELISAKitFragmento do CoelhoF1+2(F1+2)Divisão de caixas

CLIAKitforAi-TMAnticorpos de partículas tiroides(TM)Anticorpos)

血小板因子4(Factor PlaquetaIV)Kit de quantificação de fluorescência ativa20Seguinte

Molécula de adesão celular de porco 2, ICAM-2ELISAKitMoléculas de adesão entre células suínas2(ICAM-2/CD102)Kit de Reação

Sintase de glutamina de rato(GLUL)Kit de teste, nome em inglês:Kit ELISA GLUL

Kit de ELISA de ierleucina de coelho 8 (IL-8/CXCL8)coelho branco8(IL-8/CXCL8)Kit de Reação

E. coli(O157:H7)Kit de ácido nucleico(PCR)Método de sonda fluorescente) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(Macrofago HumanoProteína Inflamatória1Beta)ELISAkitProteína macrófaga humana1β

Vírus Cossack líquidoB(Coxsackievirus B)QuantificaçãoPCRAmpliação Kit20Seguinte

Elisatração 5-htcães5Serotonina

Lipoproteína suínaB（Apo-B) Kit Montagem/original

Lipoproteína suínaA1(apo-A1)Kit Montagem/original

Gravidez de porco (PROG) Kit Montagem/original

Hormônio suíno (P) Kit Montagem/original

5-Receptores de trifosfatosterol1Anticorpos

PeriódicoD2Anticorpos

O IL1R2Reorganizar ratosIL1R2 / IL1RB / CD121bProteína(SeuEtiquetasProteína

GRP94 (gp96) 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProteína reguladora do açúcar(antígeno)

O ANP32AReorganizar pessoasANP32A / PHAP1Proteína(Seu & GSTEtiquetasProteína

Proteína BLOC1S2 HumanaReorganizar pessoasBLOC1S2 / BLOS2Proteína(GST)Etiquetas)

Rato Proteína PGLYRP1Reorganizar ratosPGLYRP1 / PGRP-SProteína(Seudo

E14Mídios de cultura específicos para célulasGRP94 (gp96) 0.5mgGRP94 (gp96) 94kDaProteína reguladora do açúcar(antígeno)

Proteína BLOC1S2 HumanaReorganizar pessoasBLOC1S2 / BLOS2Proteína(GST)Etiquetas)

O IL1R2Reorganizar ratosIL1R2 / IL1RB / CD121bProteína(SeuEtiquetasProteína

Rato Proteína PGLYRP1Reorganizar ratosPGLYRP1 / PGRP-SProteína(SeuEtiquetas)

O ANP32AReorganizar pessoasANP32A / PHAP1Proteína(Seu & GSTEtiquetasProteína