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No. 52 da estrada Chengbou, distrito de Jiading, Xangai
Shanghai Valley Research Indústria Co., Ltd.
No. 52 da estrada Chengbou, distrito de Jiading, Xangai

Nome do produto: Fibrocitos embrionários de peixe zebra pac2
Categoria de Produto: Outras Linhas Celulares
Características de crescimento: Crescimento de parede
Sistema de cultura: L15 + 10% FBS sem cultura de CO2, 28 ° ou 21 ° cultura
Morfologia celular: fibroblasto
Condições de congelamento: sem líquido de congelamento de células séricas
Especificações: garrafa de cultura 1 x 10 ^ 6cells / T25
Número do produto: GOY-01X1912
A base de fibroblastos embrionários de peixe zebra pac2 foi cuidadosamente otimizada pela equipe e, após testes a longo prazo, este produto pode manter um excelente estado de crescimento de macrófagos pulmonares originais de ratos.
Este produto já contém vários ingredientes necessários para o crescimento de macrófagos pulmonares originais de ratos e pode ser usado diretamente para o cultivo de macrófagos pulmonares originais de ratos sem a adição de ingredientes.
Atenção
Apenas para uso científico.
Alguns componentes do sistema de cultura são substâncias perigosas para a saúde humana, por favor, não toque com a pele exposta o líquido do sistema de cultura e o interior do recipiente com resíduos líquidos do sistema de cultura; Esta parte da substância perigosa é baixa em concentração e perigosidade, se houver contato, pode ser lavado imediatamente com água da torneira.


| Instrumentos | Reagentes | Consumíveis |
| Centrífugas | Soro fetal bovino (FBS) | Tubos centrífugos (15ml, 50ml) |
| Gabinete de Biosegurança | Estéril 1 x PBS pH = 7,2 | garrafa de cultura celular T-25 |
| Pipeta elétrica | 0.25%+0.02%EDTA | Tubos estériles de uso único (2ml, 5ml, 10ml) |
| Caxa de cultivo de CO2 | Médio de cultura (incluindo soro) | Tubo de congelamento de 1,8 ml |
| Microscópio invertido | Liquido congelado: 90% FBS + 10% DMSO | Caixa de refrigeração do programa |

Recuperação
1) Pré-aquecer a água da panela de banho de água termostática a 37 ° C;
2) Preparar um tubo centrífugo de 15 ml, adicionar 5 ml de meio contendo 10% FBS, colocar em uma panela de banho de água de 37 ° C pré-aquecido;
3) Coloque óculos de proteção, depois de uma luva de fio grosso, retire as células para recuperação do tanque de nitrogênio líquido e mude-as para uma panela de banho de água térmica de 37 ° C o mais rápido possível
Reescaldamento agitação tubo de congelamento para aumentar a taxa de reescaldamento;
4) Inhale as células do tubo de congelamento derretido em um tubo de centrifugação pré-preparado e, depois de misturar, centrifuge em 1000rpm em 5min;
5) Preparar uma garrafa de cultura T-25, escrever o nome da célula, a data e adicionar o meio de cultura de 4 ml;
6) Depois de terminar a centrifugação, descartar a limpeza superior, ressuspender as células com 1 ml de meio de cultura, transferir para a cultura de células T-25, misturar e transferir para
Estacionamento de cultivo em uma caixa de cultivo de CO2.
Transmissão (sugestão de transmissão celular I-II)
1) Quando a convergência celular atinge mais de 85%, a transmissão pode ser realizada.
2) dentro do gabinete de segurança biológica, abra a boca da garrafa de cultura e colete o meio de cultura dentro da garrafa;
3) Depois de adicionar 3 ml de 1 x PBS estéril à garrafa de cultura, coloque a garrafa de cultura horizontalmente para que o PBS possa penetrar em toda a área do fundo da garrafa de cultura e absorver o PBS;
4) Adicionar 1 ml de líquido digestivo para a garrafa, incubar 1 ~ 2 min após a infiltração no fundo no recipiente de CO2 de 37 ℃;
5) Observe se as células se arredondam e flutuam sob o microscópio invertido após a incubação, e se tudo for digerido, adicione 2 ml de meio de cultura contendo 10% de FBS diretamente para a garrafa e inale a suspensão em um tubo centrífugo de 15 ml;
① Preparar um tubo centrífugo estéril de 15 ml e adicionar 2 ml de meio que contém 10% de FBS;
② Inhalar as células digeridas no tubo centrífugo de ① para neutralizar (evitar soprar ②②②); Adicione 1 ml para a garrafa de cultura antes de digerir para continuar a digerir por cerca de 2 min, tocar a garrafa de cultura e cerca de 95% das células removidas.
6) 1000rpm centrífuga 5min;
7) Prepare duas novas garrafas de cultura T-25, cada uma com o meio de cultura de 4 ml.
8) Depois de terminar a centrifugação, descarte a limpeza, resuspenda as células centrifugadas com meio de cultura de 2 ml e transfira as células resuspendidas para 2 garrafas de cultura T-25, cada garrafa de cultura de 1 ml;
9) Coloque a garrafa de cultura horizontalmente, depois de misturar a agitação, coloque a garrafa de cultura em 37 ° C e coloque a cultura em um recipiente de CO2 de 5%.

Congelação (congelamento celular recomendado para congelar um T25 por garrafa)
1)~6) Faça referência aos passos de transmissão
7) Depois de terminar a centrifugação, descarte a limpeza, resuspenda as células com 1 ml de líquido congelado e, em seguida, transfira para um tubo de congelamento de 1,8 ml;
8) Transferir o tubo de congelamento para a caixa de resfriamento do programa cheia de isopropanol e, em seguida, transferir para o refrigerador de -80 ° C para resfriar durante a noite;
9) No dia seguinte, retire o tubo de congelamento da caixa de refrigeração sequencial concluída e coloque-o no tanque de nitrogênio líquido o mais rápido possível para conservar.

Receptores de produtos finais de glicosilação tardia(Idade)Proteína recombinanteReceptor específico do produto final de glicosilação avançada recombinante (AGER)
EPCAM Proteína HumanaReorganizar pessoasEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Proteína
NRP1Reorganizar pessoasNeuropilina-1 / NRP1Proteína(Fc)EtiquetasProteína
Proteína HA H1N1Reconstrução da gripe AH1N1 (A/WSN/1933)A hemoglobinaHA1 (Hemaglutinina)Proteína
FazerReorganizar pessoasLALBA / Alfa-lactalbuminaProteína(Fc)EtiquetasProteína
Estimulador de colônia de macrófagos de ratos(GMCSF/CSF2)Kit de Reação Nome em Inglês:Kit de ELISA GMCSF/CSF2
Kit de ELISA de fator aocrínico de queratinócitos de rato (KAF) / Kit de ELISA de anfiregulina (AR)Fatores endócrinos de células corneais de ratos(KAF)Kit de Reação/Proteína dupla(AR)Kit de Reação
Proteínas morfogenéticas do rato, BMPsELISAKitProteína de formação óssea do rato(BMP)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação
CLIAKit para paxilina humana, PaxELISAKitProteína humana
isótopos[γ32P]ATPKit de amplificação de microsatélite marcado por kinase20Seguinte
ELISAKitPIAb-IgG/IgMRato0Anticorpos de lipidmiciolIgG / IgM
Kit de transenzimas de ratos Kit de transenzimas de ratos Especificações:96T/48T Kit de Transase de Rato, Especificação Modelo:96T/48TFonte: Kit de Reação (Fragmentação de Importação), Alias do Produto: Kit de Reação de Transfase de Rato, Transfase de RatoeisaKit de Reação Condições de conservação:2-8℃ Período de validade:6Um mês.
Kit de transferase à base de rato Kit de transferase à base de rato Especificações:96T/48T Kit de transferase baseado em ratos, especificações:96T/48TFonte: Kit de reagentes (parcela de importação), alias do produto: Kit de reagentes de transferase à base de rato, transferase à base de ratoeisaKit de Reação Condições de conservação:2-8℃ Período de validade:6Um mês.
Kit de fator de crescimento epidérmico do rato Kit de fator de crescimento epidérmico do rato Especificações:96T/48T Kit de fator de crescimento epidérmico de ratos, especificação modelo:96T/48TFonte: Kit de reagentes (distribuição de importação), alias do produto: Kit de fator de crescimento epidermálico de ratos, fator de crescimento epidermálico de ratoseisaKit de Reação Condições de conservação:2-8℃ Período de validade:6Um mês.
Kit de bactéria rodovial do rato Kit de bactéria rodovial do rato Especificações:96T/48T Kit de bactéria Rodobacterium do rato, especificações do modelo:96T/48TFonte: Kit de reagentes (distribuição de importação), alias do produto: Kit de reagentes de bactéria de barra de rato, bactéria de barra de ratoeisaKit de Reação Condições de conservação:2-8℃ Período de validade:6Um mês.
Quinase de açúcar do ratoELISA (HK)Kit de Reação96T/48T
Kit de ELISA de sorbitol desidrogenase humana (SDH)Deshidrogenase humana(SDH)Kit de Reação
Proteína de ligação do DNA humano, DBPELISAKitPessoasDNALigação à proteína(DBP)Kit de Reação96T/48TDistribuição de importação
HumanAi-glucoproteína 210, GP210Kit de glicoproteína antinuclear humana210Anticorpos(gp210)Especificações do kit:96T/48T
Hidroxiase vegetal(lisilhidroxilase)Kit de quantificação de comparação de coloração ativa20Seguinte
HumanVitaminaA,VaelisatraçãoPessoasA(VA)Especificações do kit:96T/48T
PAnticorpos substanciais
Conectar moléculas de adesão2Anticorpos
Fibrocitos embrionários de peixe zebra pac2NRP1Reorganizar pessoasNeuropilina-1 / NRP1Proteína(Fc)EtiquetasProteína
Receptores de produtos finais de glicosilação tardia(Idade)Proteína recombinanteReceptor específico do produto final de glicosilação avançada recombinante (AGER)
FazerReorganizar pessoasLALBA / Alfa-lactalbuminaProteína(Fc)EtiquetasProteína
EPCAM Proteína HumanaReorganizar pessoasEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Proteína
Proteína HA H1N1Reconstrução da gripe AH1N1 (A/WSN/1933)A hemoglobinaHA1 (Hemaglutinina)Proteína

Operação estéril:A cultura celular deve ser realizada em um ambiente estéril, antes do uso, a mesa de trabalho ultra-limpa deve ser esterilizada por radiação ultravioleta e a caixa de cultura deve ser limpa regularmente. Os experimentadores precisam trocar roupas de trabalho, sapatos, máscaras e luvas.
Esterilização do equipamento:Os utensílios de vidro, utensílios metálicos, etc. podem ser esterilizados a vapor de alta pressão, enquanto os produtos plásticos preferem a esterilização com epóxido de etano ou a compra de produtos esterilizados.
Escolha do Reagente:O líquido de cultura, soro, tampão e outros reagentes usados devem ser estériles e sem poluição, e devem ser testados estériles antes de serem usados. As diferentes células têm diferentes requisitos para a composição do líquido de cultura, o líquido de cultura adequado deve ser selecionado de acordo com o tipo de célula.
Condições de cultivo:A maioria das células de mamíferos é adequada para a temperatura de cultivo de 37 ° C, o desvio deve ser controlado em ± 0,5 ° C. As salas de cultura devem ser bem seladas, verificar regularmente a concentração e o fluxo de gás, e a cultura celular geralmente requer 5% de CO2 para manter o pH do líquido de cultura estável. A umidade no recinto deve ser mantida em torno de 95%.
Observação diária:A morfologia celular, o estado de crescimento e as mudanças de cor do líquido de cultura são observados diariamente sob o microscópio.
Testes regulares:As células são testadas regularmente para poluição por brancos, bactérias e fungos.