Kit de teste de proliferação celular MTS

Kit de teste de proliferação celular MTSO MTS Cell Proliferation Assay Kit é um kit comum de teste de proliferação celular e toxicidade. O MTS é um novo tipo de sal tetrazol que pode ser reduzido pela deshidrogenase de ácido âmbar nas mitocôndrias de células vivas para formar um produto dissolvido em água. O molybdenum tem absorção específica a 490 nm, por isso a proliferação celular pode ser refletida através da medição da absorção a 490 nm. Quanto mais rápido as células se multiplicam, maior é o valor de absorção de luz.
Em comparação com o kit de MTT comum, este kit não precisa remover o meio de cultura original, nem o uso de solventes adicionais para dissolver o molybdenum, o uso é mais conveniente, ao mesmo tempo que pode evitar erros experimentais causados ​​pela remoção de parte do molybdenum ao remover o meio de cultura. Este kit é muito flexível e pode continuar a incubar após o teste para obter melhores resultados de coloração. Além disso, este kit também tem vantagens como ampla gama linear, alta sensibilidade e segurança de uso.
Composição do produto:

Operação experimental:
Preparação do líquido de trabalho MTS:
A mistura de MTS Solution e PMS Solution em uma proporção de 20:1 é um líquido de trabalho MTS. O líquido de trabalho MTS preparado para armazenamento deve ser colocado em -20 ° C para conservar a luz, recomenda-se a distribuição adequada para evitar o congelamento repetido.
Observação: Tanto a Solução MTS quanto a Solução PMS podem ser facilmente decompostas à luz, por isso é necessário evitar a luz durante a formulação e o uso (pode ser embalado em papel de lata). Para uso frequente e conservação a 4°C, o líquido de trabalho MTS deve ser preparado antes de cada teste. Os líquidos de trabalho MTS não utilizados preparados devem ser mantidos a -20°C para proteção contra a luz.
2 – Cultura celular:
As células são inoculadas em recipientes adequados, como placas perfuradas. Para placas de 96 poços, recomenda-se a adição de 100uL de meio por poço, enquanto recomenda-se a vacinação de 5-100 x 10 por poço3Uma célula. As células do grupo experimental podem ser tratadas com o medicamento de interesse por um período de tempo, de acordo com o projeto experimental, quando é necessário criar um grupo em branco (com apenas o meio de cultura) e um grupo de controle (com o meio de cultura, as células e o solvente do medicamento).
Nota: o número específico de células por poço pode ser ajustado de acordo com o tipo específico de células.
Incubação MTS:
Adicione 20 uL de líquido de trabalho MTS a cada poço e, em seguida, coloque-o em uma incubação celular para incubar 1-4 h.
Nota: O tempo de incubação MTS pode ser ajustado de acordo com experimentos específicos.
4, teste:
Determine a absorção (A) com um calibrador enzimático a 490 nm. Se não houver um filtro de 490 nm, você pode optar por um filtro de 450-540 nm.
5 – Análise de dados:
A fórmula de cálculo da taxa de sobrevivência celular é a seguinte:
Taxa de sobrevivência celular (%) = [(A)Grupo Experimental- AGrupo em branco) / (AGrupo de controle- AGrupo em branco)] ×100

Quando as células são cultivadas por um longo tempo, os orifícios da borda da placa de 96 buracos são propensos a problemas de evaporação líquida. Recomenda-se descartar um círculo ao redor da placa de 96 buracos e adicionar água estéril, meio de cultura ou PBS; A placa de 96 buracos também pode ser colocada perto da fonte de água.
2, MTS Solution e PMS Solutin serão coagulados a baixa temperatura, antes do uso, por favor, retorne a temperatura ambiente ou banho de água de 37 ° C por cerca de 10 minutos até que o wan seja totalmente derretido após o uso.
A solução MTS e PMS são sensíveis à luz e, se mantidas a 4 ° C, a cor da solução pode mudar ligeiramente, o que pode aumentar o valor de absorção de luz no fundo, mas não afeta o resultado final do experimento.
Se não puder ser detectado a tempo, pode ser adicionado 25 uL de 10% SDS por poço após o final da incubação da etapa 3. As placas perfuradas após o tratamento com SDS podem ser colocadas
Mantenha-se a salvo da luz no cultivo por mais de 18 h.
Para sua segurança e saúde, por favor, use roupas experimentais e luvas descartáveis.

Guarde o kit a -20 ° C longe da luz e da umidade, estável por 1 ano. Para uso frequente, o kit pode ser armazenado a 4°C longe da luz e da umidade, estável por 6 semanas.