Tecnologia de medição de peso molecular LC-MS

Tecnologia de medição de peso molecular LC-MSDetalhes do serviço técnico de inspeção

Na pesquisa em ciências da vida e no desenvolvimento biomédico, a medição precisa do peso molecular é fundamental para a identificação estrutural, o controle de qualidade e o desenvolvimento de medicamentos. Seja para confirmar a integridade da expressão de proteínas ou para verificar a pureza de pequenas moléculas sintéticas, a informação de peso molecular é um dos dados de bùkěhuòquē. Entre muitas técnicas de medição de peso molecular, a técnica de combinação cromatografia líquida-espectroscopia de massa (LC-MS) é amplamente usada para medição de peso molecular de dànbáizhì, segmentos peptídicos, medicamentos de pequenas moléculas e até mesmo metabólicos devido à sua alta sensibilidade, ampla aplicabilidade e capacidade de análise estrutural.

Visão geral dos princípios técnicos do LC-MS

O LC-MS é um sistema combinado de cromatografia líquida (LC) e espectrometria de massa (MS):

• Seção LC: separar os diferentes componentes da amostra pela cromatografia para reduzir a interferência da matriz e melhorar a especificidade da detecção.

• Parte MS: Detecção da relação de carga de massa iônica (m/z) através de ionização e analisador de massa para obter informações sobre o peso molecular de cada componente.

Os métodos comuns de ionização incluem:

• ESI (Electrospray Ionization): adequado para analisar compostos polares, como dànbáizhì, polipéptidos, nucleótidos, etc.

• APCI (Ionização Química Atmosférica): adequado para pequenas moléculas voláteis.

• MALDI (Desabsorção de Ionização por Laser Auxiliar na Matriz): comumente usado para varredura rápida de peso molecular em dànbáizhì.

Na PT Biotechnology, utilizamos principalmente espectroscopia de massa de pulverização elétrica de alta resolução (HR-ESI-MS) com sistemas cromatográficos otimizados para medir o peso molecular jīngquè de produtos biológicos de pequenas moléculas a poliméricos.

Vantagens do LC-MS na medição do peso molecular

Alta sensibilidade e alta precisão coexistem

Os sistemas LC-MS podem detectar objetos alvo em concentrações baixas até pmol (pmol) ou inferiores, com erros de massa geralmente controlados em < 5 ppm, especialmente adequados para análise de peso molecular de componentes de traços em amostras complexas.

Compatibilidade qiángdà com amostras complexas

Em comparação com métodos tradicionais como SDS-PAGE ou absorção ultravioleta, o LC-MS é praticamente livre de impurezas da amostra e pode ser usado diretamente em sistemas complexos como litos celulares, soros e soros de fermentação.

3) Informações estruturais

Além do peso molecular, a MS fornece pistas estruturais como distribuição de isótopos, informações sobre fragmentos, modificações pós-traduzidas (por exemplo, fosforilação, glicosilação), com uma vantagem natural na confirmação da estrutura molecular.

Aplicações típicas para medição de peso molecular LC-MS

1, verificação do peso molecular de dànbáizhì

Durante a expressão e purificação da proteína recombinante, a confirmação da integridade da proteína alvo (por exemplo, abreviação da extremidade N, ausência da extremidade C, péptido de sinalização não cortado) é um link de QC convencional. O peso molecular jīngquè medido por LC-MS permite determinar rapidamente se a proteína corresponde ao peso molecular teórico e identificar pequenas modificações.

Pureza e identificação de medicamentos de pequenas moléculas

LC-MS é um dos métodos shǒuxuǎn para a confirmação da estrutura após a síntese de moléculas farmacêuticas. Determine se o peso molecular do pico principal é consistente com a estrutura alvo através da obtenção de picos de plasma [M+H]+, [M+Na]+, enquanto monitora a presença de subprodutos sintéticos ou produtos de degradação.

Controle de qualidade da síntese de polipéptidos

Os polipéptidos sintéticos são propensos a falhas na extensão da cadeia ou à ausência de resíduos. O LC-MS avalia de forma eficiente a integridade das sequências de polipéptidos, aumentando a taxa de sucesso da síntese e a confiabilidade dos ensaios posteriores.

Marcação de moléculas metabólicas e lipídicas

Na metabómica, LC-MS não é apenas usado para quantificar, mas também para tarefas de triagem inicial de peso molecular de metabólitos característicos ou substâncias diferenciais, fornecendo a base para análises estruturais posteriores, como MS / MS.

Comparação com outras técnicas de medição de peso molecular

Conclusão: Cada método tem seu cenário de aplicação e o LC-MS, com sua precisão, aplicabilidade e capacidade de análise estrutural, está gradualmente se tornando o principal solução de medição de peso molecular na bioanálise moderna.

Benefícios do serviço de medição de peso molecular LC-MS

Na Biotec, desenvolvemos sistemas de análise LC-MS baseados em plataformas gāoduān como Thermo Orbitrap e Bruker QTOF, com processos exclusivos de pré-processamento de amostras e análise de dados com as seguintes vantagens principais:

• Capacidade de detecção de parada única de pequenas moléculas para dànbáizhí.

• Entrega em 3-5 dias úteis, adaptado a vários tipos de amostra.

• Suporta serviços de extensão como análise de modificações pós-tradução e reconhecimento de isômeros.

• Fornecer dados brutos + relatórios zhuānyè para facilitar o arquivo e publicação do projeto.

À medida que a investigação biológica se aprofunda e o desenvolvimento de medicamentos se acelera, a precisão e a profundidade da informação na medição do peso molecular são cada vez mais valorizadas. O LC-MS está usando sua capacidade analítica qiángdà para ajudar os cientistas a passar de "ter" para "quase", de "quantidade" para "qualidade". Se você estiver realizando uma validação de dànbáizhì, validação de pequenas moléculas ou controle de qualidade de peptídeos, entre em contato com a PT Biotech e forneceremos um forte suporte de dados para o seu projeto de pesquisa com a plataforma tecnológica LC-MS de zhuānyè.

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Projetos de Biotecnologia da Betypake

Sequência de proteínas

Usando o novo espectrômetro de massa Obitrap Fusion Lumos da Thermo e o sistema de sequência de degradação Edman da Shimazu para analisar sequências de dànbáizhì, a Biotechnolojia da PT fornece serviços de análise de sequência de proteínas baseadas em espectro de massa, incluindo análise de composição de aminoácidos de dànbáizhì, análise de Nduāncèxù, Cduāncèxù e sequência completa, bem como análise de sequências do extremo N de dànbáizhì baseada em degradação Edman. Para a dànbáizhì com sequências teóricas desconhecidas, oferece-se um serviço de sequenciamento a partir do zero baseado no método de sequenciamento a partir do zero para a análise da sequência da proteína.

* Vantagens do serviço:

Adota o Obitrap Fusion Lumos, o instrumento de espectroscopia de massa mais avançado do mundo;

Cobertura de 100% da sequência de proteína alvo determinada;

Determinação de até 70 sequências de aminoácidos na extremidade N da proteína;

As amostras podem ser determinadas em várias formas: solução de proteína, faixa de proteína PVDF;

Baixa dose de amostra: a amostra de proteína só precisa de 5-10ug para completar o teste;

A sequência não é afetada por modificações da extremidade N, como fechamento da extremidade N, PEC e glicosilação.

II. Organização de dànbáizhì

A Plataforma de Espectroscopia de Massa Orbitrap Fusion Lumos da Thermo Fisher combinada com a Nano-LC oferece uma variedade de serviços de análise de dànbáizhì, incluindo dànbáizhì quantitativa, dànbáizhì direcionada, polipéptida e proteômica modificada após tradução. Além disso, a PT Biotech lançou um novo serviço de dànbáizhì 4D baseado no timsTOF Pro, que facilita pesquisas em proteômica de amostras em microescala, medicina de grandes amostras e modificação de alta potência.

* Vantagens do serviço:

1 . Análise quantitativa de proteínas de alto fluxo: análise experimental em larga escala em grupos de controle múltiplos para a descoberta de novos biomarcadores;

2. vários métodos de marcação de dànbáizhì in vivo e in vitro, aplicáveis ​​à análise de tecidos, células, sangue e outras amostras;

Alta sensibilidade à análise espectrôlica de massa e alta repetição dos resultados experimentais;

4. pode detectar proteínas de baixa abundância, ampla gama linear;

5.zhuānyè análise bioinformática, análise mais sistemática e precisa.

Análise técnica de fluxo de espectro de massa de célula única

A biotecnologia da Betypake utiliza o sistema de fluxo de espectroscopia de massa Fluidigm para a análise técnica de fluxo de espectroscopia de massa de célula única, marcando a superfície da célula e as moléculas internas com marcadores de elementos metálicos (geralmente anticorpos específicos marcados com elementos metálicos), em seguida, separando as células individuais com o princípio da célula de fluxo, analisando o espectro de massa atômico de células individuais com espectroscopia de massa de plasma acoplado por indução (ICP-MS), e depois convertendo os dados do espectro de massa atômico em expressão molecular de sinal na superfície da célula e no interior.

* Vantagens do serviço:

Tecnologia avançada para preencher lacunas tecnológicas

A tecnologia de anticorpos marcados por metais evita os problemas de que os canais de fluorescência de fluxo tradicionais são poucos e fáceis de interagir. Com a capacidade de caracterizar vários indicadores simultaneamente a nível de uma única célula, a biotecnologia da Peptide pode detectar simultaneamente 51 proteínas alvo.

Grande quantidade de análise e baixo custo

O RNAseq de célula única é limitado por fatores como o custo, o número de células agregadas de todas as amostras é geralmente de cerca de 2x10 ^ 4, enquanto a tecnologia de espectroscopia de massa de fluxo pode analisar pelo menos 10 ^ 5 células de uma só vez (amostra única), alcançando um aumento quantitativo e o custo não é maior do que o RNAseq de célula única.

Grandes perspectivas de aplicação

Os resultados da espectroscopia de massa de fluxo podem dar mudanças na subpopulação celular, com grandes perspectivas de pesquisa no diagnóstico clínico e no estudo do mecanismo da doença;

Combinar a tecnologia de etiquetagem metálica com outras tecnologias terá uma nova direção de aplicação. Além das proteínas convencionais, a tecnologia celular de fluxo de massa também pode ser usada para modificação pós-tradução de proteínas;

É possível detectar a taxa de sobrevivência celular, tamanho celular, expressão de transcritor de mRNA, taxa de síntese de DNA e atividade de protease.

Análise imunopoliptídeomica com base em espectro de massa de alta precisão e descoberta de novos antígenos

A solução única para análise imunopoliptídeomica baseada em espectroscopia de massa de alta precisão e descoberta de novos antígenos da Biotec inclui nossa solução patenteada e altamente sensível de enriquecimento e identificação de imunópeptidos. Podemos ajudá-lo a identificar e identificar mais de 10.000 polipéptidos tipo I e mais de 10.000 polipéptidos tipo II. A análise imunopeptidómica é realizada através da nossa plataforma de análise imunopoliptídeomica de alto fluxo otimizada para identificação e quantificação repetida a partir de materiais de amostras pequenas do zuì. O serviço pode ser aplicado a pesquisas em larga escala para ajudar os pesquisadores a encontrar soluções para câncer, doenças imunológicas e doenças infecciosas e explorar alvos desconhecidos.

V. Caracterização Biofarmacêutica

Baseado em tecnologia de espectroscopia de massa de alta resolução, MALDI TOF， Tecnologia de separação cromatográfica de alta eficiência que oferece uma gama de soluções de análise de biofarmacêuticos de wánshàn, desde a composição de aminoácidos e análise estrutural de nível 1 de produtos biológicos como dànbáizhì, péptidos, anticorpos e vacinas até a análise de variabilidade e pureza do produto. O objetivo é fornecer serviços de análise de biomedicamentos de alta qualidade para ajudar os fabricantes de biomedicamentos a melhorar a qualidade dos biomedicamentos.

As sete principais plataformas de teste da biotecnologia

BioTecnologia da PTP - Caracterização de produtos biológicos, prestador de serviços de alta qualidade de espectrometria de biomassa

A Beijing Baitepike Biotechnology Co., Ltd. é dedicada a fornecer serviços de zhuānyè como testes de controle de qualidade e validação de projetos para as indústrias de dispositivos biológicos / farmacêuticos e médicos. Os laboratórios da empresa seguem as regulamentações e os princípios orientadores da NMPA, ICH, FDA e EMA, passaram pela certificação do sistema de qualidade duplo CNAS / ISO9001, estabeleceram um sistema de qualidade completo, backup de dados a frio e a calor / fora do local, medição regular do equipamento / verificação durante, rastreamento de auditoria de software, fornecendo soluções integradas e serviços técnicos para os clientes, apoiando o desenvolvimento de novos medicamentos, registro de declaração de medicamentos e lançamento de produção.

A empresa adota o sistema de controle de qualidade ISO9001, zhuānyè fornece serviços de análise de teste CRO baseados em espectro de massa;

Reconhecido pelo laboratório nacional CNAS para fornecer aos clientes serviços de pesquisa de qualidade de medicamentos em conformidade com as regulamentações farmacêuticas globais;

3. O âmbito de atividade abrange a dànbáizhí ómica, polipéptida ómica, metabólica, caracterização biofarmacêutica, análise de célula única, fluxo de espectro de massa de célula única, análise de nuvem de vida e análise de integração de espectro de matéria de vários grupos de estudantes, etc.

Sete plataformas de teste de controle de qualidade para atender às suas necessidades de serviço de parada única;

Serviço 3000 + empresas, escolha de 10000 + clientes;

Dedicado a fornecer-lhe serviços de análise de espectroscopia de biomassa de alta qualidade!

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