O que é a análise de peso molecular LC-MS? Objeto aplicável

O que é a análise de peso molecular LC-MS? Objeto aplicávelMétodo e seus serviços técnicos de teste de comparação de vantagens e desvantagens

O peso molecular é um dos parâmetros físico-químicos essenciais da biomolécula zuì. Em muitas áreas das ciências da vida, como a engenharia de dànbáizhí, o desenvolvimento de medicamentos anticorpos, a validação de compostos sintéticos e a análise metabómica, a obtenção precisa de informações sobre o peso molecular não é apenas uma premissa para a análise estrutural, mas também a base para o controle de qualidade e a pesquisa funcional. A cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC-MS), como ferramenta de análise de diferentes componentes de peso molecular em amostras complexas altamente sensíveis, de alto fluxo e paráveis, está se tornando cada vez mais a escolha dominante nos campos da pesquisa científica e biofarmacêutica.

O que é a análise de peso molecular LC-MS?

A análise de peso molecular LC-MS é usada em combinação com a separação cromatográfica líquida e espectroscopia de massa para a separação, detecção e determinação da massa molecular relativa das moléculas alvo em amostras complexas. Especificamente:

• A cromatografia líquida (LC) é usada para separar os componentes de uma amostra de acordo com suas propriedades fisioquímicas.

• Espectroscopia de massa (MS) ioniza cada componente de separação e mede sua relação de carga de massa (m / z), o que repele seu peso molecular jīngquè.

Em comparação com os métodos tradicionais de detecção ultravioleta ou eletróforese em gel, o LC-MS não depende de corantes específicos ou produtos padrão e permite a caracterização jīngzhǔn de estruturas desconhecidas ou amostras em traços.

Análise de peso molecular LC-MS

O LC-MS pode ser aplicado a moléculas orgânicas ou biomecromoléculas com quase todas as massas moleculares na faixa de 100 Da a algumas centenas de kDa, com as seguintes aplicações comuns:

Proteína recombinante e anticorpos

• Verifique se o peso molecular do produto expresso é correto.

• Verifique se as modificações pós-tradução (por exemplo, glicosilação, acetilação, etc.) ocorrem.

• Monitorar isômeros, produtos de degradação ou agregados.

Sintetizar pequenas moléculas ou compostos

• Confirmar a integridade da síntese da estrutura molecular.

• Detectar resíduos de subprodutos ou intermediários.

• Análise qualitativa/semi-quantitativa.

Medicamentos polipéptidos e ácidos nucleicos

• Moléculas polipéptidas com menos de 10 kDa são adequadas para confirmação rápida do peso molecular usando ESI-MS ou MALDI-MS.

• Os oligonucleótidos anti-senso, siRNA, etc. também podem ser detectados por LC-MS jīngzhǔn para sua integridade e estado de modificação.

4, Metabólica e lipo zhìzǔxué

• Medição de alto fluxo de milhares de moléculas de metabólitos / lipídios.

• Fornece informações moleculares precisas para a identificação de compostos e análise funcional.

Métodos comuns para análise de peso molecular LC-MS

Diferentes fins analíticos e tipos de amostras podem ter diferentes processos LC-MS. Aqui estão algumas das estratégias atuais:

Dessalinação + análise ESI-MS (para proteínas, péptidos)

• Frequentemente combinado com desalinização on-line ou off-line (por exemplo, pré-tratamento de amostras C4/C18).

• Ionização por pulverização elétrica (ESI) é adequada para as propriedades de grandes moléculas com múltiplas cargas elétricas.

• Usando um algoritmo de desconvolução de software para obter um único peso molecular de proteína.

Vantagens: alta sensibilidade, análise de peso molecular jīngque.

Limitações: é sensível à concentração de sal e é necessário otimizar o tampão da amostra.

Análise de varredura completa LC-MS (para misturas complexas)

• Separação de componentes com sistema de fase líquida de lavagem gradiente.

• Combine espectrômetros de massa de alta resolução como TOF, Orbitrap ou Q-Exactive.

• Adequado para rastrear picos de características de peso molecular em contextos complexos.

Vantagens: alto fluxo, adequado para análise de amostras desconhecidas.

Limitação: A correspondência do banco de dados é necessária e a análise demora um pouco mais.

Análise de peso molecular MALDI-TOF (para pequenas moléculas e péptidos)

• Detecção direta de amostras com Desabsorção Assistida a Laser (MALDI).

• Adequado para confirmação de peso molecular rápida e de alto fluxo.

Vantagens: rápida análise e alta resistência à sal da amostra.

Limitações: Não é adequado para proteínas poliméricas, eficiência de ionização inegual afeta a quantificação.

Análise de Peso Molecular LC-MS vs. Outros Métodos de Detecção de Peso Molecular

Aqui está uma visão geral comparativa dos métodos comuns de detecção de peso molecular com LC-MS:

Como pode ser visto, o LC-MS não é adequado para todos os cenários, mas tem as vantagens do bùkětìdài na confirmação de peso molecular jīngquè, análise de amostras complexas, análise de alta resolução, etc.

5. Como a Biotec realiza o serviço de análise de massa molecular LC-MS?

Na Biotec, integramos a plataforma de espectroscopia de massa Orbitrap de alta resolução (Q-Exactive HF-X, Exploris 480, etc.) com vários processos de pré-processamento de amostras para fornecer serviços de análise de peso molecular altamente sensíveis, rápidos e personalizados para clientes de pesquisa e empresas biomédicas:

• Suporta vários tipos de amostras como proteínas, polipéptidos, pequenas moléculas sintéticas e oligonucleótidos.

• Oferece suporte ao processo completo, como dessalinização de amostras, substituição de tampões e processamento de dados de desconvolução.

• Fornecer relatórios padronizados, incluindo gráficos TIC, espectrogramas m/z, resultados de deconvolção e muito mais.

• Pode ligar a proteína N-terminal/C duāncèxù, análise de modificação de glicosilação e outros serviços de ligação.

Estamos empenhados em fornecer aos nossos clientes dados espectrônicos de massa que não são apenas “úteis”, mas também “úteis”, ajudando a sua pesquisa e desenvolvimento de produtos a avançar de forma mais eficiente.

A análise de peso molecular LC-MS tornou-se uma ferramenta precisa, eficiente e escalável em pesquisas e aplicações industriais atuais em ciências da vida. Seu desempenho em vários tipos moleculares e em contextos de amostras complexas ultrapassa os limites dos métodos tradicionais. Seja para validação científica ou controle de qualidade no desenvolvimento de novos medicamentos, o LC-MS é uma garantia essencial para aumentar a confiabilidade dos dados e a eficiência experimental. Se você está procurando zhuānyè, serviço de análise de massa molecular de alto fluxo, entre em contato com a BiotechnologyPT, nós acompanharemos sua pesquisa com uma plataforma técnica de alta qualidade e capacidade de interpretação de dados.

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Projetos de Biotecnologia da Betypake

Sequência de proteínas

Usando o novo espectrômetro de massa Obitrap Fusion Lumos da Thermo e o sistema de sequência de degradação Edman da Shimazu para analisar sequências de dànbáizhì, a Biotechnolojia da PT fornece serviços de análise de sequência de proteínas baseadas em espectro de massa, incluindo análise de composição de aminoácidos de dànbáizhì, análise de Nduāncèxù, Cduāncèxù e sequência completa, bem como análise de sequências do extremo N de dànbáizhì baseada em degradação Edman. Para a dànbáizhì com sequências teóricas desconhecidas, oferece-se um serviço de sequenciamento a partir do zero baseado no método de sequenciamento a partir do zero para a análise da sequência da proteína.

* Vantagens do serviço:

Adota o Obitrap Fusion Lumos, o instrumento de espectroscopia de massa mais avançado do mundo;

Cobertura de 100% da sequência de proteína alvo determinada;

Determinação de até 70 sequências de aminoácidos na extremidade N da proteína;

As amostras podem ser determinadas em várias formas: solução de proteína, faixa de proteína PVDF;

Baixa dose de amostra: a amostra de proteína só precisa de 5-10ug para completar o teste;

A sequência não é afetada por modificações da extremidade N, como fechamento da extremidade N, PEC e glicosilação.

II. Organização de dànbáizhì

A Plataforma de Espectroscopia de Massa Orbitrap Fusion Lumos da Thermo Fisher combinada com a Nano-LC oferece uma variedade de serviços de análise de dànbáizhì, incluindo dànbáizhì quantitativa, dànbáizhì direcionada, polipéptida e proteômica modificada após tradução. Além disso, a PT Biotech lançou um novo serviço de dànbáizhì 4D baseado no timsTOF Pro, que facilita pesquisas em proteômica de amostras em microescala, medicina de grandes amostras e modificação de alta potência.

* Vantagens do serviço:

1 . Análise quantitativa de proteínas de alto fluxo: análise experimental em larga escala em grupos de controle múltiplos para a descoberta de novos biomarcadores;

2. vários métodos de marcação de dànbáizhì in vivo e in vitro, aplicáveis ​​à análise de tecidos, células, sangue e outras amostras;

Alta sensibilidade à análise espectrôlica de massa e alta repetição dos resultados experimentais;

4. pode detectar proteínas de baixa abundância, ampla gama linear;

5.zhuānyè análise bioinformática, análise mais sistemática e precisa.

Análise técnica de fluxo de espectro de massa de célula única

A biotecnologia da Betypake utiliza o sistema de fluxo de espectroscopia de massa Fluidigm para a análise técnica de fluxo de espectroscopia de massa de célula única, marcando a superfície da célula e as moléculas internas com marcadores de elementos metálicos (geralmente anticorpos específicos marcados com elementos metálicos), em seguida, separando as células individuais com o princípio da célula de fluxo, analisando o espectro de massa atômico de células individuais com espectroscopia de massa de plasma acoplado por indução (ICP-MS), e depois convertendo os dados do espectro de massa atômico em expressão molecular de sinal na superfície da célula e no interior.

* Vantagens do serviço:

Tecnologia avançada para preencher lacunas tecnológicas

A tecnologia de anticorpos marcados por metais evita os problemas de que os canais de fluorescência de fluxo tradicionais são poucos e fáceis de interagir. Com a capacidade de caracterizar vários indicadores simultaneamente a nível de uma única célula, a biotecnologia da Peptide pode detectar simultaneamente 51 proteínas alvo.

Grande quantidade de análise e baixo custo

O RNAseq de célula única é limitado por fatores como o custo, o número de células agregadas de todas as amostras é geralmente de cerca de 2x10 ^ 4, enquanto a tecnologia de espectroscopia de massa de fluxo pode analisar pelo menos 10 ^ 5 células de uma só vez (amostra única), alcançando um aumento quantitativo e o custo não é maior do que o RNAseq de célula única.

Grandes perspectivas de aplicação

Os resultados da espectroscopia de massa de fluxo podem dar mudanças na subpopulação celular, com grandes perspectivas de pesquisa no diagnóstico clínico e no estudo do mecanismo da doença;

Combinar a tecnologia de etiquetagem metálica com outras tecnologias terá uma nova direção de aplicação. Além das proteínas convencionais, a tecnologia celular de fluxo de massa também pode ser usada para modificação pós-tradução de proteínas;

É possível detectar a taxa de sobrevivência celular, tamanho celular, expressão de transcritor de mRNA, taxa de síntese de DNA e atividade de protease.

Análise imunopoliptídeomica com base em espectro de massa de alta precisão e descoberta de novos antígenos

A solução única para análise imunopoliptídeomica baseada em espectroscopia de massa de alta precisão e descoberta de novos antígenos da Biotec inclui nossa solução patenteada e altamente sensível de enriquecimento e identificação de imunópeptidos. Podemos ajudá-lo a identificar e identificar mais de 10.000 polipéptidos tipo I e mais de 10.000 polipéptidos tipo II. A análise imunopeptidómica é realizada através da nossa plataforma de análise imunopoliptídeomica de alto fluxo otimizada para identificação e quantificação repetida a partir de materiais de amostras pequenas do zuì. O serviço pode ser aplicado a pesquisas em larga escala para ajudar os pesquisadores a encontrar soluções para câncer, doenças imunológicas e doenças infecciosas e explorar alvos desconhecidos.

V. Caracterização Biofarmacêutica

Baseado em tecnologia de espectroscopia de massa de alta resolução, MALDI TOF， Tecnologia de separação cromatográfica de alta eficiência que oferece uma gama de soluções de análise de biofarmacêuticos de wánshàn, desde a composição de aminoácidos e análise estrutural de nível 1 de produtos biológicos como dànbáizhì, péptidos, anticorpos e vacinas até a análise de variabilidade e pureza do produto. O objetivo é fornecer serviços de análise de biomedicamentos de alta qualidade para ajudar os fabricantes de biomedicamentos a melhorar a qualidade dos biomedicamentos.

As sete principais plataformas de teste da biotecnologia

BioTecnologia da PTP - Caracterização de produtos biológicos, prestador de serviços de alta qualidade de espectrometria de biomassa

A Beijing Baitepike Biotechnology Co., Ltd. é dedicada a fornecer serviços de zhuānyè como testes de controle de qualidade e validação de projetos para as indústrias de dispositivos biológicos / farmacêuticos e médicos. Os laboratórios da empresa seguem as regulamentações e os princípios orientadores da NMPA, ICH, FDA e EMA, passaram pela certificação do sistema de qualidade duplo CNAS / ISO9001, estabeleceram um sistema de qualidade completo, backup de dados a frio e a calor / fora do local, medição regular do equipamento / verificação durante, rastreamento de auditoria de software, fornecendo soluções integradas e serviços técnicos para os clientes, apoiando o desenvolvimento de novos medicamentos, registro de declaração de medicamentos e lançamento de produção.

A empresa adota o sistema de controle de qualidade ISO9001, zhuānyè fornece serviços de análise de teste CRO baseados em espectro de massa;

Reconhecido pelo laboratório nacional CNAS para fornecer aos clientes serviços de pesquisa de qualidade de medicamentos em conformidade com as regulamentações farmacêuticas globais;

3. O âmbito de atividade abrange a dànbáizhí ómica, polipéptida ómica, metabólica, caracterização biofarmacêutica, análise de célula única, fluxo de espectro de massa de célula única, análise de nuvem de vida e análise de integração de espectro de matéria de vários grupos de estudantes, etc.

Sete plataformas de teste de controle de qualidade para atender às suas necessidades de serviço de parada única;

Serviço 3000 + empresas, escolha de 10000 + clientes;

Dedicado a fornecer-lhe serviços de análise de espectroscopia de biomassa de alta qualidade!

O que é a análise de peso molecular LC-MS? Objeto aplicávelMétodo e seus serviços técnicos de teste de comparação de vantagens e desvantagens