Linha de células endoteliais da veia umbilical humana

HUVEC Imortalização de células endoteliais da veia umbilical humana

Identificação celular

Identificação de imunofluorescência aprovada

l Fontes celulares

Banca Nacional de Recursos (Academia de Ciências de Xangai)

Fundo celular

A linha de células endoteliais da veia umbilical humana HUVEC foi fundada há muito tempo pelo ATCC dos Estados Unidos, mais tarde foi amplamente usada, mas nos últimos anos descobriram que a fonte celular tem poluição cruzada, agora foi retirada internacionalmente, os Estados Unidos também descobriram que as células têm problemas, então construíram um novo HUVE-C, mas a introdução da célula para o país é muito pobre, não pode ser usada. Portanto, é difícil encontrar no mercado células HUVE-C endoteliais da veia umbilical humana em bom estado que podem ser usadas. Nossa empresa também é devido à falta de células adequadas ao mesmo tempo bom estado e preciso, por isso fizemos uma linhagem de células originais domésticas para obter uma nova célula precisa: células endoteliais da veia umbilical humana. Identificação imunofluorescente de marcadores endoteliais individuais é fornecida. Células chamadas: células endoteliais da veia ombilical humana, e huve-c é o mesmo tipo de célula, todas pertencem às células endoteliais da veia ombilical humana, mas o nome é diferente, e como é construído no país, por isso não pode fornecer identificação STR, mas fornecer identificação imunofluorescência.

l Propriedades celulares

1) Fonte: Organização do cordão umbilical humano

2) Morfologia: Crescimento endotelial

3) Conteúdo: > 1x106 número de células

4) Especificações: garrafa T25 ou embalagem de tubo de congelamento de 1ml

5) Uso: somente para uso científico.

l Condições de cultivo:

1) Preparar o sistema de cultura de células endoteliais (recomendado: PriMed-awcell-002)

Cultura de células endoteliais 93%

Séro fetal bovino (FBS) 5%

Aditivos de cultura de células endoteliais 1%

penicilina / catenamicina, P/S 1%

2) Condições de cultivo: fase gás: ar, 95%; CO2, 5%. Temperatura: 37 ° C, umidade da bacia de cultivo de 70% -80%.

l Atenção:

Linha de células endoteliais da veia umbilical HUVEC para a transmissão de células adherentes pode se referir aos seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) pancreatase-0,53 mM EDTA em uma garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater um pouco na garrafa de cultura depois de adicionar 3-4ml de meio de cultura contendo 10S para terminar a digestão.

3. suavemente derrotado e aspirado, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicione 6-8ml de novo meio * configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 ~ 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

l Forma de transporte:

Temperatura baixa: (1) 1mL embalagem do tubo de congelamento para o transporte de gelo seco, depois de receber o frigorífico de -80 graus para conservar durante a noite após transferir para o nitrogênio líquido ou recuperação direta, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa do tubo de congelamento caiu, quebrou e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

Temperatura normal (2) T25 frasco de recuperação das células sobreviventes é enviado à temperatura normal, após recepção, de acordo com o tratamento após recepção das células.

Segurança Biológica

Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

Recomenda-se sempre usar luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.