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Fibrocitos de ratos

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Identificação do gênero de fibroblastos de ratos L929 O clone NCTC 929 (tecido conjuntivo de ratos), um clone da linha celular L, foi criado pela Anhui Biology em março de 1948. A linhagem L foi uma das primeiras linhagens de cultura contínua estabelecidas, enquanto o clone 929 foi a primeira linhagem clonada. A linha celular L progenitora foi estabelecida no tecido adiposo a partir de um tecido conjuntivo subcutâneo poroso normal de um camundongo C3H/An macho de 100 dias de idade. A linha celular L da 95ª geração foi estabelecida usando a tubulação capilar para isolar células únicas. O teste revelou que o vírus da varicela do rato é negativo.

Detalhes do produto

Fibrocitos de Rato L929Identificação biológica

Também conhecido como clone NCTC 929, é uma linha celular isolada do retino subcutâneo normal e do tecido adiposo de camundongos C3H/An. Estabelecida em março de 1948, foi uma das primeiras linhagens celulares de cultura contínua. As células L929 têm a forma de fibrócitos, crescem em proximidade e são sensíveis a vários vírus, como o vírus da bucite vesicular de Glasgow, o vírus da bucite vesicular de Orsay, o vírus da cardiomiopatite, etc. Além disso, eles são tumorais em camundongos imunosupresos e podem ser usados ​​como células hospedeiras para experimentos de transfecção.

As células L929 têm amplas aplicações em biologia celular e pesquisa biomédica, incluindo ensaios de toxicidade, pesquisa virológica, triagem de medicamentos, testes imunológicos e engenharia de tecidos. Suas propriedades de crescimento tornam-nos modelos importantes para o estudo da proliferação celular, citotoxicidade, adesão celular e conexões intercelulares. Em condições de cultura, as células L929 geralmente crescem em um meio de alta glicemia DMEM contendo 10% de soro fetal bovino e são cultivadas em 37 graus Celsius, 95% ar e 5% dióxido de carbono em fase gás.

Durante a cultura celular, a proporção de transmissão das células L929 é geralmente de 1: 2 a 1: 8, com um ciclo de transmissão de cerca de 2-3 dias, com a fórmula de líquido congelado de 92% e 8% de DMSO. Essas células são amplamente utilizadas em pesquisas científicas, mas é importante notar que todas as células que são transfectadas por tumores e vírus são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e, portanto, devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança secundário, com precauções adequadas.

Fibrocitos de Rato L929

NCTC clone 929[L929]

Identificação celular

Identificação de espécies aprovada

l Fontes celulares

Banca Nacional de Recursos

Fundo celular

Em março de 1948, foi criado o clone 929 do NCTC (tecido ligativo do rato), um clone da linha celular L. A linhagem L foi uma das primeiras linhagens de cultura contínua estabelecidas, enquanto o clone 929 foi a primeira linhagem clonada. A linha celular L progenitora foi estabelecida no tecido adiposo a partir de um tecido conjuntivo subcutâneo poroso normal de um camundongo C3H/An macho de 100 dias de idade. A linha celular L da 95ª geração foi estabelecida usando a tubulação capilar para isolar células únicas. O teste revelou que o vírus da varicela do rato é negativo.

l Propriedades celulares

1) Fonte: tecido: tecido conjuntivo subcutâneo; Porosa do tecido conjuntivo e da gordura: C3H/An;

2) Morfologia: fibroblastos, crescimento de parede;

3) Conteúdo: > 1x106 número de células;

Especificações: garrafa T25 ou embalagem de tubo de congelamento de 1ml;

5) Uso: somente para uso científico.

l Condições de cultivo

1) Preparar o meio de cultura MEM (awcell-0012 recomendado); soro de cavalo (recomendado: awcell-002b) 10%; Dupla resistência, 1%. A célula não pode ser cultivada com soro fetal bovino.

2) Condições de cultivo: fase gás: ar, 95%; CO2, 5%. Temperatura: 37 graus Celsius, umidade da bacia de cultivo de 70% -80%.

l Atenção

Para a transmissão de células adherentes podem ser consultados os seguintes métodos:

1. Eliminar a cultura e lavar as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio.

Adicionar 0,25% (w / v) pancreatase-0,53 mM EDTA em uma garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL), colocar em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e desmontar, rapidamente recuperar a mesa de operação, bater um pouco na garrafa de cultura depois de adicionar 3-4ml de meio de cultura contendo 10S para terminar a digestão.

3. suavemente derrotado e aspirado, centrifugar 3-5min em 1000RPM, descartar o líquido superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e soprar bem. Divida a suspensão celular em uma proporção de 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicione 6-8ml de novo meio * configurado de acordo com as instruções para manter a vitalidade do crescimento das células, e a transmissão subsequente é realizada em uma proporção de 1: 2 ~ 1: 5 de acordo com as circunstâncias reais.

3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares nas primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.

l Forma de transporte

Temperatura baixa: (1) 1mL embalagem do tubo de congelamento para o transporte de gelo seco, depois de receber o frigorífico de -80 graus para conservar durante a noite depois de transferir para o nitrogênio líquido ou recuperação direta descobriu que o gelo seco foi volátil e limpo, a tampa da garrafa do tubo de congelamento caiu, quebrou e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente.

Temperatura normal: (2) T25 frasco de recuperação de células sobreviventes é enviado à temperatura normal, após recepção, de acordo com o tratamento após recepção das células.

Segurança Biológica

Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados.

Recomenda-se sempre usar luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.