Microglia do rato BV2

NegociávelAtualização em05/06

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As células microgliais BV2 de camundongo são derivadas da DSMZ (coleção alemã de microorganismos e culturas celulares), derivadas das células microgliais C57BL/6 de camundongo, que expressam o gene nuclear v-myc, o cromossomo v-raf, a expressão superficial do antígeno envgp70, com características morfológicas, fenotípicas e funcionais de fagocitos. Os resultados imunohimicos mostraram que as células eram MAC1, MAC2 positivas, enquanto MAC3, glioblastoprofibroproteína, hemilactose encefalosidas eram negativas.

Detalhes do produto

O micróglio BV2 de camundongo é uma microglia derivada de camundongos C57/BL6 recém-nascidos que perpetua as células através da infecção por retrovírus J2 com o gene do câncer v-raf/v-myc. Eles preservam as características dos microglíados em termos morfológicos, fenótipos e funcionais e têm sido amplamente usados na pesquisa neurocientífica, especialmente na simulação de doenças do sistema nervoso e no estudo dos mecanismos de doenças relacionadas.

Tem as seguintes características:

Morfologia: as células BV2 não estimuladas apresentam uma forma amphiba-tipo, com um diâmetro de 10 a 15 μm.

Características de crescimento: meia suspensão, tempo de multiplicação de cerca de 34,5 horas.

Condições de cultivo: em meio de cultivo DMEM contendo 10°S, 37°C, 5% de CO2.

Vantagens: tem características de microglias originais, como expressão de biomarcadores chave como F4/80, CD11b e Iba1, e é uma célula perenne, adequada para experimentos de cultura de longo prazo.

Limitações: devido à sua origem em camundongos, a aplicabilidade dos resultados em estudos de doenças humanas pode ser limitada e, como modelo in vitro, pode não ser capaz de replicar as características e a complexidade das microglias no cérebro in vivo.

Aplicações na pesquisa de doenças neurodegenerativas incluem:

Como modelo para o estudo de doenças como Parkinson, Alzheimer e esclerose múltipla.

Utilizado para estudar neurotoxicidade e patologia da doença, avaliar o efeito dos medicamentos terapêuticos.

Ao cultivar células BV2, é necessário prestar atenção:

Durante a transmissão, como as células BV2 são semi-adesivas e semi-suspensas, as células em suspensão e adesivas devem ser coletadas separadamente para tratamento.

Quando congelado, recomenda-se o uso de 55% de meio de base + 40 S + 5% de líquido de congelamento de DMSO, a densidade de congelamento é de 2 ~ 3 × 10 ^ 6 células / mL.

Células Microgliais BV2 de Rato BV2[editar \| editar código-fonte]
Identificação celular	Identificação de espécies aprovada
l Fontes celulares	Banca Nacional de Recursos
Fundo celular	A célula é derivada da DSMZ (coleção alemã de microorganismos e culturas celulares), derivada das células microgliais C57BL/6 de rato, expressando o gene nuclear v-myc, o cromossomo v-raf e a expressão superficial do antígeno envgp70, com características morfológicas, fenotípicas e funcionais de fagocitos. Os resultados imunohimicos mostraram que as células eram MAC1, MAC2 positivas, enquanto MAC3, glioblastoprofibroproteína, hemilactose encefalosidas eram negativas.
l Propriedades celulares	1) Fonte: Cérebro do Rato 2) Morfologia: epitelial-tipo Crescimento de células coladas soltas, suspensas e coladas misturadas 3) Conteúdo: > 1x106 número de células 4) Especificações: garrafa T25 ou embalagem de tubo de congelamento de 1ml 5) Uso: somente para uso científico.
l Condições de cultivo:	1) Preparar o meio de base DMEM (recomendado: awcell-0001) 87% 优质胎牛血清 10% GlutaMAX-1 Glutamina (recomendado: awcell-0900) 1% Solução de tampão HEPES 1M (recomendado: awcell-01200) 1% P/S青霉素-链霉素 1%. 2) Condições de cultivo: fase gás: ar, 95%; CO2, 5%. Temperatura: 37 graus Celsius.
l Atenção:	Células microgliais BV2 do rato As células são suspensas e ligeiras células adherentes, a transmissão pode ser feita com referência aos seguintes métodos: Recolha: coleta as células suspensas da garrafa de cultura em um tubo centrífugo. Lave as células 1-2 vezes com PBS sem íons de cálcio e magnésio. Como a parede celular não é firme após a lubrificação do PBS, as células se desprendem, então o PBS também deve ser reciclado no tubo centrífugo. Adicionar 0,25% (w / v) pancreatase-0,53 mM EDTA na garrafa de cultura (garrafa T25 1-2mL, garrafa T75 2-3mL) colocado em uma caixa de cultura de 37 ° C para digerir por 1-2 minutos (as células difíceis de digerir podem prolongar adequadamente o tempo de digestão), em seguida, observar a digestão celular sob o microscópio, se a maioria das células se arredondar e cair rapidamente para recuperar a mesa de operação, bater alguns toques na garrafa de cultura e adicionar 3-4ml de meio de cultura contendo 10S para terminar a digestão. 3. As células em suspensão coletadas, as células no líquido de limpeza PBS e as células de parede digeridas são centrifugadas em 1000rpml por 5min, descartar a limpeza superior, adicionar 1-2mL de líquido de cultura e ressuspender e misturar depois de dividir a suspensão celular em proporção 1: 2 em uma nova garrafa T25, adicionar 6-8ml de acordo com as instruções do novo meio * configurado para manter a vitalidade do crescimento das células, a transmissão posterior é realizada de acordo com as circunstâncias reais na proporção 1: 2 ~ 1: 5. 3) Congelação celular: após a recepção das células, é recomendado congelar um lote de sementes celulares durante a cultura das primeiras 3 gerações para uso experimental posterior.
l Forma de transporte:	Temperatura baixa: (1) 1mL embalagem do tubo de congelamento para o transporte de gelo seco, depois de receber o frigorífico de -80 graus para conservar durante a noite após transferir para o nitrogênio líquido ou recuperação direta, se o gelo seco for descoberto volátil e limpo, a tampa da garrafa do tubo de congelamento caiu, quebrou e as células estão contaminadas, entre em contato conosco imediatamente. Temperatura normal (2) T25 frasco de recuperação das células sobreviventes é enviado à temperatura normal, após recepção, de acordo com o tratamento após recepção das células.
Segurança Biológica:	Todas as células animais são consideradas potencialmente biológicamente perigosas e devem ser operadas dentro de um banco de biossegurança de nível secundário, com cuidado, todos os resíduos e utensílios que entraram em contato com a célula devem ser esterilizados antes de serem descartados. Recomenda-se sempre usar luvas de proteção, roupas e máscaras de proteção durante a recuperação de células congeladas. Observação: O tubo de congelamento submerso em nitrogênio líquido vai vazar e vai lentamente encher o nitrogênio líquido. Quando descongelado, a fase de conversão de nitrogênio líquido em gás pode fazer com que o recipiente exploda ou sopra a tampa com força perigosa, gerando detritos volantes que causam danos pessoais.

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