Sequência de segunda geração

Sequência de segunda geraçãoApresentação:

A epigenética é um dos pontos quentes da pesquisa atual em biologia molecular, e a sequenciação da metilação do DNA é um componente importante da epigenética e uma das principais formas de modificação epigenética do DNA do genoma. A metilação do DNA refere-se a uma maneira modificada de transferir grupos metilicos para bases de citosina, catalizadas por DNA metiltransferases (DNMTs). Ocorre principalmente em regiões ricas em ilhas de duplo nucleótido CpG. Normalmente, a ilha CpG está presente na forma não metilada (forma ativa), e a metilação do DNA pode levar ao silêncio da expressão genética. A atividade anormal dos DNMTs está estreitamente relacionada com a doença. Ele desempenha um papel fundamental na manutenção da função celular normal, na transmissão da marca genética do genoma, no desenvolvimento embrionário e na formação de tumores humanos.

As asas de Xangai e Bio são tratadas por sulfato de hidrogênio (bisulfito), fragmentos de propósito amplificados com PCR múltipla, adicionando códigos de barras e junções genéricas de sequenciamento no Illumina X10Sequência de segunda geraçãoA plataforma para a sequência de alto fluxo de produtos de PCR, utilizando métodos bioinformáticos para o cálculo quantitativo preciso do estado de metilação dos locais de metilação dentro do intervalo alvo, reduzindo significativamente os custos de pesquisa ao concluir a detecção da área alvo.

O Hi-MethylSeq combina a tecnologia de sequência de alto fluxo de amplificadores direcionados e de conversão de sulfato para uma análise quantitativa precisa de metilação multissessão e multiponto. Este método é aplicável ao estudo de metilação de fragmentos de objetivo de interesse para confirmar ainda mais os locais positivos selecionados para o estudo de metilação de todo o genoma em uma amostra grande.

O tratamento de sulfatos pesados é o padrão de ouro para o processamento de DNA genômico em sequenciamento de metilação de DNA, é um processo químico que pode causar danos ao DNA, e é difícil alcançar a eficiência de conversão de 100% e manter a integridade do DNA ao mesmo tempo. Selecione 3 sequências de ilhas não CpG fora da área alvo do Hi-MethylSeq como controle interno para avaliar com precisão a taxa de conversão da amostra.